电针穴位对脑缺血-再灌流大鼠海马和大脑皮层AChE活性的影响

目的:探讨电针穴位对脑缺血-再灌流损伤引起的脑海马及大脑皮层内乙酰胆碱酯酶(AChE)活性的影响.方法:采用夹闭大鼠双侧颈总动脉(CCAO)造成脑缺血-再灌流损伤模型,以改良Ellman法测定AChE.每日电针双侧"百会"、"风池"、"大钟"及"足三里"穴30min、7和14d,疏-密波频率:2～20Hz,强度2 0A.结果:实验后第7d,大鼠海马及大脑皮层内的AChE活性在缺血-再灌流组明显低于假手术组,而其电针组的AChE活性则基本恢复;第14d,缺血-再灌流及其电针组的大脑皮层AChE活性恢复,海马AChE活性有所恢复.结论:脑缺血-再灌流所致的脑损伤可能与脑内AChE的活性有关;电针能提高大鼠海马及大脑皮层内的AChE活性,从而可能对抗脑缺血-再灌流所致的脑损伤作用.

肠缺血-再灌流大鼠血浆二胺氧化酶活性的变化与肠损伤的关系

观察并探讨了肠缺血 -再灌流大鼠血浆二胺氧化酶 (DAO)活性的变化规律及其与肠损伤相关指标变化的关系。结果显示 ,肠缺血 -再灌流过程中血浆DAO活性呈双峰升高 :第一峰在肠缺血期 ,时相上早于血浆内毒素 (LPS)和D -乳酸的升高 ;第二峰在再灌流后 2h ,在肠损伤相关指标变化的峰值之后。结果提示 ,肠粘膜上皮细胞和 (或 )肠屏障受到缺血和再灌流二次损伤的打击 ;血浆DAO活性作为反映肠损伤的指标特异性强、灵敏度高 ,在临床上对病程判断及并发症的防治有一定的指导意义。

诱导型一氧化氮合酶及氨基胍在脑缺血-再灌流损伤中的作用

诱导型一氧化氮合酶(iNOS)产生的一氧化氮对缺血-再灌流脑组织产生毒性作用,氨基胍是iNOS的选择性抑制剂,具有脑保护作用。本文对iNOS的特点、缺血时的变化规律、脑损伤的作用机制和氨基胍的特点、酶抑制机制及缺血时脑保护作用的研究进展作一综述。

维拉帕米对大鼠缺血-再灌流视网膜Glu-IR神经元的观察

目的 :探讨维拉帕米对大鼠缺血 -再灌流视网膜Glu -IR神经元的作用。方法 :结扎双侧颈总动脉 ,3h后松结复流 ,分别于缺血前 15min和再灌流前 1min腹腔注射维拉帕米 (5mg/kg/次 ) ,对照组腹腔注射等量生理盐水。动物存活 3d ,4%多聚甲醛经心灌注 ,视网膜切片Glu免疫组织化学反应。结果 :正常大鼠视网膜内核层中有大量Glu -IR神经元 ,外核层、节细胞层部分细胞呈Glu -IR。缺血 -再灌流损伤后 ,视网膜内核层中Glu -IR神经元较正常时显著减少 ,染色变淡 ,外核层、节细胞层未见Glu -IR(P <0 .0 5 )。在缺血 -再灌流期应用维拉帕米 ,视网膜中Glu -IR神经元明显增多 ,染色变深 (P <0 .0 5 )。结论 :视网膜Glu -IR神经元对缺血 -再灌流损伤敏感 ,维拉帕米有助于视网膜Glu -IR神经元的存活及免疫活性的恢复。

大鼠脑缺血-再灌流后脑内MPO活性变化及组织损伤病理进观察

目的 :通过测定大鼠局灶性脑缺血 -再灌流后不同时点脑组织中 MPO活性变化 ,探讨炎症反应与脑缺血 -再灌流损伤的关系。方法 :用线栓法制备大鼠大脑中动脉缺血 -再灌流模型 ,检测缺血 3小时后再灌流不同时点脑组织中 MPO活性、脑梗死体积及光镜病理学变化。结果 :缺血组脑组织有 MPO活性升高、中性粒细胞浸润 ,以再灌流后 4 8、 72小时最为明显 ,脑梗死体积、神经元变性程度随再灌流时间延长而加重。结论 :局灶性缺血脑组织中MPO活性与缺血 -再灌流损伤间具有一定的关系 ,炎症反应是加重脑组织损伤的重要因素。

氨基胍对大鼠脑缺血-再灌流损伤保护作用的研究

目的:探讨诱生型一氧化氮合酶抑制剂氨基胍(Aminogunidine,AG)对脑缺血-再灌流损伤保护作用的机制。方法:将大鼠随机分为对照组、AG治疗组、假手术组,测定再灌流各时相点脑内一氧化氮含量,观察光镜下顶叶皮层尼氏染色、HE染色改变。结果:再灌流不同时相点AG治疗组NO含量,顶叶皮层神经元变性程序及数量、微血管数目明显低于对照组。结论:AG可以抑制iNOS活性,降低脑内NO含量,减轻半暗带区神经元变性、微循环障碍和血脑屏障破坏,具有脑保护作用。

卡巴胆碱对肠缺血-再灌流动物脏器功能的保护作用

目的研究卡巴胆碱对肠缺血再灌流动物脏器功能的保护作用及对肠组织和白细胞炎症介质表达的影响。方法检测肠缺血再灌流大鼠和肠部分缺血再灌流兔伤后脏器功能指标、白细胞中细胞因子表达和血浆、肠组织TNFα含量。结果卡巴胆碱治疗组大鼠再灌流2h后血浆ALT、BUN和CK低于对照组,白细胞中TNFα表达下调,IFN、IL4和IL10表达上调;治疗组兔血浆ALT、Cr和CKMB在缺血和再灌流早期增加幅度低于实验组,再灌流后趋于恢复,实验组渐升高;肠组织TNFα含量低于实验组。结论卡巴胆碱改善肠缺血再灌流动物脏器功能,抑制肠组织TNFα的合成,调节白细胞致炎和抗炎因子的表达比例。

乌司他丁对大鼠肝缺血-再灌流损伤的保护作用

目的研究乌司他丁对肝缺血再灌流损伤的保护作用。方法将45只成年雄性SD大鼠随机分成3组:假手术对照组(A组)、肝缺血30min、再灌流90min组(B组)、缺血前30min静脉注射乌司他丁+肝缺血30min、再灌流90min组(C组)。分别测血浆中天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)、乳酸脱氨酶(LDH)浓度;测定肝组织中髓过氧化物酶(MPO)含量,并取肝组织作光镜及电镜观察。结果再灌流90min时C组的血浆ALT、AST、LDH值及肝组织MPO含量均低于B组(P<0.01),且C组的肝细胞显微、超微结构损害的改变较B组的轻。结论乌司他丁能抑制肝缺血再灌流时中性粒细胞在肝组织中的聚集,从而对大鼠肝缺血再灌流所致肝细胞的结构和功能损伤有保护作用。

盐酸戊乙奎醚对大鼠脑缺血-再灌流损伤的保护作用

目的探讨盐酸戊乙奎醚对大鼠三动脉阻断法急性全脑缺血-再灌流损伤的保护作用。方法144只雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血-再灌流组(生理盐水1 ml)、东莨菪碱组(0.01 mg/kg)和盐酸戊乙奎醚组(0.01 mg/kg),缺血前40 min分别腹腔注射相应药物,缺血时间为10 min,于再灌流24 h、3 d和7 d测定其行为学(开阔法、平衡木法、攀绳和肌力试验),再灌流2 h、12 h、24 h、3 d和7 d取材测定海马CA1区存活神经元数量(HE染色)、凋亡神经元数量(TUNEL染色)、bcl-2和bax蛋白表达(免疫组化染色),部分大鼠于再灌流4 d测定脑梗死体积(TTC法)。结果与缺血-再灌流组比较,盐酸戊乙奎醚组和东莨菪碱组海马CA1区凋亡神经元数量减少(P<0.01),bcl-2提前并延长表达(P<0.01),盐酸戊乙奎醚组bax表达下降(P<0.05或P<0.01)。同时,盐酸戊乙奎醚组和东莨菪碱组存活神经元数量增加(P<0.05),脑梗死体积缩小(P<0.05或P<0.01),行为学检测指标改善(P<0.05)。盐酸戊乙奎醚组较东莨菪碱组作用更加明显(P<0.05)。结论盐酸戊乙奎醚对脑缺血-再灌流损伤大鼠具有脑保护作用,并且优于同样剂量东莨菪碱。改变bcl-2/bax的比例可能是其机制之一。

左旋四氢巴马汀在大鼠脑缺血-再灌流时对神经元凋亡的影响

目的 通过观察脑缺血再灌流后海马CA1区存活神经元数目 ,原位末端标记(TUNEL)阳性细胞数目 ,热休克蛋白 70 (HSP70 )的表达以及脑组织超微结构的变化 ,探讨左旋四氢巴马汀 (L THP)对脑缺血 再灌流损伤的保护作用的机制。方法 采用Pulsinelli法建立大鼠全脑缺血 再灌流损伤模型。观察L THP在脑缺血 再灌流的迟发性损伤阶段对海马CA1区存活神经元数目 ,TUNEL阳性细胞数目 ,HSP70的表达以及脑组织超微结构的影响。结果 L THP可增加脑缺血 再灌流后HSP70的表达 ,减少神经元凋亡的发生 ,提高神经元的存活数目。结论 L THP可减少脑缺血 再灌流神经元凋亡 ,提高神经元的存活数目 ,对脑缺血

心肺复苏期间患者缺血-再灌流损伤的临床研究

目的 探讨心肺复苏期间患者缺血 再灌流损伤的机制。方法 2 0例心搏骤停行心肺复苏术患者 ,根据复苏后有无自主循环分为缺血组 (8例 )和再灌流组 (12例 ) ,并于复苏前 ,复苏后即刻 ,15min、 30min时分别测定其血中丙二醛 (MDA)和超氧化物歧化酶 (SOD)的浓度 ,比较两组患者血中上述指标的动态变化 ,并设正常对照组。结果 再灌流组MDA浓度较心搏骤停前明显增高 ,尤以 30min时增高显著 ,且明显高于缺血组 ,SOD浓度较心搏骤停前明显下降 ,尤以复苏后即刻下降显著 ,且明显低于缺血组。缺血组实施心肺复苏术前后MDA、SOD浓度无明显变化。结论 MDA和SOD在缺血 再灌流损伤中起着重要作用 ,动态监测血中MDA。

亚低温对大鼠缺血-再灌流后脑梗死体积、神经功能及炎症反应的影响

目的研究亚低温状态下,大鼠局灶性脑缺血再灌流后不同时程脑组织中的细胞间黏附分子1(ICAM1),肿瘤坏死因子(TNFα)和白细胞介素1(IL1β)的动态变化,以探讨亚低温对脑缺血再灌流损伤时的保护机制。方法采用大鼠大脑中动脉(MCA)线栓闭塞/再通法建立大鼠局灶性缺血再灌流模型,常温组和亚低温组分别于脑缺血3h再灌流6h、12h、24h、48h、72h时间点断头取脑,假手术组则于再灌流24h断头取脑,进行ICAM1、TNFα和IL1β免疫组化测定;同时在再灌流24h进行神经功能和脑梗死体积的比较。结果(1)亚低温干预可以改善大鼠脑缺血再灌流后的神经功能障碍,缩小脑梗死体积(P<0.01);(2)脑缺血再灌流后,脑缺血灶ICAM1、TNFα和IL1β的表达出现增高趋势,分别在再灌流48h、24h和6h达高峰,与假手术组比较有显著意义(P<0.01);且亚低温干预明显抑制它们的表达(P<0.01)。结论亚低温干预能明显减轻缺血再灌流后脑组织的炎症反应,亚低温对炎症级联反应的抑制可能是其发挥脑保护作用的重要机制之一。

炎性细胞因子在肝缺血-再灌流损伤时心肌组织中的表达

目的探讨大鼠肝缺血-再灌流损伤时TNF-α、IL-1βmRNA在心肌组织中的表达及与心肌细胞凋亡的关系。方法选取健康雄性Wistar大鼠48只,随机分为6组,每组8只。应用免疫组织化学方法和原位杂交方法分别测定心肌组织中TNF-α、IL-1βmRNA的表达;应用原位细胞凋亡法测定细胞凋亡情况。同时观察心肌HE染色。结果I/R组与假手术组TNF-α在心肌组织中的表达,差异有显著性(P<0.01),I/R1h组明显升高,与I/R组比较差异有显著性(P<0.01),I/R2h组、I/R4h组虽然略有波动,但增加差异无显著性(P>0.05)。IL-1βmRNA自I/R组起表达就明显增多,与I组比较差异有显著性(P<0.01);I/R1h组明显升高,与I/R组比较差异有显著性(P<0.05)。细胞凋亡指数I/R组与假手术组比较明显增加(P<0.01),随着再灌流时间的延长细胞凋亡指数逐渐增加。TNF-α、IL-1βmRNA和细胞凋亡指数间均存在正相关(r=0.94,r=0.91;P<0.05)。HE染色后,见心肌部分横纹不清,有炎性细胞浸润,心肌纤维肿胀,心肌水肿。结论肝缺血-再灌流过程中,心肌组织早期就出现TNF-α和IL-1βmRNA的表达,心肌细胞凋亡指数随着再灌流时间的延长逐渐增加,可能与TNF-α和IL-1βmRNA的表达有关;心肌结构出现了病理改变。

药物对大鼠睾丸缺血-再灌流后生精功能的影响

目的探讨药物对大鼠睾丸缺血-再灌流后生精功能的影响。方法雄性SD大鼠32只,随机分成假手术组、扭转组、己酮可可碱组和维拉帕米组,每组8只,建立睾丸扭转动物模型。各组于复位前 15 min分别静脉注射生理盐水、己酮可可碱和维拉帕米,术后24 h留取手术侧睾丸。应用流式细胞术 (FCM)检测各组生精细胞凋亡和各级生精细胞计数,测定组织内丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶 (MPO)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果与扭转组相比,已酮可可碱组和维拉帕米组生精细胞凋亡明显减少,单倍体细胞群计数显著增多,超氧化物歧化酶活性回升,丙二醛含量和髓过氧化物酶活性下降, 其差异有显著性(P<0．05)。结论已酮可可碱和维拉帕米对睾丸缺血-再灌流后的生精能力具有明显的保护作用。

大鼠肝缺血-再灌流损伤脑组织p38MAPK与脑细胞凋亡的关系

目的观察肝缺血-再灌流损伤过程中大脑皮质层p38有丝分裂素激活蛋白激酶(p38MAPK) 的变化和神经元凋亡,以探讨p38 MAPK与脑组织神经元凋亡的关系。方法建立肝缺血-再灌流损伤动物模型,分为对照组、缺血30 min组(I组)、缺血30 min再灌流组(I／R组)、缺血30 min再灌流后1 h组(I/ R 1h)、缺血30 min再灌流后2 h组(I／R 2h)、缺血30 min再灌流后4 h组(I/R 4h)。应用免疫组化法测定各组肝组织中iNOS的变化和脑皮质层p38MAPK的改变,应用原位细胞凋亡法测定神经元凋亡,同时观察肝和脑组织病理学改变。结果肝缺血-再灌流损伤形成过程中,随着再灌流时间延长肝组织出现iNOS的高表达,同时大脑皮层出现p38MAPK改变和神经元凋亡。肝组织iNOS与p38MAKP呈正相关(r=0．91,P <0．05)。p38MAPK的表达与phospho-p38MAPK的表达呈正相关(r=0．89,P<0．05),phospho-p38MAPK的表达与凋亡指数呈正相关(r=0．95,P<0．05)。HE染色见肝细胞水肿,炎性细胞浸润,甚至细胞坏死。脑皮质层见神经元水肿、坏死。结论肝缺血-再灌流损伤可导致大脑结构和功能的改变。损伤过程中产生 iNOS作为炎性细胞因子导致大脑皮层p38MAKP的改变,从而引起神经元凋亡。

牛磺酸对鼠肝缺血-再灌流损伤的保护作用

目的探讨牛磺酸对大鼠肝脏缺血再灌流损伤的作用及机制。方法48只实验大鼠随机分为三组假手术组(A组)、缺血-再灌流组(B组)和给予牛磺酸后缺血-再灌流组(C组)。检测再灌流30min的肝组织钙含量、丙二醛(MDA)含量和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力。并同步观察肝组织光镜和电镜下的形态变化。结果B组肝组织钙含量和MDA含量明显高于A组(P<0.01),而GSH-PX活力低于A组(P<0.01)。C组肝组织钙和MDA含量低于B组(P<0.01,P<0.05),而GSH-PX活力高于B组(P<0.05)。肝损伤病理改变C组轻于B组(P<0.05)。结论牛磺酸能显著减轻大鼠肝脏缺血再灌流损伤,其机制与减轻钙超载、抑制氧自由基生成和增强氧自由基清除有关。

核因子-κB对急性缺血-再灌流心肌细胞凋亡及左室局部功能的影响

目的探讨核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)对急性缺血-再灌流心肌细胞凋亡及左室局部功能的影响。方法24只健康杂种犬随机分为对照组(C组)、缺血-再灌流组(IR组)和缺血-再灌流加特异性NF-κB抑制剂二硫代氨基甲酸吡咯烷组(PDTC组)。IR组于第一对角支以下1 cm处套扎左冠状动脉前降支30 min,恢复血流再灌流120 min,PDTC组在心肌缺血前应用PDTC (100 mg/kg),C组游离左冠状动脉前降支不结扎。超声心动图中的应变率法测量左室局部收缩功能,Simpson’s双平面法测左室射血分数(EF),应用脱氧核甘酸末端转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)测心肌细胞凋亡指数,免疫组化法及蛋白印迹(western-blot)检测心肌组织中NF-κB的表达。结果IR组NF-κB在缺血心肌组织中表达增高,显著高于C组(P<0.05),而PDTC组NF-κB表达明显减弱,显著低于IR组(P<0.05);PDTC组心肌细胞凋亡数较IR组明显减少(P<0.05);IR组左室前壁缺血节段收缩期峰值应变率(SRpeak)明显减低(P<0.01),PDTC组的应变率与IR组比较明显增高(P<0.05)。射血分数在三组间差异无统计学意义。结论NF-κB在心肌缺血-再灌流中起重要作用,PDTC通过抑制NF-κB的表达从而减轻心肌缺血-再灌流损伤,改善心功能。

氨基胍对大鼠脑缺血-再灌流损伤后脑微血管通透性的影响

目的 研究选择性诱导型一氧化氮合酶 (iNOS)抑制剂氨基胍对脑缺血 -再灌流损伤时脑微血管通透性的作用。方法 通过缺血 6 0min ,再灌流 6 0min ,造成缺血 -再灌流 (I/R)损伤 ,并制成脑窗模型 ,观察氨基胍对脑微循环通透性的影响。结果 脑缺血 -再灌流损伤后脑微循环通透性明显升高 ,并在 110s后血管外荧光物质浓度就显著高于血管内。而运用氨基胍后 ,在 80s后血管外的荧光物质浓度就显著高于血管内。结论 I/R后脑微循环通透性升高 。

二氮嗪对大鼠心肌缺血-再灌流损伤细胞凋亡的影响

目的观察二氮嗪对缺血-再灌流心肌细胞凋亡,以及对Bax、Bcl-2和Caspase-3表达的影响。方法21只SD大鼠随机分为假手术组(sham operation,SO),缺血-再灌流组(ischemia/reperfusion,IR)和二氮嗪处理组(Diazoxide,DI)。SO组和IR组静脉注射相应量溶媒,DI组12.5 mg/kg剂量静脉注射二氮嗪。10min后SO组不结扎前降支,4 h后取心脏,而IR组和DI组结扎前降支2 h,再灌流2 h。采用TUNEL法和免疫组化法检测缺血心肌细胞凋亡和Bax、Bcl-2、Caspase-3表达,及心肌梗死范围。结果与SO组相比,IR和DI组心肌细胞凋亡率显著增加(P<0.05),Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋白阳性细胞指数明显升高(P<0.05);与IR组相比,DI组明显降低心肌细胞凋亡率(P<0.05)和Bax,Caspase-3蛋白阳性细胞指数(P<0.05),增加Bcl-2蛋白阳性细胞指数(P<0.05)。IR组心肌梗死范围为(36.9±2.3)%,DI组为(20.0±8)%,两组差异有显著性(P<0.05)。结论二氮嗪通过上调Bcl-2表达,下调Bax及Caspase-3表达而减少在体大鼠缺血-再灌流损伤心肌细胞凋亡。