氟比洛芬酯预处理对大鼠全脑缺血/再灌注时脑组织TXA_2/PGI_2的影响

目的探讨氟比洛芬酯预处理对大鼠全脑缺血/再灌注损伤的影响。方法72只♂SD大鼠,体重250～350g,随机分为4组(n=18):假手术组(SH组)、模型组(Model组)、氟比洛芬酯5mg·kg-1组(F5组)和氟比洛芬酯10mg·kg-1组(F10组)。采用夹闭双侧颈总动脉20min合并低血压法建立全脑缺血/再灌注(I/R)模型。F5组和F10组分别于缺血前15min静注氟比洛芬酯5mg·kg-1+空白乳剂0.5ml.kg-1、氟比洛芬酯10mg·kg-1。于再灌注6、24、72h时行神经功能缺陷评分(NDS)、HE染色观察海马CA1区细胞损伤情况、放射免疫法测定额区皮质血栓素A2(TXA2)和前列环素(PGI2)含量。结果氟比洛芬酯5mg·kg-1组(F5组)或氟比洛芬酯10mg·kg-1组(F10组)预处理可明显减轻大鼠全脑缺血/再灌注后海马CA1区损伤,提高神经功能缺陷评分(NDS),降低脑组织中TXA2含量和TXA2/PGI2值,且F10组较F5组海马CA1区损伤更轻。结论氟比洛芬酯预处理可减轻全脑缺血/再灌注损伤,其机制可能与降低TXA2值和TXA2/PGI2值有关。

杭白菊总黄酮对大鼠缺血/再灌损伤大脑的保护作用

目的观察杭白菊总黄酮(total flavones extracted from chrysanthemum morifolium,TFCM)对大鼠缺血/再灌损伤大脑的影响,并初步探讨其机制。方法采用大脑中动脉内栓线梗塞法造成大鼠局灶性脑缺血/再灌损伤模型,缺血90min,再灌注22h后,以盐酸2,3,5-三苯基四氮唑染色法测定脑梗死面积,比色法测定脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性及丙二醛(malondialdehycle,MDA)含量,采用“10分法”进行神经症状评分。用荧光分光光度计检测氧自由基(reactive oxygen species,ROS)的生成;测定分离脑线粒体540nm处吸光度。结果TFCM(50,100,200mg·kg-1,ip)能明显改善脑缺血/再灌后大鼠神经症状,明显减小梗死面积与全脑面积之比,提高缺血脑组织SOD活性,降低MDA含量,并减少脑组织ROS的生成。TFCM减轻Ca2+诱导的脑线粒体肿胀,此作用可被苍术苷所拮抗。结论TFCM对大鼠缺血/再灌损伤大脑具有显著的保护作用,其作用机制可能与TFCM抗氧化作用进而抑制线粒体肿胀有关。

L-精氨酸对大鼠心肌相对缺血/再灌注损伤保护作用的研究

目的:探索L-精氨酸(L-Arg)对心肌相对缺血/再灌损伤的保护作用,为研究抗心肌损伤的保护措施提供依据。方法:Wastar大鼠24只,随机分为对照组、相对缺血损伤组和相对缺血损伤+L-精氨酸组。采用高频阈上电刺激大鼠离体心脏建立离体心肌相对缺血/再灌注模型,分别于相对缺血前、缺血后15min和30min收集冠脉流出液,测定丙二醛(MDA)含量、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性;采用Pclab生物信号采集处理系统测定相对缺血损伤后5min、10min、20min和30min时的心率脉压乘积(PRP)、左心室收缩压变化速率(+DP/dtmax)和舒张压变化速率(-Dp/dtmAx)的恢复率。结果:L-精氨酸组的PRP、+DP/dtmax和-Dp/dtmax恢复率,明显优于相对缺血损伤组(P<0.05);L-精氨酸组的冠脉流出液和心肌组织中的丙二醛(MDA)含量、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)活性,低于相对缺血损伤组(P<0.05),而L-精氨酸组的心肌超氧化物歧化酶(SOD)活性高于缺血组(P<0.01)。结论:L-精氨酸对心肌相对缺血/再灌损伤具有一定的保护作用。

维药爱维心对离体大鼠心肌缺血/再灌损伤作用机制研究

目的探讨维药爱维心在缺血/再灌(I/R)损伤过程中对大鼠离体心脏心功能、心律失常、心肌细胞活性、心肌酶及心肌细胞凋亡的保护作用及其可能的作用机制。方法采用离体大鼠心脏Langendorff灌流模型,全心停灌30min,再灌60min建立I/R模型。用MedLab生物信号采集处理系统记录分析血流动力学及心律失常指标;实验结束检测心肌组织中甲臜(formazan)含量;测定再灌注各时间点心脏流出液中乳酸脱氢酶(lactate dehy-drogenase,LDH)的含量;SABC免疫组织化学法检测心肌细胞凋亡指数;透射电子显微镜观察心肌超微结构的改变。结果与对照组比较,爱维心5mL/L处理组能够明显降低缺血/再灌引起的大鼠离体灌流心脏左心室舒张末期压力(LVEDP),增强左心室最大舒张速率(-dp/dtmax)和心脏做功(rate-pressure product,LVDP×heartrate,RPP)(P<0.01),降低I/R心肌LDH含量(P<0.01),下调凋亡指数(P<0.01),并且能降低缺血心肌细胞的线粒体损伤程度。结论爱维心可改善离体大鼠I/R损伤心肌顺应性,保护和稳定心肌细胞膜,并有抑制心肌细胞凋亡的作用。

碱性成纤维细胞生长因子对大鼠缺血/再灌心脏金属硫蛋白含量的影响

目的:在大鼠离体心脏缺血一再灌注(I/R)损伤模型上,观察bFGF对心肌金属硫蛋白的影响,探讨bFGF心肌保护作用的可能机制、方法:复制大鼠离体心脏I/R损伤模型。预先24h应用bFGF,以生理多导仪测定±dp/dt max.[Cd109]一血红素饱和法测定心肌MT含量,硫代巴比妥法测心肌丙二醛(MDA)含量,以自动生化分析仪测灌流液乳酸脱氢酶(LDH)活性.结果:bFGF可诱导心肌MT生成,bFGF组心肌MT含量升高,MDA含量大于I/R组.灌流液乳酸脱氢酶(LDH)及蛋白漏出明显减少,同时心功能明显改善。结论:MT参与了bFGF对大鼠离体心肌缺血-再灌注(I/R)损伤心肌保护作用。

sRAGE抑制缺血/再灌注引起的心肌细胞自噬

可溶性晚期糖基化终末产物受体(soluble receptor for advanced glycation end-products,s RAGE)作为内源性保护物质,能够拮抗心肌缺血/再灌注(ischemia/reperfusion,I/R)损伤发生,重要机制是减轻心肌细胞凋亡。而近年来随着细胞死亡研究的深入,细胞自噬被认为是一种新的细胞程序性死亡。s RAGE是否可以抑制缺血/再灌引起的心肌细胞自噬尚未见报道。本文研究证明,s RAGE可抑制缺血/再灌注引起的心肌细胞自噬。以心肌细胞缺氧/复氧模拟心肌细胞缺血/再灌注模型,蛋白质印迹检测自噬门户蛋白beclin-1的表达,激光共聚焦显微镜检测自噬小体及自噬溶酶体的形成。心肌再灌注期间,心肌细胞自噬小体增加,而自噬溶酶体下降。细胞内自噬小体堆积,说明心肌细胞缺血/再灌注使自噬小体与溶酶体结合受损,清除发生障碍。与缺血/再灌注(I/R)组比较,缺血/再灌+s RAGE(I/R+s RAGE)组的自噬流减弱。此外,自噬门户蛋白beclin-1也表达下降。以上结果从细胞形态学和蛋白水平两方面说明,s RAGE抑制了I/R引起的心肌细胞自噬。换言之,s RAGE可以直接作用于心肌细胞拮抗缺血/再灌注损伤,其保护性作用可能与抑制心肌细胞自噬有关。

TRPV4激动剂4α-PDD减轻大鼠脑缺血/再灌损伤

目的研究内皮瞬时受体电位香草酸亚型4(TRPV4)对大鼠脑缺血/再灌损伤的保护作用及其机制。方法将30只SD大鼠随机分成sham组和大脑中动脉闭塞(MCAO)组和4α-PDD干预组。MCAO 3 h,再灌注72 h。采用TTC方法检测脑梗死体积、Garcia评分评估神经损伤程度和定量RT-PCR检测内皮型一氧化氮合酶(e NOS)、血管内皮生长因子A受体-2(VEGFA-2)和血管内皮生长因子A(VEGFA) mRNA表达;免疫组化检测CD3和Sox2蛋白表达。结果与sham组相比,MCAO组大鼠脑梗死体积及神经功能缺损明显增加(P<0. 001)。4α-PDD可使MCAO后大鼠脑梗死体积显著缩小(P<0. 001),并改善神经功能缺损(P<0. 05)。4α-PDD显著增加缺血半影区e NOS、VEGFA和VEGFA-2 mRNA表达(P<0. 001)并使缺血半影区内微血管密度显著增加(P<0. 001),而且神经祖细胞(NPC)在缺血半影区增殖和迁移均增加。结论 4α-PDD可能通过促进大鼠缺血半影区血管和神经再生改善MCAO后神经功能损伤。

用电子自旋共振(ESR)检测缺血/再灌流岛状皮瓣自由基含量变化的研究

氧自由基在许多疾病过程中起重要作用,包括缺血/再灌流后的组织损伤。本研究,采用大白鼠的腹部岛状皮瓣模型,用电子自旋共振法测定缺血/再灌流后组织中自由基浓度的变化,从而证实氧自由基在组织再灌流损伤中的病理作用。

Daxx反义寡核苷酸在全脑缺血/再灌损伤中作用机制的研究

目的:检测Daxx反义寡核苷酸在大鼠海马全脑缺血/再灌介导的神经元损伤中作用机制的研究。方法采用SD大鼠四动脉结扎全脑缺血模型,于缺血前连续3d脑室注射Daxx反义寡核苷酸,用免疫印迹方法研究Daxx反义寡核苷酸在大鼠海马全脑缺血/再灌介导的神经元损伤中对 Daxx/Ask1信号通路的影响。结果在海马的CA1区,Daxx反义寡核苷酸可以明显抑制脑缺血介导的Daxx的核转位以及Ask1磷酸化的升高。结论缺血前3d连续脑室注射 Daxx反义寡核苷酸可以明显抑制Daxx/Ask1介导细胞信号转导通路。

心脉隆注射液对大鼠脑缺血/再灌后小胶质细胞活化和不同亚型分化的影响

目的:研究心脉隆注射液(XML)对大鼠大脑中动脉阻塞/再灌注(MCAO/R)后小胶质细胞活化和不同亚型分化的影响。方法:建立大鼠大脑MCAO/R模型,于再灌1 h后给药,连续3次,每次间隔24 h。采用免疫荧光法观察XML对缺血半暗带区钙离子接头蛋白-1(Iba-1)阳性细胞(即激活的小胶质细胞)密度的影响,采用Q-PCR法测定XML对缺血半暗带区CD16和Arginase-1基因表达水平的影响。结果:与MCAO/R模型组相比,XML可显著减少MCAO/R大鼠缺血半暗带区增加的小胶质细胞密度,降低CD16基因表达水平,但不影响Arginase-1基因表达水平。结论:XML能降低缺血半暗带区小胶质细胞的激活,减少小胶质细胞向M1亚型的转化,而不影响其向M2亚型转化。

缺血-再灌流时卡巴胆碱对大鼠肠上皮细胞的保护作用

目的:研究缺血/再灌流(I/R)时卡巴胆碱(ca)对肠上皮细胞的保护作用及可能机制.方法:阻断Wistar大鼠SMA血量建立I/R模型,并以肠袋内注射卡巴胆碱进行处理.采用病理学方法观察不同时间肠上皮细胞损伤指数,免疫组化法检测肠上皮细胞TNF-α表达的变化;生化法检测肠组织中DAO含量(nkat/g pro)的变化.结果:I/R+Ca组再灌流各时间点肠上皮细胞病理变化较I/R+NS组轻(P<0.01);I/R+Ca组再灌流各时间点肠袋组织DAO含量较I/R+NS组显著增加(0 min:42.01±7.17 vs 18.50±7.83;30 min:44.51±8.00 vs 20.00±5.83;60 min:35.67±7.00 vs 16.34±8.17;120 min:39.00±7.33 vs 21.84±6.67;240 min:53.34±8.17 vs 45.68±6.00;均P<0.01),而I/R+Ca组再灌流各时间点肠上皮细胞中呈TNF-α阳性细胞数较I/R+NS组明显减少(0 min:204.4±12 vs 246.4±15.6;30 min:198.4±11.2 vs 230.4±14.4;60 min:234.4±12.1 vs 270.4±17.1;120 min:225.4±10.2 vs 260.4±18.5;240 min:196.4±10.8 vs 220.4±18.2;均P<0.01).结论:卡巴胆碱能抑制缺血-再灌流时肠上皮细胞中TNF-α表达,减轻病理损害,对肠上皮细胞具有保护作用.

培养心肌细胞内的SDH图象分析——大豆磷脂脂质体对缺血再灌心肌膜损伤的影响

琥珀酸脱氢酶(SDH)的活性在判断心肌缺血,再灌性损伤中起重要作用。本文通过IBAS图象分析系统对缺血再灌的培养心肌细胞内的SDH定量评估,以求探讨大豆磷脂脂质体对心肌缺血再灌性损伤的保护作用。结果表明,在缺血及再灌组的心肌细胞内出现较强的SDH损伤性反应,大豆磷脂脂质体能明显减轻这种反应,提示大豆磷脂脂质体对缺血及缺血/再灌心肌具有明显的保护作用。

血管紧张素Ⅱ2型受体活化在缺血再灌损伤中的神经保护作用及机制研究

目的评估血管紧张素Ⅱ2型(AT2)受体激动剂CGP42112在体内、外脑缺血/再灌损伤中的保护作用及机制探讨。方法 Wistar大鼠行3 h大脑中动脉阻塞(MCAO),再灌21 h。再灌期间大鼠腹腔注射CGP42112(1 mg/kg)和(或)IL-10中和抗体(0.1 mg/kg)。大鼠手术24 h后进行梗死体积、行为结果和ELISA分析。并采用大鼠原代神经元氧糖剥夺/复氧(OGD/R)模型用来观察CGP42112在体外的神经保护作用。结果与对照大鼠比较,CGP42112处理可减少缺血大脑半球梗死体积、改善神经功能预后,并减少肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达。而IL-10中和抗体可逆转CGP42112处理引起的梗死体积、炎症缓解及神经功能改善。在体外,CGP42112可使OGD/R神经元活力增加,并减少细胞凋亡。结论在体内CGP42112可能通过IL-10发挥神经保护作用;在体外则具有直接神经保护作用。

六味通心颗粒对大鼠心肌缺血再灌损伤模型心功能的影响

目的观察六味通心颗粒对大鼠心肌缺血再灌损伤模型左室收缩压（LVSP）、左室舒张末压（LVEDP）、左心室的最大收缩速率（＋dp／dtmax）、左心室最大舒张速率（-dp／dtmax）的影响，探讨六味通心颗粒对大鼠心肌缺血再灌损伤模型的作用。方法雄性SD大鼠36只，体重180—220g，按体重随机分为三组，假手术组、缺血再灌注组、预防给药组；预防给药组连续给药4周后实验，连续观察2h各组大鼠心电图及心功能LVSP、LVEDP、＋dp／dtmax、-dp／dtmax的水平，腹主动脉取血离心去血清-80℃储存备用，取300mg心脏组织匀浆离心取上清-80℃储存，取部分心脏组织放于中性甲醛溶液固定。结果与模型组比较，预处理组在缺血期、再灌注期能升高LVSP、＋dp／dtmax水平一dp／dtmax，对LVEDP的升高有一定的抑制作用（P〈0．05、P〈0．01）。结论预防给药组对大鼠心肌缺血再灌损伤模型心功能有一定的改善作用。

钩藤总碱抗实验性脑缺血的作用

目的 观察钩藤总碱 (Rhynchophyllatotalalkaloids,RTA )对脑缺血损伤的影响并对其作用机制作初步探讨。方法 采用小鼠断头张口喘气模型 ,大鼠大脑中动脉缺血 2h/再灌注 2 2h模型 ,神经病学评分 ,脑梗死范围及脑组织水含量变化 ,观察对脑缺血 /再灌注损伤的影响 ;通过测定大鼠脑组织中一氧化氮合酶 (nitricoxidesynthase,NOS)、超氧化物歧化酶 (superoxidedisumtase ,SOD)活性及丙二醛 (malon dialdehyde ,MDA)含量的变化 ,并经原位末端标记法观察对脑细胞凋亡的影响以探讨药物作用的机制。结果 RTA可延长小鼠张口喘气时间 ,降低大鼠脑缺血 /再灌注后神经病学评分及梗死范围 ,降低脑组织MDA、NOS含量及升高SOD活性 ,RTA还能减少神经细胞的凋亡。结论 RTA对脑缺血 /再灌注损伤有保护作用 ,其作用与抑制NOS活性 ,提高SOD活性 ,减少神经细胞脂质过氧化损伤和抑制神经细胞凋亡有关。

无创性肢体缺血预适应对大鼠心脏的保护作用

目的研究无创性肢体缺血预适应(RIP)对大鼠缺血/再灌后心脏损伤的影响。方法采用无创性后肢缺血预适应的方法,观察其对心肌缺血/再灌后心脏生理学(HR、MAP、ST段)、室性心律失常的出现时间和持续时间的影响以及其对心肌缺血/再灌后梗死面积和形态学改变的影响。结果与对照组比较,处理组对心肌缺血/再灌后HR和MAP的影响差异无显著性,但是RIP能明显降低ST段的抬高幅度,推迟室性心律失常出现的时间,缩短持续时间,并且能减少心肌梗死面积,降低心肌细胞的肿胀、减少间质出血和炎性细胞的浸润。结论RIP对心肌损伤具有保护作用。

脑康灵胶囊抗大鼠脑缺血的研究

目的观察脑康灵胶囊对脑缺血/再灌注损伤的保护作用,并对其机制作初步探讨。方法采用大鼠大脑中动脉缺血2h/再灌注22h模型,神经病学评分,脑梗塞范围及脑组织水含量变化,观察脑康灵胶囊抗脑缺血/再灌注损伤的效应;通过测定大鼠脑组织中一氧化氮合酶(nitric oxide synthase,NOS),超氧化物歧化酶(superoxide disumtase,SOD)活性及丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量的变化以探讨药物作用的机制。结果脑康灵胶囊可降低大鼠脑缺血/再灌注后神经病学评分及梗塞范围,降低脑组织MDA,NOS含量及升高SOD活性。结论脑康灵胶囊对脑缺血/再灌注损伤有保护作用,其作用机制与抑制NOS活性、抗脂质过氧化、提高SOD活性有关。

蛋白激酶C激活调控FOS表达参与缺血诱导神经元凋亡的研究

目的 探讨蛋白激酶C(PKC)与神经元凋亡的可能机制。方法 采用大鼠全脑缺血模型 ,观察脑缺血 再灌流后PKC活性、FOS表达及神经元凋亡的变化。结果 脑缺血 再灌流可以导致PKC的移位激活伴FOS表达及神经元凋亡的增加 ;用蛋白激酶C抑制剂灯盏花可以阻止上述变化。结论 蛋白激酶C的激活可能通过促进FOS表达参与了脑缺血

白藜芦醇苷对大鼠心室肌细胞L-型钙电流的抑制作用

研究表明，白藜芦醇苷（Polydatin）可对抗大鼠心肌缺血／再灌所致心脏功能损伤和细胞凋亡，以及抗心律失常。其心脏保护作用与心肌细胞ATP敏感钾通道开放、