温心胶囊对大鼠实验性缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Fas蛋白表达的影响

目的 :探讨临床有效中药复方温心胶囊防治冠心病心肌缺血的分子作用机制。方法 :采用盐酸异丙肾上腺素连续多点皮下注射制备大鼠心肌缺血模型。运用透射电镜技术及TUNEL法 ,观察温心胶囊对缺血损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响 ,并运用免疫组化的方法观察其对细胞凋亡相关基因Bcl 2、Fas蛋白表达的影响。结果 :异丙肾上腺素所致心肌缺血损伤可明显诱导大鼠心肌细胞发生凋亡 ,显著引发Fas基因蛋白表达增强 ,并轻度引发Bcl 2基因蛋白表达增强 ,温心胶囊可显著下调Fas基因的蛋白表达 ,上调Bcl 2基因的蛋白表达 ,明显抑制和阻断心肌细胞发生凋亡。结论 :通过调节缺血心肌Bcl 2、Fas基因的蛋白表达从而抑制和阻断细胞凋亡的发生 ,可能是中药复方温心胶囊防治冠心病心肌缺血损伤的分子作用机制之一。

加减瓜蒌薤白半夏汤改善缺血心肌细胞钙超载的实验研究

目的 观察加减瓜蒌薤白半夏汤对大鼠缺血心肌细胞游离钙、心电图及血清CK -MB的影响。方法 以加减瓜蒌薤白半夏汤灌胃 ,应用激光共聚焦显微镜 (LSCM)对异丙基肾上腺素 (ISP)诱发的大鼠急性心肌缺血损伤模型细胞内游离Ca2 + 进行了定位、定量检测 ,并检测血清磷酸肌酸激酶 (CK -MB)含量及心电图ST段的变化。结果 急性缺血组大鼠心肌细胞内Ca2 + 、血清CK -MB含量及心电图ST段的位移与对照组比较 ,差别均有显著性意义 ;应用大、小剂量加减瓜蒌薤白半夏汤后心肌细胞内Ca2 + 含量与急性缺血组比较差别有显著性意义 ,血清CK -MB含量、心电图ST段的位移与急性缺血组比较差别亦有显著性意义。结论 加减瓜蒌薤白半夏汤可显著抑制缺血心肌细胞Ca2 +超载 ,减轻心肌损伤 ,对缺血心肌组织有显著的保护作用。

芹菜素与老年大鼠缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达的相关性

目的对芹菜素与老年大鼠缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、半胱天冬酶(Caspase)-3表达相关性进行研究。方法选取选择健康的老年大鼠60只,随机分为正常组、假手术组、心肌缺血再灌注组和不同剂量芹菜素组各10只。制作缺血再灌注模型采用结扎左冠状勤脉前降支,心肌缺血30 min,再灌注2 h。假手术组只穿线不结扎,余各组在缺血前10 min股静脉分别注射生理盐水、聚乙二醇、低剂量、中剂量、高剂量芹菜素,检测缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达。结果正常组和假手术组的凋亡细胞数极少;心肌缺血再灌注组的凋亡细胞数量明显的增多,芹菜素低剂量(1 mg/kg)组:Apil1、芹菜素中剂量(2 mg/kg)组:Apil2、芹菜素高剂量(4 mg/kg)组:Apil4的凋亡的凋亡细胞数下降,其中芹菜素高剂量(4 mg/kg)组:Apil4的凋亡细胞数下降明显。心肌缺血再灌注组的Bcl-2、Bax、Caspase-3、AR与正常组、假手术组、芹菜素高、中、低剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。芹菜素低剂量组Bcl-2、Bax、Caspase-3、AR与正常组、假手术组、心肌缺血再灌注组、芹菜素高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。芹菜素中剂量组Bcl-2、Bax、Caspase-3、AR与正常组、假手术组、心肌缺血再灌注组、芹菜素高剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。且芹菜素低剂量组的Bax、AR与芹菜素中剂量组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论芹菜素与缺血心肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax、Caspase-3表达存在相关性,且芹菜素可以减轻心肌损伤。

缺血心肌细胞钙分布变化的细胞化学研究

本文报道用细胞化学的磷酸盐—焦锑酸盐(PPA)法观察大鼠心肌缺血时心肌细胞钙分布变化。用PPA法显示正常心肌细胞钙定位在肌膜包括T管及闰盘的肌膜。钙沉淀物分布在肌膜的胞质面,沉淀物大小不超过20nm。在冠状动脉结扎30min后,肌膜的结合钙沉淀物减少甚至消失。当缺血超过60min,心肌细胞损伤严重,肌膜结合钙消失,细胞内肿胀线粒体的基质内积聚了丝团状的钙沉淀物。说明肌膜和钙结合能力是心肌细胞生存的重要特性。

基于MAPK通路探究下调miR-15b对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用

目的 探讨MAPK通路下调微小RNA-15b(miR-15b)对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用。方法 购买48只大鼠随机分为4组各12只,其中空白组不做处理,模型组、上调组、下调组构建心肌细胞缺血再灌注损伤大鼠模型,做miR-15b慢病毒滴定,采用实时荧光定量聚合酶联反应检测miR-15b基因表达量,采用酶联免疫吸附试验检测白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平;采用超声心动图监测左心室收缩压(LVSP)、左室舒张末压(LVEDP);采用Western印迹检测心肌细胞缺血再灌注损伤大鼠丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路表达量。结果 与上调组相比,下调组miR-15b表达量、IL-6、TNF-α、MDA、SOD、LVEDP水平、MAPK信号通路蛋白表达量明显降低,LVSP水平显著升高(均P<0.05)。结论 通过下调miR-15b可能经作用于MAPK信号通路,能够抑制体内炎症反应,对大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤症状进行减轻,从而发挥其保护作用。

基于MAPK通路探讨沉默CircRNA-100395对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用

目的:基于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路探究沉默CircRNA-100395对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用。方法:选取36只大鼠,按照脂质体2000说明书对细胞进行转染CircRNA-100395 mimics及CircRNA-100395 inhibitor,将其分为缺血再灌注组、缺血预处理组、过表达组、沉默组。采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)法检测各组CircRNA-100395表达量;采用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测MAPK蛋白、磷酸化p38蛋白(p-p38)、氨基末端激酶(p-JNK)蛋白表达量;比较各组心率、左心室舒张压(LVDP)、左心室收缩压(LVSP)。结果:缺血预处理组、过表达组CircRNA-100395表达量、LVSP水平明显低于缺血再灌注组,心率、LVDP水平及MAPK通路蛋白明显高于缺血再灌注组,差异均有统计学意义(P<0.05);沉默组CircRNA-100395表达量、LVSP水平明显高于缺血预处理组、过表达组,LVDP、心率水平明显低于缺血预处理组、过表达组,差异均有统计学意义(P<0.05);过表达组MAPK通路蛋白表达量明显高于缺血预处理组,沉默组MAPK通路蛋白表达量明显低于过表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:CircRNA-100395可能通过作用于MAPK信号通路,也可能通过沉默CircRNA-100395表达量减轻大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤。

肝细胞生长因子抑制慢性缺血心肌细胞纤维化及凋亡的实验研究

我们采用携带肝细胞生长因子（HGF）基因重组腺病毒（AdHGF）干预猪慢性缺血性心肌模型，研究HGF改善缺血性心脏病心脏功能的重要机制，探讨其抑制缺血心肌细胞纤维化及凋亡的作用。

养心通脉方对大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体功能的影响

目的研究养心通脉方对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体呼吸功能的影响。方法实验大鼠被随机分为3组(每组15只):对照组、模型组、养心通脉方组,实验结束后所有动物采用脱颈椎法处死,通过测定呼吸控制率(RCR)、二磷酸腺苷磷/氧(ADP/O)比值及ATP的浓度来评价线粒体的呼吸功能,并对线粒体内胆固醇、磷脂(PL)、甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(FFAs)的含量进行测定。结果模型组中大鼠心肌细胞线粒体内RCR、ADP/O比值及ATP浓度均明显低于对照组(P<0.001),而在养心通脉方组中心肌细胞线粒体内RCR、ADP/O比值及ATP浓度均接近于对照组(P>0.05)。与对照组相比,模型组中胆固醇、TG和FFAs的水平均明显升高(P<0.001),同时磷脂(PL)水平明显降低(P<0.001)。但在养心通脉方组中心肌细胞线粒体内胆固醇、TG、FFAs以及PL的水平均与对照组无明显差异(P>0.05)。结论养心通脉方对异丙肾上腺素诱导的大鼠心肌缺血损伤模型心肌细胞线粒体的呼吸功能及其膜完整性具有保护作用。

缺血后处理对缺血再灌注心肌细胞内质网应激相关因子GRP78、CHOP表达的影响

目的探讨缺血后处理对缺血再灌注心肌细胞内质网应激相关因子GRP78、CHOP表达的影响。方法选择2017年4月至2018年1月实验室Wistar大鼠30只作为对象,随机数字法分为假手术组(n=10只)、缺血再灌注组(n=10只)和缺血后处理组(n=10只)。采用改良Pferfer MA推管法制备大鼠缺血再灌注(ischemia-reperfusion injury,I-R)模型,缺血再灌注组建模后开放左冠状动脉40min,然后进行180min再灌注;缺血后处理组结扎40min后进行3个循环30s/30s缺血再灌注后处理,完毕后左冠状动脉开放并完成180min灌注。结果缺血后处理组缺血区域面积、梗死区域面积、二者比值、心肌细胞凋亡率,均低于缺血再灌注组(P<0.05),高于假手术组(P<0.05);缺血再灌注缺血区域面积、梗死区域面积、二者比值、心肌细胞凋亡率均高于假手术组(P<0.05);缺血后处理组内质网应激相关因子GRP78的表达要高于缺血再灌注组和假手术组(P<0.05);缺血再灌注组内质网应激相关因子GRP78的表达要高于假手术组(P<0.05);缺血后处理组CHOP的表达水平要低于缺血再灌注组(P<0.05),高于假手术组(P<0.05)。结论大鼠缺血再灌注模型中,缺血后处理能抑制心肌细胞凋亡水平,提高内质网应激相关因子GRP78、CHOP表达水平,降低心肌梗死面积。

人参总皂甙对心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用

利用体外培养的心肌细胞缺血再灌注损伤的模型，检测其中的细胞损伤及细胞凋亡，并加入不同浓度的人参总皂甙干预，以探讨缺血再灌注损伤与细胞凋亡的关系及不同浓度的人参总皂甙对其保护作用。结果：（1）人参总皂甙对正常培养的心肌细胞无明显影响；（2）单纯缺血损伤中无明显心肌细胞凋亡，而缺血再灌注损伤中有细胞凋亡的参与；（3）人参总皂甙对缺血再灌注损伤中的细胞坏死和细胞凋亡均有显著的保护作用，其保护作用在一定浓度范围（0～160 mg/L)内与其浓度呈正相关。

黄连素对缺血再灌注心肌细胞损伤的保护作用

目的 研究黄连素对新生大鼠心肌细胞缺血再灌注损伤的保护作用。方法 取体外培养的新生大鼠心肌细胞于缺氧 2 4h复氧 1h造成缺血再灌注 ( I/ R)模型 ,观察细胞损伤情况 ;并将黄连素以 1.5× 10 - 6 m ol/ L、1.5× 10 - 5m ol/ L、1.5× 10 - 4 mol/ L 三种浓度分别加入培养基中 ,预处理 2 4h后 ,再置于上述缺氧复氧环境中培养 ,检测以上不同条件下细胞上清液中的乳酸脱氢酶 ( L DH)、丙二醛 ( MDA)、超氧化物歧化酶 ( SOD)含量 ,并检测各组细胞的凋亡率。结果 与正常对照组相比 ,缺血及再灌组细胞上清液中 L DH、MDA含量明显升高 ( P<0 .0 1) ,SOD活力则显著降低 ( P<0 .0 1) ,缺血组和再灌组凋亡率均升高明显 ( P<0 .0 1)。而用黄连素预处理后缺血及再灌组的 L DH、MDA显著低于用药前 ( P<0 .0 1) ,SOD则高于单纯缺血和再灌组 ( P<0 .0 1) ,上述作用在本实验黄连素浓度为 1.5× 10 - 6 m ol/ L～ 1.5× 10 - 4 mol/ L 范围内 ,随浓度升高而更加明显。特别是用黄连素 1.5× 10 - 5mol/ L 浓度预处理后 ,缺血组和再灌组的细胞凋亡率分别是 14.4%和 2 0 % ,分别与用药前 ( 17.4%和 41% )比较有显著性差异 ( P<0 .0 1)。结论 黄连素对缺血再灌心肌细胞有保护作用 。

刺五加与心肌细胞缺血再灌注损伤

随着心脏外科的发展,心肌损伤成为影响手术效果的关键,心肌缺血再灌注损伤是体外循环心脏手术的主要病理生理变化.产生再灌注损伤的原因十分复杂,且各种原因之间又相互影响,目前认为其发生主要与细胞内钙超载、氧自由基损伤有关,以刺五加为代表的中草药有效成分提取物为心肌保护提供了广阔前景.

冠心病病人的心肌细胞能再生吗？

众所周知，冠心病已经成为威胁人们健康的重要杀手。冠心病的本质是冠状动脉血管狭窄，造成心肌细胞缺血、缺氧，从而坏死、瘢痕形成，影响心脏的收缩舒张功能。随着人口日益老龄化，冠心病的防治已经成为全球性首要卫生问题。

抗肿瘤坏死因子单克隆抗体、硝酸甘油对持续缺血心肌Bcl-2基因蛋白及mRNA表达的影响

目的 :探讨抗肿瘤坏死因子单克隆抗体、硝酸甘油对持续缺血心肌细胞 Bcl- 2基因蛋白及 m RNA表达的影响。方法 :采用大白鼠等动物 ,随机分为 5组。采用冠脉结扎法 ,建立急性心肌梗塞动物模型。以活结结扎左冠状动脉的前降支 ,造成持续阻断冠脉血流。以S- P免疫组化及逆转录聚合酶链反应 (RT- PCR)法分别检测 Bcl- 2基因蛋白与 m RNA的表达变化。结果 :抗肿瘤坏死因子单克隆抗体处理组、硝酸甘油处理组与持续缺血组比较Bcl- 2基因蛋白及 m RNA表达明显增强。结论 :抗肿瘤坏死因子单克隆抗体、硝酸甘油预处理能上调 Bcl- 2基因蛋白及 m RNA表达。

针刺对缺血导致心肌损伤作用的研究概况

通过对近十年来的文献分析,发现针刺对缺血所致心肌细胞损伤有一定的修复作用,主要是集中于对一些生长因子的研究,它们可以动员自身或体外干细胞,促进心功能恢复等,保护残存心肌,促进缺血梗死心肌修复及再生,调节心自主神经等。但是总体来看目前研究机制的水平处于较低水平,同时对于临床的应用也较少,这也是一个重要问题。

缺血和再灌注心肌NHE-1mRNA表达的变化

目的:探讨缺血再灌注心肌钠氢交换蛋白-1(NHE-1)mRNA表达的变化。方法:成年大鼠心脏Langendorff离体灌流,随机分为六组(n=6),给予(1)正常灌流30min;(2)低灌流缺血60min再灌注30min;(4)预处理后低灌流缺血60min;(5)预处理后低灌流缺血60min再灌注30min;(6)老龄大鼠离体心脏低灌流缺血60min等不同条件处理。保留心肌,使用RT-PCR方法对比不同处理条件下的心肌NHE-1表达的变化。结果:(1)缺血组心肌(I)NHE-1mRNA水平(0.734±0.053)较正常对照组(N)(0.300±0.007)明显升高(P<0.05),再灌注组心肌(R)NHE-1的mRNA水平(0.281± 0.019)较缺血组降低(P<0.05),与正常组无明显差异(P>0.05);(2)预处理缺血组心肌(Pi)NHE-1mR-NA水平(0.256±0.011)较缺血组心肌(0.734±0.053)明显降低(P<0.05),预处理再灌注组心肌(Pr)NHE-1mRNA水平(0.135±0.011)较再灌注组心肌(0.281±0.019)降低(P<0.05);(3)老龄大鼠低灌流缺血心肌(S)NHE-1的mRNA表达(0.787±0.021)与成年大鼠低灌流缺血心肌(I)NHE-1的mRNA表达无明显统计学差异。结论:低灌流缺血心肌NHE-1表达较正常灌流心肌明显升高,预处理可以明显降低缺血及再灌注心肌NHE-1的表达。

机械牵张对缺血缺氧心肌细胞肌球蛋白重链mRNA表达的影响

目的 探讨机械牵张对缺血缺氧心肌细胞肌球蛋白重链 (MHC)mRNA表达的影响。方法 建立离体培养的SD乳鼠心肌细胞机械牵张模型 ,并施加无糖缺氧刺激因素 ,模拟烧伤后缺血缺氧损害。实验分 10 %牵张组、缺血缺氧培养组、10 %牵张 +缺血缺氧培养组 ,每组每时相点 3皿细胞。各组分别在刺激前和刺激后 1、3、6、12h时相点进行观察。采用二步法逆转录聚合酶链反应检测心肌细胞MHCmRNA表达的变化 ,并用凝胶软件进行分析。 结果 与刺激前比较 ,10 %牵张组α、β型MHCmRNA表达均增加 ,但以 β型增加为主 (P <0.0 1)。缺血缺氧培养组α MHCmRNA向 β MHCmRNA转化加速 ,且缺氧 12h后心肌细胞α MHCmRNA下调明显 (P <0.0 5);β MHCmRNA表达先升后降 ,6h表达最强 (P <0.0 5 )。10 %牵张 +缺血缺氧培养组α MHCmRNA向 β MHC mRNA转化明显 ,随机械刺激时间的延长转化加剧 ;12h后α、β型MHCmRNA表达均下调 (P <0.0 5)。 结论 机械牵张进一步加剧缺血缺氧对MHCmRNA表达的下调 ,可能是严重烧伤后早期心肌功能降低的原因之一。

柴胡三参胶囊对缺血性大鼠心肌细胞钠通道的影响

目的观察柴胡三参胶囊对缺血性大鼠心肌细胞钠通道影响,探讨柴胡三参胶囊作用靶点及其防治心律失常作用机制,为缺血性心律失常中医药治疗提供新的实验依据。方法40只SD雄性大鼠随机分为柴胡三参胶囊组30只与空白对照组10只,分别予以等量柴胡三参胶囊及生理盐水灌胃以制备含药血清及空白血清。5%、10%、20%含药及空白血清作用于大鼠心肌细胞,用MTT法筛选柴胡三参胶囊最佳给药浓度。大鼠心肌细胞复苏、换液、传代后分为5组:空白组、模型组、空白血清组、普罗帕酮组、柴胡三参胶囊组。第一组以普通培养基培养,不做特殊处理。后4组分别加入普通培养基、空白血清、普罗帕酮、柴胡三参胶囊含药血清,培育1h后均建立缺血模型,运用Western Blot法检测各组钠通道Nav1.5蛋白表达水平。结果缺血处理后,模型组、空白血清组、普罗帕酮组、柴胡三参胶囊组钠通道Nav1.5蛋白表达均高于空白对照组(P<0.05);与空白血清组对比,普罗帕酮组及柴胡三参胶囊组钠通道Nav1.5蛋白表达均下降(P<0.05);柴胡三参胶囊组钠通道Nav1.5蛋白表达下降程度低于普罗帕酮组(P<0.05)。结论钠通道是柴胡三参胶囊的作用靶点,柴胡三参胶囊能通过钠通道Nav1.5蛋白影响钠离子电流,具有改善心肌缺血症状,防治心律失常发生的作用。