中华眼镜蛇毒组分F/H对大鼠心肌细胞缺氧-再给氧损伤的作用探讨

以 L aarse方法建立大鼠心肌细胞缺氧 -再给氧模型 ,缺氧缺糖 60 min,再给氧 1h,探讨组份 F和 H对实验性心肌细胞缺血再灌注的保护作用。实验结果显示 ,缺氧后心肌细胞成活率显著减少 ,心肌释放 LDH含量显著增加 ,细胞膜流动性下降 ,缺氧再给氧后上述各指标改变加剧。组份 F和 H能明显提高心肌细胞成活率 ,减少 L DH的释放 ,增加细胞膜流动性 ,减少心肌细胞膜的损伤 ,实验结论 ,组份 F和 H有明显抗心肌细胞缺氧 -再给氧损伤的作用 ,尤以组份 F作用更显著。

脂质体介导下pcDNA3．1／BDNF基因转染对缺糖缺氧-再给氧损伤神经细胞保护作用的实验研究

目的 研究脂质体介导下pcDNA3.1/BDNF基因转染对缺糖、缺氧-再给氧损伤神经细胞的保护作用.方法 建立缺糖、缺氧-再给氧损伤SH-SY5Y神经细胞模型,应用显微镜观察细胞形态、MTT比色法测定细胞存活率、苔盼蓝染色排斥试验检测细胞活力、测定SH-SY5Y细胞 LDH 释放率、Annexin V-FITC和Propidium Iodide双染色法荧光显微镜下观察细胞凋亡以及流式细胞仪检测细胞死亡和凋亡等方法,观察应用基因转染方法导入表达BDNF的基因片段（pcDNA3.1/BDNF）对缺糖、缺氧-再给氧损伤神经细胞的保护作用.结果 显微镜下观察到,在转染了表达BDNF基因的SH-SY5Y细胞中,经ATRA诱导后,即使实施了缺糖、缺氧-再给氧处理,其死亡、凋亡的细胞数和对照组相比明显减少,且细胞的形态改善显著;在细胞存活率、死亡率、LDH 释放率的测定结果中,基因转染组和对照组相比,显著提高了细胞的存活率,降低细胞死亡率和LDH 释放率（P＜0.05）;在Annexin V-FITC和Propidium Iodide双染色法荧光显微镜观察及流式细胞仪的检测中,转染了表达BDNF基因的SH-SY5Y细胞,经ATRA诱导后,其保护作用最好,和正常对照组比较,死亡、凋亡的细胞数显著减少.结论 应用基因转染方法导入表达BDNF的基因片段对缺糖、缺氧-再给氧损伤神经细胞具有保护作用.

极化液、美托洛尔对缺氧-再给氧心肌保护作用的实验研究

目的探讨极化液、美托洛尔对缺氧-再给氧心肌细胞的保护作用。方法用ACAS570粘附式细胞仪,以荧光探针技术(Lndo-1-AM)激光共聚焦扫描及免疫组化、灰度分析观察极化液、美托洛尔对培养心肌细胞缺氧-再给氧(A/R)时细胞内钙(Ca2+)荧光强度、乳酸脱氢酶(LDH)变化、超氧化物岐化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量及c-Fos表达的影响。结果心肌细胞A/R后,细胞内Ca2+荧光强度升高,对照组荧光强度和荧光比率分别为:167.3±32.8,0.3±0.04,A/R组为:562.3±128.6,97.6±12.8,p<0.01。细胞培养液中LDH、MDA含量增高,SOD活性、平均灰度值降低,p<0.01。极化液组、美托洛尔组和二药合用组,上述改变得到明显改善,以二药合用组最显著,Ca2+荧光强度显著降低为275±53.6,2.7±1.3,细胞培养液中LDH、MDA含量降低,SOD活性、平均灰度值显著增高,p<0.01。结论极化液、美托洛尔有阻止Ca2+内流,减轻Ca2+超载及明显抑制培养心肌细胞A/R的c-Fos表达、降低心肌A/R的损伤的作用。