NADPH对人脐静脉内皮细胞缺糖缺氧复灌损伤早期的保护作用

目的探讨还原型辅酶Ⅱ(NADPH)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)缺糖缺氧复灌(OGD/R)损伤早期的保护作用及其对occludin、基质金属蛋白酶(MMP)9蛋白表达的影响。方法体外培养HUVECs系,建立稳定的HUVECs缺糖缺氧复灌损伤模型,实验分3组:正常对照组、缺糖缺氧复灌组、缺糖缺氧复灌+NADPH组。细胞增殖试剂盒(CCK-8法)检测HUVECs活力;细胞毒性试剂盒检测HUVECs内乳酸脱氢酶(LDH)释放;倒置显微镜观察HUVECs形态变化;比色法检测HUVECs裂解液中超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量;Western Blot法检测各组occludin、MMP9蛋白的表达。结果与缺糖缺氧复灌组比,NADPH处理可提高缺糖缺氧复灌损伤后HUVECs的存活率(P<0.05),减少损伤后HUVECs中LDH释放(P<0.05),促进HUVECs形态的恢复,减少MDA生成(P<0.05),提高SOD活力(P<0.05);缺糖缺氧复灌处理后,给予NADPH处理可抑制MMP9水平上调(P<0.05),促进occludin水平恢复(P<0.05)。结论 NADPH对HUVECs具有保护作用,其保护作用与抑制氧化应激反应,调节MMP9、occludin蛋白的表达有关。