乳腺癌患者组织细胞分裂周期蛋白6、微小染色体维持缺陷蛋白7的表达水平

目的:探讨乳腺癌患者组织细胞分裂周期蛋白6(CDC6)、微小染色体维持蛋白7(MCM7)表达水平及临床意义。方法:选取我院行乳腺癌改良根治术治疗的乳腺癌患者74例,收集肿瘤切除标本,并取癌旁≥2cm正常乳腺组织作为对照。检测肿瘤组织及癌旁正常乳腺组织中Mcm7m RNA、Cdc6m RNA阳性表达情况,并分析与临床病理特征的相关性。结果:在乳腺癌组织中Mcm7m RNA阳性率为85. 14%、Cdc6m RNA阳性率为70. 27%,高于癌旁正常组织阳性率41. 89%、33. 78%(P <0. 05);单因素分析发现,Mcm7m RNA在年龄、病理分期、有无淋巴结转移有显著差异(P <0. 05),Cdc6m RNA在组织学分级、病理分期、有无淋巴结转移有显著差异(P <0. 05)。结论:乳腺癌患者组织中Mcm7、Cdc6呈高表达状态,其作为肿瘤增殖标志物,对临床病情评估、治疗及预后评估具有重要意义。

分离缺陷蛋白6α在胶质瘤中的表达及其对临床病理和预后的意义

目的探讨分离缺陷蛋白6α(PARD6A)在胶质瘤中的表达及其对临床病理和预后的意义。方法利用癌症基因组图谱(TCGA)数据库和基因型-组织表达(GTEx)数据库收集胶质母细胞瘤(GBM)、低级别胶质瘤(LGG)和正常脑组织(Normal) mRNA及临床资料,分析胶质瘤组织和正常脑组织中PARD6A的表达量以及其与临床特征的相关性;并通过生存分析研究PARD6A表达量的变化与预后的关系;下载京都基因与基因组百科全书(KEGG)数据库内的分子特征数据库,利用基因富集分析(GSEA)技术研究PARD6A在胶质瘤中涉及的信号通路,探讨其在胶质瘤中的作用机制;收集2015年1月至2017年10月期间在临沂市人民医院微创与功能神经外科手术治疗的原发脑胶质瘤患者的石蜡包埋标本58例,同时期的外伤脑组织样本10例,应用免疫组织化学法检测PARD6A在外伤脑组织和不同级别胶质瘤中的表达情况,并随访58例胶质瘤患者1年和2年肿瘤复发情况。结果生物信息学分析表明PARD6A在GBM中表达最低,LGG次之,正常脑组织中表达量最高,差异有统计学意义(P<0.05);PARD6A表达量与患者的年龄和性别无关,差异无统计学意义(P>0.05),但PARD6A表达量与胶质瘤病理级别和生存状态有关,差异有统计学意义(P<0.05);Kaplan-Meier Plotter在线数据生存分析显示PARD6A低表达的患者总体生存期和无病生存率较高表达患者明显缩短,差异有统计学意义(P<0.05);基因富集分析显示PARD6A可能通过Wnt信号通路、ErbB信号通路、GnRH信号通路和CALCIUM信号通路影响胶质瘤细胞的侵袭和转移功能;免疫组织化学实验表明PAR6在胶质瘤中表达显著下调,外伤脑组织、Ⅰ~Ⅱ级和Ⅲ~Ⅳ级标本中PAR6阳性率分别为90.0%、53.6%和20.0%,差异有统计学意义(P<0.05);通过对纳入研究的胶质瘤患者进行随访发现,PAR6低表达组术后1年和2年肿瘤复发率分别为45.9%和71.8%,PARD6A高表达组术后1年和2年肿瘤复发率分别为14.3%和23.8%,无论术后1年还是2年的肿瘤复发率,低表达组相比高表达组均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论低表达的PARD6A是胶质瘤预后不良的影响因素,可作为判断胶质瘤预后的有效生物学标志。

头颈部鳞状细胞癌组织中有丝分裂阻滞缺陷蛋白2的表达变化

目的观察头颈部鳞状细胞癌组织中有丝分裂阻滞缺陷蛋白2(MAD2)的表达变化。方法头颈部鳞状细胞癌患者101例,分别取其肿瘤组织、肿瘤旁肌肉组织;以49例份正常头颈部肌肉组织作对照。采用免疫组化SP法检测上述组织标本中的MAD2。结果肿瘤组织、肿瘤旁肌肉组织、正常头颈部肌肉组织中MAD2的阳性表达率分别为90.1%、53.5%、46.9%;前者与后两者相比,P均<0.05。有、无淋巴结转移的头颈部鳞状细胞癌患者肿瘤组织中MAD2阳性表达率分别为96.6%、81.4%,两者相比,P<0.05。结论头颈部鳞状细胞癌组织中MAD2阳性表达率升高,其异常高表达可能参与了头颈部鳞状细胞癌的发生发展过程。

CD55缺陷蛋白丢失肠病治疗药物——帕泽利单抗

帕泽利单抗是一种全人源单克隆抗体,该药阻断补体因子C5的活性,抑制膜攻击复合体的形成,可预防治疗补体系统异常介导的疾病。2023年8月18日帕泽利单抗由FDA批准上市,用于治疗1岁及以上的CD55缺陷蛋白丢失肠病患者。本文对帕泽利单抗的药理作用、药效学、药动学和临床疗效及安全性等方面进行综述,旨在为临床用药提供参考。

PROS1基因新同义突变致以脑梗死起病的遗传性蛋白S缺陷症家系调查

目的调查一个以急性脑梗死起病的遗传性蛋白S缺陷症家系的临床特征,分析其PROS1基因的突变特点。方法收集先证者及其直系亲属的临床资料,采集血标本,检测蛋白S活性水平并对PROS1基因进行测序。结果该家系直系亲属三代8人,其中3名确诊为遗传性蛋白S缺陷症,先证者及其兄均表现为急性脑梗死,余家系成员尚未发生血栓事件。检测蛋白S活性:先证者、先证者之兄、先证者母亲分别为16.8%、38.0%、31.8%,父亲正常。基因分析发现先证者、先证者之兄、先证者母亲PROS1基因第11外显子均存在c.1323G>A杂合变异,父亲为野生型。结论本家系为一个新发现的由PROS1基因c.1323G>A同义突变引起的遗传性蛋白S缺陷症家系;此突变可能导致青年缺血性脑卒中的发生。

1例新型FGA基因纯合突变导致的遗传性纤维蛋白缺陷症家系分析

纤维蛋白原(FIB)是一个由Aα链,Bβ链和γ链3对多肽链组成的,由29个链间二硫键连接而成的相对分子质量为340×10^(3)的糖蛋白。3条肽链分别由FIB α链(FGA)、FIBβ链(FGB)和FIBγ链(FGG)3个同源基因编码^([1])。遗传性FIB缺陷症(CFD)主要分为Ⅰ型和Ⅱ型两种类型,Ⅰ型为FIB数量减少,包括低纤维蛋白血症和无纤维蛋白血症;Ⅱ型则为患者血浆中FIB数量正常或减少,但活性水平不成比例的显著降低.

复合杂合突变导致遗传性蛋白C缺陷症一家系调查

目的调查复合杂合突变导致遗传性蛋白C缺陷症家系的临床特征与基因突变情况,并分析其基因型与临床表型的关系。方法采集先证者及其家系成员(3代5人)外周静脉血,检测蛋白C活性、蛋白S活性和抗凝血酶活性等指标以明确表型诊断。采用PCR对先证者PROC基因所有外显子及侧翼序列进行扩增,PCR产物纯化后进行直接测序。运用ClustalX-2.1-win软件分析突变的保守性;使用在线生物信息学软件预测突变的致病性。结果家系中有4人存在遗传性蛋白C缺陷症,先证者临床表现为肺栓塞和下肢深静脉血栓栓塞,其他家系成员无明显的血栓形成事件表现。基因测序发现先证者PROC基因第7号外显子存在c.541T>G杂合错义突变(p.Phe181Val)和c.577-579delAAG杂合缺失突变(p.Lys192deletion),其父亲为c.541T>G突变杂合子,母亲和妹妹为c.577-579delAAG突变杂合子。保守性分析显示Phe181和Lys192在同源物种间均高度保守,生物信息学软件预测该2个突变位点均为有害突变。结论该遗传性蛋白C缺陷症家系存在c.541T>G杂合错义突变和c.577-579delAAG杂合缺失突变,该复合杂合突变可能引起先证者蛋白C活性明显降低,从而导致反复深静脉血栓栓塞和肺栓塞。

一个家族性多囊肾伴纤维蛋白原缺陷症家系的基因诊断、临床特征及文献回顾

目的:分析一个家族性多囊肾伴纤维蛋白原缺陷症家系的基因诊断及相关临床表现,研究其发病机制并为临床治疗提供指导。方法:将患者外周血样本中分离出基因组DNA,进行全外显子组测序,Sanger法对多囊肾病1(polycystic kidney disease 1,PKD1)和纤维蛋白原β链(fibrinogen beta chain,FGB)基因突变结果进行验证。肾脏超声检查多囊肾,Clauss法检测血浆纤维蛋白原活性,免疫比浊法检测血浆纤维蛋白原抗原。检索国内外2种疾病相关的文献并进行分析总结。结果:PKD1在第15外显子发生c.6586C>T,p.Q2196X杂合无义突变,FGB在第2外显子发生c.130C>T,p.R44C杂合错义突变。患者超声结果诊断为多囊肾,纤维蛋白原抗原正常(2.3 g/L)、活性降低(1.25 g/L)。文献检索结果显示2种突变在国外均有报道,在国内首次报道。结论:PKD1 p.Q2196X和FGB p.R44C杂合突变分别导致该患者的多囊肾和异常纤维蛋白原血症。目前临床表型主要由多囊肾引起,应以多囊肾治疗为主,定期随访,保护肾功能。

体外膜氧合联合介入取栓救治蛋白C基因突变所致高危肺栓塞一例

遗传性蛋白C缺陷症是由蛋白C基因突变引起的一种染色体遗传病,可导致静脉血栓形成,多与外显子4~9和内含子8的突变有关。蛋白C基因突变引起的致死性肺栓塞罕见,治疗面临巨大挑战。本文报道1例由蛋白C基因8号外显子移码突变引起的致死性肺栓塞,采用体外膜氧合进行呼吸、循环支持,并成功实行介入取栓的救治经验,为该疾病的诊断及救治提供参考。

有丝分裂阻滞缺陷蛋白2选择性剪接体MAD2β在胃癌细胞多药耐药机制中的作用

目的 观察有丝分裂阻滞缺陷蛋白 2 (mitoticarrestdeficientprotein 2 ,MAD2 )基因的选择性剪接体MAD2 β在人胃癌多药耐药性形成过程中的作用机制。 方法 从耐阿霉素人胃癌细胞系SGC790 1/ADR中提取总RNA ,通过RT PCR获得MAD2 β全长编码cDNA ,并克隆至pUCm T载体 ,正向亚克隆插入真核表达载体pcDNA3.1中。以脂质体介导pcDNA3.1/MAD2 β真核表达载体转染胃腺癌细胞SGC790 1。以体外药敏试验检测转染MAD2 β的胃癌细胞及其对照组细胞对化疗药物的敏感性。通过流式细胞仪检测MAD2 β基因转染组和对照组胃癌细胞在细胞周期中的分布和细胞内阿霉素的荧光强度。结果 RT PCR扩增获得约 0 .5 3kb片段 ,DNA序列测定证实为MAD2的一种选择性剪接形式 ,命名为MAD2 β。重组正义真核表达载体pcDNA3.1/MAD2 β瞬时转染SGC790 1细胞 ,经MTT法证实 ,转染细胞SGC790 1/MAD2 β对化疗药物阿霉素、长春新碱和丝裂霉素的耐药性增强。与SGC790 1/pcDNA3.1比较 ,阿霉素大剂量短期作用后 ,SGC790 1/MAD2 β细胞内的平均荧光强度比对照组低 (P <0 .0 5 )。结论 MAD2 β基因在一定程度上增强了人亲本胃癌细胞SGC790 1对化疗药物的耐受性 ,其可能的机制为肿瘤细胞在化疗药物作用下 ,有丝分裂出现异常 ,耐药细胞通过调控MAD2?

先天性纤维蛋白原缺陷症分子诊断及基因治疗的研究进展

先天性纤维蛋白原缺陷症是罕见的以凝血功能障碍为主要特点的血液疾病,多有出血、血栓形成等临床表现,实验室检查可发现凝血功能异常,既往以临床诊断为主要方式。近年来随着分子遗传学和分子诊断的进步与发展,致病机制研究不断深入,突变基因及新的突变位点陆续被发现,分子诊断逐步成为诊断该病的主要标准,基因治疗作为目前前沿的方案,对该病的治疗仍处于起步阶段。通过对该罕见病三种致病基因(FGA、FGB、FGG)及相应突变方式及致病机制进行归纳总结,探究目前该病基因治疗的研究进展,以提升大众对于此病的关注。

抗凝蛋白缺陷与反复自然流产的相关性研究

目的探讨抗凝蛋白缺陷与不明原因的反复自然流产(RSA)的相关性。方法采用血液凝固法、发色底物法检测102例RSA患者和36例经产健康体检妇女血浆中蛋白S(PS)、蛋白C(PC)及抗凝血酶Ⅲ(AT-Ⅲ)的活性水平。结果 RSA组PS、PC及AT-Ⅲ缺陷的发生率分别为28.4%、1.9%及21.2%,PS缺陷及AT-Ⅲ缺陷与健康对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),PC缺陷与健康对照组间差异无统计学意义(P>0.05);RSA晚期流产组(孕周大于或等于12周)的PS和AT-Ⅲ缺陷发生率分别为48.9%和35.6%,与健康对照组比较均有统计学差异(P<0.01),RSA早期流产组(孕周小于12周)的PS和AT-Ⅲ缺陷发生率与健康对照组比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论抗凝蛋白缺陷可能与RSA的发生,特别是晚期流产的发生有关。

有氧运动对载脂蛋白E基因缺陷小鼠主动脉C反应蛋白表达水平的影响

目的:本实验以载脂蛋白基因缺陷(ApoE-/-)小鼠为研究对象,观察其在动脉粥样硬化(AS)发病过程中有氧运动对脂联素和C反应蛋白(CRP)的影响,以期探讨有氧运动通过脂联素-CRP发挥抗AS作用的机制。方法:8周龄雄性ApoE-/-小鼠20只,随机分为安静组(C)10只和运动组(E)10只。两组小鼠均饲以高脂饲料,C组不训练,E组小鼠进行14周跑台运动。14周末取材比较两组小鼠主动脉管壁及斑块的病理变化,检测比较其脂肪组织脂联素mRNA表达、血清脂联素水平及主动脉CRP表达、血清CRP水平。结果:E组小鼠与C组小鼠相比,主动脉血管壁纤维弹力板和内膜较完整,AS斑块面积相对较小。E组小鼠脂肪组织脂联素mRNA表达及血清水平较C组显著增加,主动脉CRP的表达及血清水平较C组小鼠则有显著降低,且主动脉CRP的表达与脂联素mRNA表达及血清水平呈显著负相关。结论:有氧运动可以通过提高血清脂联素、脂联素mRNA表达水平的途径,有效降低血清CRP和主动脉CRP的表达,从而发挥延缓AS发展的作用,这可能是运动通过脂联素-CRP发挥抗AS作用的另一机制。

人类免疫缺陷病毒蛋白酶抑制剂的研究开发与展望

人类免疫缺陷病毒(HIV)是艾滋病的主要致病因,针对艾滋病的化学药物治疗中HIV蛋白酶抑制剂发挥的重要作用,此文综述了HIV蛋白酶抑制剂的研究现状、研究进展以及研究开发策略等。

两个终止密码子导致的遗传性蛋白C和蛋白S缺陷症

目的:研究1个蛋白C(PC)和1个蛋白S(PS)缺陷症家系的表型诊断和基因特征。方法:PC活性(PC:A)和PS活性(PS:A)用发色底物法测定;PC抗原(PC:Ag)和PS抗原(PS:Ag)用ELISA方法测定。用PCR扩增PC和PS基因各个外显子及其侧翼序列,用直接测序法检测突变点。利用逆转录PCR(RT-PCR)分析PCmRNA水平变化。同时利用蛋白印迹分析血浆中PC含量的变化。结果:先证者1的PC:A为49%,PC:Ag为1.34mg/L,基因检测发现PC基因9号外显子的8831有G→A杂合无义突变,导致Trp372Stop;先证者2的PS:A为29%,PC:Ag为8.3mg/L,14号外显子Gln522(CAG)→Stop(TAG)。结论:G8831A杂合突变引起Trp372Stop,其可导致遗传性PC缺陷症;Gln522Stop可导致遗传性PS缺陷症。

一个遗传性蛋白C缺陷症家系表型与基因突变分析

目的:对一个遗传性蛋白C(PC)缺陷症家系进行实验室表型检测和基因突变分析,探讨其分子发病机制。方法:对先证者及其家系成员(共3代6人)进行血浆蛋白C活性(PC:A)、蛋白C抗原(PC:Ag)含量及其他相关凝血指标检测。采用DNA直接测序法分析先证者蛋白C基因(PROC)9个外显子及侧翼序列,发现突变位点,再对其家系成员进行该位点的突变检测。用ClustalX-2.1-win软件分析氨基酸突变位点的保守性;用PolyPhen-2在线生物信息学软件分析突变对蛋白质功能的危害程度;用Swiss-PdbViewer软件和PIC程序进行蛋白模型分析。结果:先证者、其儿子和二姐的血浆PC:A与PC:Ag均平行下降,介于39%～58%。这3人的PROC基因第9外显子携带c.997G>A杂合错义突变(p.Ala291Thr)。生物信息学软件分析提示:p.Ala291Thr为有害突变;Ala291在同源物种间不高度保守;蛋白模型分析显示:p.Ala291Thr突变导致Thr291与Pro327之间新增一氢键,改变了氨基酸的空间构型,使PC的稳定性下降。结论:该先证者PROC基因第9外显子存在c.997G>A杂合错义突变,导致p.Ala291Thr;p.Ala291Thr为未报道过的新突变,是该家系遗传性PC缺陷症的主要原因。

枯草芽孢杆菌YYW-1蛋白酶缺陷株诱变与筛选

从羽毛废弃物中筛选出一株高效降解羽毛、产角蛋白酶和蛋白酶的革兰氏阳性芽孢杆菌,经鉴定为枯草芽孢杆菌(Bacillus sublitis),命名为B.sublitisYYW-1。利用紫外线对菌株YYW-1进行诱变,筛选蛋白酶缺陷株,获得蛋白酶活性丧失的诱变株YYW-1-5,其蛋白酶活性残余22.7%,而角蛋白酶活性残余94.7%,没有明显的变化。

142例静脉血栓栓塞症患者遗传性蛋白C缺陷症的研究

目的:研究遗传性蛋白C缺陷症在静脉血栓栓塞症中的发病率以及与获得性易栓因素的关系。方法:检测142例静脉血栓栓塞症患者的蛋白C活性及含量,明确遗传性蛋白C缺陷症的发病率;调查患者的获得性易栓因素,了解与遗传性蛋白C缺陷症的相关性。结果:在142例静脉血栓栓塞症患者中有11例遗传性蛋白C缺陷症。长期卧床、制动和创伤这两种因素可能是诱导遗传性蛋白C缺陷症发生静脉血栓栓塞症的主要获得性因素。结论:遗传性蛋白C缺陷症在我国静脉血栓栓塞症患者中可能占有较高的比例,防止各种类型的创伤和避免长时间制动是预防此类患者发生静脉血栓栓塞症的重要措施。

citrin蛋白缺陷导致的肝内胆汁淤积症10例临床观察

目的总结citrin蛋白缺陷导致的肝内胆汁淤积症患儿的临床表现和实验室检查的特点。方法对10例肝内胆汁淤积和黄疸患儿进行常规实验室检查,结合血串联质谱分析及基因检查诊断为新生儿肝内胆汁淤积症(NICCD)。对确诊患儿的临床表现、常规实验室检查、血氨基酸谱和酰基肉碱谱等进行分析。结果 NICCD患儿黄疸出现较早,迁延不退并加重,食纳下降,生长发育迟缓。实验室改变包括γ-谷氨酰转移酶、碱性磷酸酶以及甲胎蛋白升高,高胆红素血症,低蛋白血症,凝血酶原时间延长,明显低血糖,均有轻度高氨血症。肝活检病理提示大部分肝细胞呈空泡样变性,肝细胞内胆汁淤积,胆管区胆小管扩张。串联质谱分析发现多数患儿有特异性瓜氨酸、蛋氨酸、苏氨酸和酪氨酸升高,以及游离肉碱、C2、C3和长链酰基肉碱升高。结论不明原因黄疸患儿鉴别诊断应考虑到NICCD,早期进行串联质谱分析对明确NICCD的诊断及预后具有重要意义。