冬眠动物达乌尔黄鼠离体心脏对缺灌和再灌损伤的耐受性

秋季未入眠之达乌尔黄鼠离体心脏用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ方法灌流，平衡１０ｍｉｎ，全心缺灌１５ｍｉｎ，然后再灌１０ｍｉｎ。于缺灌期和再灌期分别定时收集心脏冠脉流出液，测定流份中肌酸激酶（ＣＫ）的活性（Ｕ·Ｌ－１），同时记录心电图和心脏收缩力。此外，用恒温动物大鼠作为冬眠动物黄鼠的实验对照，经受完全相同的实验处理。缺灌１５ｍｉｎ期内，两种动物心脏皆有大量ＣＫ释放，释放量与缺灌时间呈线性关系。但黄鼠各采样点ＣＫ释放值都低于大鼠，提示黄鼠心脏对缺灌损伤的耐受性强于大鼠。再灌期大鼠心脏有两个ＣＫ释放峰，而黄鼠仅有第Ⅰ峰，且其活性值（１７９±３２Ｕ·Ｌ－１）显著低于大鼠（２５５±１７Ｕ·Ｌ－１，Ｐ＜０．０５）。再灌期黄鼠室颤和室速发生率以及心脏收缩幅度下降百分率皆显著低于大鼠（Ｐ＜０．０１）。上述结果证明，与大鼠相比较。

大鼠离体心脏缺灌和再灌早期乳酸脱氢酶和肌酸激酶的释放规律

用Ｌａｎｇｅｎｄｏｅｆｆ法灌流雄性Ｗｉｓｔａｒ大鼠心脏，平衡１０ｍｉｎ，缺灌１０ｍｉｎ，于再灌３ｍｉｎ内每隔１５ｓｅｃ收集一次冠脉流份，连续检测冠脉流份中ＣＫ、ＬＤＨ以及ＧＯＴ的活性（Ｕ／Ｌ），比较它们释放的动态特征。结果表明，再灌３ｍｉｎ内，３种酶都呈双相释放。第１峰出现在再灌１５ｓｅｃ，酶活性为对照值的５一９倍，它主要反映缺灌损伤。再灌９０一１２０ｓｅｃ又出现第Ⅱ峰，主要代表再灌损伤。无论是再灌３ｍｉｎ内酶释放总量，还是第Ⅰ，第Ⅱ峰的峰值，依酶活性高低排列的次序都是ＣＫ＞ＬＤＨ＞ＧＯＴ。此外，在部分动物身上进行了反复两次缺灌再灌实验，结果发现，第二次缺灌后ＣＫ释放量明显高于第一次缺灌值。ＬＤＨ的Ⅰ峰和Ⅱ峰出现时间与第一次无差别，只是３分钟内酶释放总量高于第一次。说明在本实验条件下，未见预缺灌处理对随后再次缺灌有保护作用。缺灌期心率逐渐减慢，收缩力逐渐减弱，但多数标本仍有微弱的收缩。这使缺灌期冠脉流份的酶活测定成为可能。实验发现，早在缺灌１ｍｉｎ时心肌细胞释放的酶，其活性可达对照值的２倍（ｐ＜０．０５），至缺灌１０ｍｉｎ时ＣＫ和ＬＤＨ的值可达对照值的１０倍左右。这一现象进一步证实，再灌１５ｓｅｃ内大量酶的?

应用缺次灌溉和半产需水量模型鉴定玉米杂交种的抗旱性

【目的】研究半产需水量模型鉴定玉米杂交种抗旱性的方法,为精细评价玉米杂交种的抗旱性提供方法指导。【方法】选用6个玉米品种,分别为郑单958、先玉335、新玉33号、新玉54号、新玉67号和新玉69号。在播种后、拔节期、抽雄期、散粉期、灌浆初期、灌浆中期、灌浆末期进行7次缺次灌水,累计灌水量分别为1 050.7、1 725.7、2 400.6、3 451.3、4 351.3、5 251.2、6 000.4 m^3/hm^2。对6个当前新疆主栽的玉米品种进行抗旱性鉴定。【结果】玉米产量与累计灌水量的关系符合幂饱和曲线模型,模型的产量计算值和产量实测值的相关系数为0.968～0.994,平均相关系数为0.984,均达到了极显著水平,模型拟合效果良好。通过拟合解析,6个玉米品种的半产需水量参数(W_h)在928.4～1 550.6 m^3/hm^2,充分灌水的产量参数(Y_m)在9 760.9～15 460.2 kg/hm^2。品种抗旱性排序结果依次为先玉335、新玉67号、新玉33号、新玉69号、郑单958、新玉54号。【结论】幂指数饱和模型能较好地拟合玉米杂交种的产量和水分关系,模型中的半产需水量是一个重要抗旱性指标,结合缺次灌溉方法,可用于玉米杂交种精细鉴定评价。

金丝桃苷对离体缺氧/缺糖再灌注脑损伤的保护作用

目的研究金丝桃苷对离体缺氧缺糖/再灌注脑损伤的保护作用。方法小鼠离体脑片缺氧缺糖/再灌注(OGD/RP)诱导的模型上,以2,3,5-三苯基氯化四氮唑(TTC)产物formazan定量测定脑片活性,同时计数单位面积脑片皮层和纹状体区的存活神经元。新生大鼠原代培养神经元OGD/RP损伤后测定乳酸脱氢酶(LDH)释放和噻唑蓝(MTT)液比色吸光度,评价神经元活性。观察不同浓度的金丝桃苷对于离体脑损伤的保护作用。结果金丝桃苷可有效减轻OGD/RP对脑片的缺血性损伤,并对于OGD/RP原代神经元具有显著的保护作用。结论金丝桃苷对离体缺氧缺糖/再灌注脑损伤具有明显的保护作用,此作用可能与其抗自由基生成、抑制Ca2+内流及脂质过氧化物形成有关。

mito K_(ATP)和κ-阿片受体介导肢体缺血后处理对抗大鼠脑缺血/复灌损伤

目的:观察肢体缺血后处理(LIPC)在大鼠局灶性脑缺血/复灌损伤中的神经保护作用及其作用机制。方法:将大鼠随机分为6组:空白对照组,单侧LIPC组,双侧LIPC组(bLIPC),bLIPC+mito KATP阻断剂5-hydroxyde-canoate(5-HD)预处理组,bLIPC+κ-阿片受体拮抗剂nor-binaltorphimine(nor-BNI)预处理组,bLIPC+双侧后肢体外循环组。采用线栓法建立大鼠大脑中动脉栓塞(MCAO)模型,术后进行神经系统症状评分,血浆强啡肽和脑啡肽水平测定,大脑梗死面积测定。结果:单侧LIPC能改善大鼠局灶性脑缺血/复灌损伤后的神经系统功能评分(P<0.05),并减少大脑梗死面积(P<0.01);而双侧LIPC能显著提高大鼠局灶性脑缺血/复灌损伤后的神经系统功能评分,并显著减少大脑梗死面积(P<0.01),比单侧LIPC的作用更为明显(P<0.05)。双侧LIPC后5、15、30min,1和2h这五个时间点,血浆强啡肽水平显著增高(P<0.01),12和24h这两个时间点恢复至正常水平;而血浆脑啡肽水平的改变与双侧LIPC前比较无显著差异(P>0.05)。nor-BNI预处理(25nmol)和5-HD预处理(10mg/kg)均消除了双侧LIPC所致的神经系统功能评分增加和大脑梗死面积减少(P<0.01)。结论:LIPC在大鼠局灶性脑缺血/复灌损伤中具有显著的神经保护作用,其作用可能与LIPC诱导内源性阿片激动剂释放和激活mitoKATP有关。

丹皮酚对缺糖缺氧再灌诱导的心肌细胞凋亡及相关基因Bcl-2 Bax蛋白表达的影响

目的:探讨丹皮酚(Paeonol Pae)对培养乳鼠心肌细胞缺糖缺氧再灌时心肌细胞凋亡及凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法:建立原代培养的新生大鼠心肌细胞缺糖缺氧再灌损伤模型,随机分组:对照组;模型组;丹皮酚组;用AnnexinⅤ-FITC/PI双标记法测定细胞凋亡率;以免疫组织化学方法检测心肌细胞Bcl-2、Bax蛋白表达变化。结果:缺糖缺氧再灌后,细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.01),心肌细胞Bcl-2蛋白阳性表达指数(positive expression index PEI)显著低于对照组(P<0.01),Bax蛋白PEI明显的高于对照组(P<0.01),Bcl-2/Bax比值明显的低于对照组(P<0.01)。与缺糖缺氧再灌组比较,Pae干预组细胞凋亡率显著降低(P<0.01),Bcl-2蛋白PEI显著升高(P<0.01),Bax蛋白PEI显著降低(P<0.05,P<0.01),Bcl-2/Bax比值明显高于缺糖缺氧再灌组(P<0.01)。结论:Pae可抑制缺糖缺氧再灌损伤心肌细胞凋亡,其作用可能是通过上调Bcl-2蛋白表达,抑制Bax蛋白表达,增加Bcl-2/Bax比值实现的。

缺血预适应对大鼠乳鼠心肌细胞缺血/再灌损伤的保护作用

目的探讨缺血预适应对乳鼠心肌细胞缺血/再灌损伤的保护作用。方法复制大鼠乳鼠心肌细胞培养模型,试验分为四组:正常对照组:正常培养乳鼠心肌细胞;缺血再灌注组:缺血3h,再灌注9h;预适应组:先缺血90min,再灌注60min,再缺血3h,再灌注9h;预适应加caffeine组:缺血90min,再灌注20min后加入caffeine继续缺血40min后,再缺血3h,再灌注9h。分别测定乳鼠心肌细胞培养液中乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;HE检测各组心肌细胞损伤情况。结果检测乳鼠心肌细胞培养液中LDH活力、MDA水平和SOD活力时发现,缺血再灌注组和预适应加caffeine组的培养液中LDH活力、MDA水平与对照组相比明显增加,而SOD活力与对照组相比则是降低。培养的乳鼠心肌细胞的HE染色可见缺血再灌注组细胞体积变小,胞核浓缩,胞质嗜酸性增强,其病理学改变比预适应组和预适应加caffeine组严重。结论缺血预适应对大鼠乳鼠心肌细胞缺血/再灌损伤有保护作用。

NADPH对人脐静脉内皮细胞缺糖缺氧复灌损伤早期的保护作用

目的探讨还原型辅酶Ⅱ(NADPH)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺糖缺氧复灌(OGD/R)损伤早期的保护作用及其对occludin、基质金属蛋白酶(MMP)9蛋白表达的影响。方法体外培养HUVECs系,建立稳定的HUVECs缺糖缺氧复灌损伤模型,实验分3组:正常对照组、缺糖缺氧复灌组、缺糖缺氧复灌+NADPH组。细胞增殖试剂盒(CCK-8法)检测HUVECs活力;细胞毒性试剂盒检测HUVECs内乳酸脱氢酶(LDH)释放;倒置显微镜观察HUVECs形态变化;比色法检测HUVECs裂解液中超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量;Western Blot法检测各组occludin、MMP9蛋白的表达。结果与缺糖缺氧复灌组比,NADPH处理可提高缺糖缺氧复灌损伤后HUVECs的存活率(P<0.05),减少损伤后HUVECs中LDH释放(P<0.05),促进HUVECs形态的恢复,减少MDA生成(P<0.05),提高SOD活力(P<0.05);缺糖缺氧复灌处理后,给予NADPH处理可抑制MMP9水平上调(P<0.05),促进occludin水平恢复(P<0.05)。结论 NADPH对HUVECs具有保护作用,其保护作用与抑制氧化应激反应,调节MMP9、occludin蛋白的表达有关。

不同灌水和施肥处理对春小麦产量的影响

通过模拟大田条件下不同生育阶段的水分亏缺对小麦生长发育的影响,分析了不同生育期缺灌水处理对春小麦产量的影响.结果表明,任一时期的缺灌处理都会使产量降低,但不同时期缺灌处理对产量构成因素的影响不同,缺灌拔节水的处理B的产量较对照减产最多,主要是因为穗数和每穗粒数都较对照减少;缺灌分蘖水的处理C的产量较对照降低,主要是因为穗数较对照下降;而缺灌开花水的处理D和缺灌麦黄水的处理E的产量较对照降低,主要是因为粒重较对照降低的缘故.