通塞脉微丸和丁基苯酞对PC12细胞缺氧缺糖损伤模型的保护作用

目的探讨通塞脉微丸和丁基苯酞对PC12细胞缺氧缺糖损伤模型的保护作用。方法以肾上腺嗜铬瘤克隆化细胞株PC12细胞为材料,制备缺氧、缺糖损伤模型;MTT法测定PCl2细胞存活数及乳酸脱清酶法测定细胞损伤程度。结果形态学检查发现,通塞脉微丸和丁基苯酞对两种损伤模型中的PC12细胞具有明显保护作用,MTT染色和乳酸脱氢酶活性测定显示,通塞脉微丸和丁基苯酞可显著提高损伤模型中PC12细胞的存活数,降低细胞损伤程度,其中以对缺氧损伤保护作用尤为显著。结论通塞脉微丸和丁基苯酞对PC12细胞缺氧和缺糖损伤模型均有显著保护作用。

注射用血塞通对SH-SY5Y细胞缺糖缺氧损伤模型Lingo-1表达的影响

目的建立SH-SY5Y细胞缺糖缺氧损伤模型,考察注射用血塞通对缺糖缺氧损伤SH-SY5Y细胞存活、凋亡及Lingo-1 mRNA及蛋白表达的影响。方法采用RPMI 1640无糖培养基和三气培养箱缺氧法制备SH-SY5Y细胞缺糖缺氧损伤模型,CCK8法测定细胞存活率,确定最佳缺氧时间及最适注射用血塞通质量浓度,Annexin V-FITC/PI双染法检测SH-SY5Y细胞凋亡率,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)方法测定Lingo-1 mRNA表达情况,Western blotting法测定Lingo-1蛋白表达情况。结果SH-SY5Y细胞缺糖缺氧损伤模型的最佳缺氧时间为16 h,注射用血塞通最适质量浓度为640 mg/L,在该质量浓度条件作用下,血塞通组与模型组相比,SH-SY5Y细胞的凋亡率显著降低,Lingo-1的mRNA表达水平及蛋白表达水平均显著降低。结论当SH-SY5Y细胞受到缺糖缺氧损伤后,细胞凋亡率显著升高,Lingo-1呈高表达状态,血塞通可以明显减少缺糖缺氧损伤SH-SY5Y细胞的凋亡,同时抑制Lingo-1的高表达,具有抑制凋亡和显著的神经保护作用。

大鼠皮质神经细胞缺氧缺糖损伤后MAP-2表达变化规律

目的观察原代培养大鼠大脑皮质神经细胞缺氧缺糖（OGD）损伤24h内的形态学及微管相关蛋白2（MAP-2）表达变化。方法使用出生1-2d的Wistar大鼠,取大脑皮质神经细胞进行原代培养,用连二亚硫酸钠加低糖培养基制作神经细胞OGD损伤模型,损伤后应用倒置显微镜观察形态学变化,Western印迹法观察MAP-2蛋白表达变化。结果原代培养大鼠大脑皮质神经细胞OGD损伤后1h,少数神经细胞突起缩短;伤后6-12h神经细胞胞体明显皱缩,多数细胞突起缩短或消失;伤后24h神经细胞形态部分恢复,部分突起重新出现。Western印迹法显示,MAP-2在神经细胞OGD损伤后1h表达降低,伤后12h达低谷,24h表达升高。结论 OGD损伤后,原代培养大鼠大脑皮质神经细胞的形态及MAP-2表达随时间呈现一定的规律性变化。

吡那地尔对缺氧缺糖损伤神经细胞的保护作用

目的 探讨ATP敏感性钾通道(KATP)开放剂吡那地尔(Pinacidil,Pin)对体外培养大鼠大脑皮层神经细胞缺氧缺糖损伤的保护作用。 方法 取培养10 d神经细胞,建立神经细胞缺氧缺糖损伤模型。实验分正常对照组、模型对照组、给药组(Pin和 Pin+Gli处理组),观察缺氧缺糖 4、8、16 h,再复氧24 h后神经细胞死亡率、乳酸脱氢酶(LDH)漏出量和细胞凋亡率的变化,并观察 Pin及KATP通道阻断剂格列苯脲(Gli)对其影响。 结果 经缺氧缺糖损伤后神经细胞死亡率、LDH%和细胞凋亡率均显著升高,Pin干预后,细胞死亡率(4 h: 21.42±3.68和14.83±2.94; 8 h: 36.58±6.14和19.25±3.33; 16 h: 49.17±8.3和28.64±6.4, P值均<0.01)、LDH%(4 h: 26.9±6.1和13.2±4.1; 8 h: 31.4±4.9和18.7±5.3; 16 h: 47.7±6.5和28.1±6.8, P值均<0.01)和细胞凋亡率(16 h: 42±7.8和20.4±5.5, P<0.01)均显著下降,Gli能对抗 Pin这种保护作用。 结论 KATP开放剂Pin具有直接的神经保护作用,其发挥保护作用的机制与其抑制神经细胞凋亡有关。

银杏达莫注射液对缺氧缺糖损伤大鼠心肌细胞的保护作用

目的探讨银杏达莫注射液对大鼠心肌细胞缺氧缺糖损伤的保护作用。方法建立乳鼠心肌细胞缺氧缺糖损伤模型。将培养的细胞随机分成5组:正常组、缺氧缺糖组、银杏达莫注射液低、中、高剂量组(0.28、0.84、1.40 mg·mL^(-1))。观察银杏达莫注射液对心肌细胞一氧化氮(NO),丙二醛(MDA),乳酸脱氢酶(LDH)含量和超氧化歧化酶(SOD)活性的影响,采用流式细胞仪技术检测各组细胞的凋亡率,采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术监测各组对心肌细胞缝隙连接蛋白43(Cx43)基因转录水平的影响。结果相对于缺氧缺糖组,银杏达莫注射液明显抑制NO、MDA、LDH的产生,更能显著增强胞内SOD活性。银杏达莫注射液中、高剂量组可明显改善心肌细胞形态,抑制细胞凋亡,有效下调心肌细胞中Cx43基因的过表达。结论银杏达莫注射液对大鼠心肌细胞的缺氧缺糖损伤有明显的保护作用,其作用机制与抗氧化、抑制细胞凋亡及维持心肌缝隙连接通道等相关。