罕见α-地中海贫血融合基因的产前诊断与鉴定

鉴定一例在产前诊断过程中通过基因检测发现的罕见α-珠蛋白融合基因。通过胎儿羊水样本以及其父母血液样本的进一步分子生物学分析明确了罕见α珠蛋白融合基因的遗传模式,并探讨该融合基因的生成原因。对羊水标本、父母外周血标本进行常见α-地贫基因型检测分析,并采用基因测序技术对胎儿以及家系基因型进行鉴定。胎儿羊水标本常见α-地贫基因型检出三条特异性条带,分别为1.7kb的αα条带、1.4kb的-α4.2缺失型条带、1.2kb的-αSEA东南亚缺失型条带。基因测序结果显示胎儿基因型为Fusion gene/--SEA,该融合基因由于α珠蛋白链上的α2 基因与ψα1基因发生融合所致,为一种罕见的α-地中海贫血基因型。家系遗传分析显示,胎儿的基因型遗传自父亲含有融合基因(Fusion gene)的染色体和母亲带有-αSEA东南亚缺失的染色体。胎儿脐血血红蛋白电泳检测结果显示Hb Bart’s含量46.2%,明显高于常规血红蛋白H病患者出生时脐血Hb Bart’s的含量,将导致胎儿出生后患较重的血红蛋白H病。本研究首先在广西人群中发现罕见的α-地中海贫血融合基因,该发现丰富了当地贫基因变异数据库,对地贫基因诊断和防治具有重要意义,为减少临床上地贫的漏诊和误诊提供指导。

血红蛋白H病胎儿及患者的血液学表型分析

目的分析血红蛋白(Hb)H病胎儿及患者的血液学、基因型的关系以及相关自然病程发展过程。方法采集2010-2022年在广西壮族自治区妇幼保健院就诊的1252例Hb H病胎儿及患者血样(包括174例胎儿脐带血,1062例>2岁患者外周血,16例罕见基因型Hb H病患者外周血),进行血液学及常规地中海贫血(地贫)基因型分析;另选择0~2岁Hb H 3.7、Hb H 4.2、Hb H CS和Hb H WS病患儿(n=278),采集外周血,检测红细胞发育变化趋势。采用多重探针杂交技术、微阵列比较基因组杂交技术联合一代Sanger测序对疑似罕见地贫患者进行基因突变检测。结果1062例>2岁的Hb H病患者中,基因缺失型(--/-α)占62.34%(662/1062),其中Hb H 3.7(--^(SEA)/-α^(3.7))、Hb H 4.2(--^(SEA)/-α^(42))较为常见,分别占42.28%(449/1062)和19.11%(203/1062);非基因缺失型(--/ααT或αTα/ααT)中,以Hb H CS(--^(SEA)/ααCS)、Hb H WS(--^(SEA)/ααWS)以及α^(CS)α/α^(CS)α为主,分别占16.85%(179/1062)、16.48%(175/1062)、1.98%(21/1062)。81.12%(537/662)的基因缺失型Hb H病患者表现为轻、中度贫血,Hb H病检出率范围为75%~80%。非基因缺失型中,Hb H WS病患者主要表现为轻度贫血(90%的患者血液Hb浓度>95 g/L),而Hb H CS和Hb H QS(--^(SEA)/ααQS)病患者则主要表现为中、重度贫血,患者外周血均能检出Hb H且含量普遍高于其他类型Hb H病患者。除Hb H CS和Hb H QS复合β-地贫时Hb A2值未显著升高外,其他类型Hb H病患者复合β-地贫时Hb A2值均升高(>3.5%)。各种类型Hb H病患者复合β-地贫时,均未检出Hb H峰。红细胞发育变化趋势检测结果显示,Hb H病患者红细胞计数较正常同龄人升高,而Hb、平均红细胞体积(MCV)、平均红细胞血红蛋白含量(MCH)均低于正常同龄人(均P<0.05),并在6个月至1岁时降到最低;贫血程度严重的Hb H CS病患者,其MCV值升高明显(P<0.001)。Hb H病胎儿脐带血的检测结果显示,α^(CS)α/α^(CS)α胎儿宫内贫血严重,其次为Hb H QS和Hb H CS病胎儿;脐带血中Hb Bart’s含量与贫血严重程度呈负相关(rs=-0.58,P<0.001);Hb H病复合β-地贫时,胎儿贫血情况未见明显改善,Hb Bart′s含量未见明显变化(均P>0.05)。此外,基因缺失型罕见Hb H病患者中,以Hb H 21.9(-α21.9kb/--^(SEA))、Hb H 2.4(-α^2.4)/--^(SEA))常见;非基因缺失型罕见Hb H病患者中,ααAmsterdam-A1/--^(SEA)和ααHb G-Georgia/--^(SEA)均为首见。结论不同类型之间及相同类型在不同发育时期的Hb H病患者临床表现具有异质性。当Hb H病患者复合β-地贫时,基因缺失型患者表型有所改善,而非基因缺失型患者未见明显改变。相较于正常人,Hb H病患者血液Hb、MCV、MCH均降低且红细胞生理变化更为急剧。