广西河池地区地中海贫血基因突变类型及民族分布特征分析

目的:了解广西河池地区人群地中海贫血的基因型、基因突变类型的构成情况及民族分布特征,为本地区地中海贫血防控及优生优育咨询提供参考依据。方法:对疑似地中海贫血人员采用跨越断裂点PCR技术(gap-PCR)、反向斑点杂交技术(RDB)进行基因检测,并对检测结果进行分析。结果:29136例疑似地中海贫血人员样本中共检出地中海贫血基因阳性17016例(检出率58.40%),男性检出率高于女性(χ^(2)=49.917,P<0.001),壮族、汉族、瑶族、仫佬族、毛南族间的地中海贫血基因检出率存在明显差异(χ^(2)=546.121,P<0.001)。α-地中海贫血基因型主要以--SEA/αα(16.67%)、-α3.7/αα(8.90%)、αCSα/αα(6.00%)为主,另检出47例--THAI/αα、2例HKαα/αα、2例--SEA/-α21.9和1例--THAI/αCSα4种罕见基因型;β-地中海贫血基因型以βCD17/βN(7.49%)、βCD41-42/βN(6.70%)、βCD71-72/βN(0.44%)为主;检出中、重型β-地中海贫血108例,其中81例有输血史,60例输血次数大于10次/年,有10例接受了骨髓移植。结论:河池地区地中海贫血以缺失型--SEA/αα为主,少数民族地中海贫血检出率高于汉族,中、重型β-地中海贫血有一定的发生率,中、重型患者多需定期输血及除铁治疗,极少数患者接受了骨髓移植。本研究为该地区地中海贫血防控及优生优育咨询提供了一定的参考依据。

1例罕见α-地中海贫血产前诊断与家系分子遗传学分析

目的 对1例疑似携带罕见地中海贫血(简称地贫)的产前诊断胎儿进一步测序分析,对先证者进行家系分子遗传学分析。方法 运用血常规和血红蛋白电泳进行地贫筛查,采用gap-PCR法和PCR-RDB法检测24种地贫突变,对疑似罕见地贫进行基因测序分析。结果 先证者为--~(SEA)地贫与α2基因IVS-Ⅱ-119地贫双重杂合子,其IVS-Ⅱ-119地贫基因遗传自母方,--~(SEA)地贫基因遗传自父方。结论 --~(SEA)/α~(IVS-Ⅱ-119)α HbH地贫患儿的诊断,为罕见地贫的遗传咨询和产前诊断提供科学理论依据。

温州地区地中海贫血基因突变类型分析

目的:了解温州地区地中海贫血(简称地贫)基因突变类型和构成比,为优生优育提供参考。方法:选取温州医科大学附属第一医院和温州医科大学附属第二医院门诊及住院的疑似地贫患者991例,进行地贫基因突变检测,其中3种缺失型α-地贫采用跨越断裂点PCR(GAP-PCR)法;3种α-地贫点突变和17种常见β-地贫突变采用反向点杂交(RDB)法。结果:991例疑似地贫患者中共检出431例地贫患者,阳性率为43.49%。其中α-地贫155例,最常见的为--SEA/αα缺失(占α-地贫的67.10%);检出β-地贫276例,最常见为CD41-42突变(占β-地贫的35.87%);同时检出αβ复合型地贫基因7例。结论:温州地区的地贫基因突变类型多且复杂,应加强基因诊断,为地贫的遗传咨询和临床诊疗提供参考。

地中海贫血基因突变检测技术专利现状

地中海贫血是全球热带和亚热带地区高发的单基因隐性遗传病,也是我国南方最常见且危害较大的遗传病。地贫的基因突变类型复杂且多样,基因检测产品通过检出受检者是否携带地贫基因及基因突变情况,为有效防控和治疗地贫提供检测依据。基因突变检测技术发展至今,涌现出多种检测技术,如高通量测序、ARMS、荧光PCR熔解曲线分析技术、基因芯片、核酸膜条、核酸质谱法等。

川南地区β地中海贫血基因突变类型的分析

目的了解川南地区β地中海贫血(简称β地贫)发生情况、基因突变类型及构成比,制定β地贫防治计划,有效降低β地贫的发病率提供数据参考。方法采用聚合酶链反应(PCR)和反向斑点杂交(RDB)技术对川南地区疑诊为地贫基因携带者进行β地贫基因分析。结果 319例疑似病例中检出192例β地贫基因携带者,检出率为60.1%;17种β地贫基因突变类型中共检出9种,突变频率较高的前3位依次为CD17(41.3%),CD41-42(27.39%),IVS-II-654(24.35%)。结论川南地区β地贫发生率较高,应加强β地贫血液学筛查和基因诊断,对预防重型地贫患儿的出生有重要意义。

中国福建南平地区地中海贫血基因突变类型研究

目的:了解福建省南平地区地中海贫血基因突变类型及频率,为本地区预防和控制中型和重型地中海贫血患儿的出生提供依据,减少出生缺陷。方法:采用跨越断裂点PCR(gap-PCR)技术结合反向点杂交法(RDB)进行α和β地中海贫血基因分型检测,对基因分型检测阴性者应用Gap-PCR法进行3种罕见缺失型地中海贫血检测,对检测阴性者采用Sanger测序法进行罕见α地中海贫血突变和β地中海贫血突变检测。结果:1120例标本参加地中海贫血基因分型检测,检出547例地中海贫血基因,检出率为48.8%(547/1120)。340例标本确诊为α地中海贫血,检出率为30.6%,其中--^SEA/αα^256例、-α^3.7/αα^44例、-α^4.2/αα^12例、αα^QS/αα^8例、Hb H病3例(--^SEA/-α^3.72例,--^SEA/-α^4.21例)、αα^CS/αα^2例、αα^^WS/αα^2例、-α^3.7/-α^3.71例、-α^3.7/αα^QS1例。1120例中含有11例罕见型α地中海贫血,8种罕见α地中海贫血突变组合类型,分别是αα^IVS-Ⅱ-55(T→G)inα1/αα^4例、αα^IVS-Ⅰ-62(C→T)inα1/αα^1例、αα^CD106(CTG→GTG)inα2/αα^1例、αα^HBA2:c.-24C>G/αα^1例、αα^IVS-Ⅱ-55(T→G)INα1/αα^IVS-Ⅱ-55(T→G)inα1/1例、αα^IVS-Ⅱ-55(T→G)inα1/αα^IVS-Ⅱ-119(G;+CTCGGCCC)inα21例、αα^IVD-Ⅱ-88(G→A)inα2/αα^1例和--^THAI/αα^1例。其中,5种α突变位点是首次报道,分别是αα^IVS-Ⅰ-62(C→T)inα1、αα^IVS-Ⅱ-55(T→G)inα1、αα^IVS-Ⅱ-119(G;+CTCGGCCC)inα2、αα^IVS-Ⅱ-88(G→A)inα2和αα^CD106(CTG→GTG)inα2;2种α突变位点再次在中国人群中检测到,分别是αα^HBA2:c.-24C>G和--^THAI。188例标本确诊为β地中海贫血,检出率为16.8%,其中β^IVS-Ⅱ-654/βN68例、β^CD41-42/βN 47例、β^CD17/βN 20例、β^28/βN17例,β^CD27-28/βN7例、βE/βN7例、β^CD71-72/βN3例、β^CD43/βN2例。同时,含有17例罕见型β地中海贫血,8种罕见β地中海贫血突变组合类型,分别是β^IVS-Ⅱ-81(C→T)/βN4例、β^Hb J-Bangkok/βN3例,β^Hb New York/βN3例、β(^-96(C→T)/βN 2例、β(IVS-Ⅱ-806(G→C)/βN 2例、βCodons 8/9/βN1例、β^Hb G-Coushatta/βN1例、β^IVS-Ⅱ-827(A→T)/βN1例。其中有3个β突变位点是首次报道,分别是β^-96(G→T)、β^IVS-Ⅱ-806(G→C)和β^IVS-Ⅱ-827(A→T);β突变位点再次在中国人群中检测到,分别是βCodons 8/9、β^Hb G-Coushatta、β^Hb J-Bangkok、β^Hb New York和β^IVS-Ⅱ-81(C→T)。19例确诊α地中海贫血复合β地中海贫血,共检出15种地中海贫血突变组合类型,包含2例罕见稀有α地中海贫血复合β地中海贫血,分别是αα^IVS-Ⅱ-55(T→G)/αα^复合β^IVS-Ⅱ-81(C→T)/βN、αα^IVS-Ⅱ-65(G→A)inα1/αα^复合β^Hb G-Coushatta/βN。结论:福建省南平地区地中海贫血基因突变类型具有遗传异质性,本地区地中海贫血防治策略应该以常见α-地中海贫血和β-地中海贫血的防治干预为主,同时也要重视罕见和未知基因突变类型的筛查和检测。

广东中山地区β-地中海贫血基因突变类型分析

目的建立β-地中海贫血基因诊断方法并统计分析本地区β-地贫基因突变类型。方法应用双重PCR结合反向斑点杂交技术(reversedotblot),检测中国人8个常见及9个罕见β-地贫基因突变位点。结果1025例受检标本中,检出β-地贫基因突变209例,涉及11个基因突变位点。CD41-42(-TTCT)、IVS-Ⅱ-654(C→D)、nt-28(A→G)、CD17(A→G)、CD71-72、βE为本地区最常见的β-地贫基因突变位点,各占40·1%、22·9%、13·3%、12·4%、2·8%、2·4%,上述6种突变类型占所有检出突变位点的93·9%。结论PCR结合反向斑点杂交技术(PCR-RDB)是地β-地贫检测的有效方法。β-地贫基因突变类型分布存在区域差异。

湖南地区206例儿童β-地中海贫血基因突变类型分析

目的分析湖南地区儿童β-地中海贫血患儿珠蛋白基因缺陷类型,为开展相关的研究与治疗提供依据。方法通过血液常规检查、血红蛋白电泳和红细胞渗透脆性分析筛查地中海贫血患儿,用PCR法扩增目的基因,使用反向膜杂交技术检测靶基因,判断基因突变类型,检测中国人8个常见及9个罕见β-地中海贫血基因突变位点。结果206例儿童β-地中海贫血中突变基因类型共有17种,分别为纯合子13例,基因型是CD41-42(2.43%),IVS-2-654(3.39%)和CD17(0.49%);杂合子175例,常见的基因型是CD41-42(40.77%),IVS-2-654(22.81%),CD17(7.76%),-28(7.28%),CD71-72(2.43%);双重杂合子18例,基因型是CD41-42/IVS-2-654(2.43%),IVS-2-654/-28(1.94%),CD41-42/CD17(1.46%),IVS-2-654/CD17(0.97%),CD41-42/CD27-28(0.49%),IVS-2-654/CD71-72(0.49%),IVS-2-654/-29(0.49%),CD41-42/-28(0.49%)。结论本研究发现湖南地区儿童β-地中海贫血患儿β-珠蛋白基因缺陷类型共有17种,β-地中海贫血基因突变类型分布存在区域差异。

广西地区β地中海贫血基因突变类型分析

目的探讨β地中海贫血的基因突变类型及临床表现型特点。方法采用反向斑点杂交技术检测中国人群8个常见位点和9个少见位点突变的共17种β地贫基因,分析β地贫基因型与临床表现型特点。结果β地贫1082例,检出10种突变基因类型,分别为β0的CD41-42、CD17、CD27-28、CD71-72、CD43和β+的IVS-2-654、-29、-28、IVS-1-1以及类似β地贫变化异常血红蛋白E(CD26)。814例杂合子β地贫中有9种基因型,β0杂合子637例(5种基因型),β+杂合子122例(3种基因型),血红蛋白E(HbE)55例。双重杂合子β地贫146例,β0/β+双重杂合子69例(12种基因型),β0/β0双重杂合子73例(7种基因型),β+/β+双重杂合子4例(4种基因型)。纯合子β地贫82例,β0纯合子β地贫77例(3种基因型),β+纯合子5例(1种基因型)。β地贫复合HbE40例(5种基因型)。结论β地贫基因突变类型与以往报告的广西β地贫基因型一致;β地贫临床表现型复杂多变;基因检测对于地贫的临床诊断、治疗和预防有重要的意义。

β地中海贫血基因突变类型的研究及产前诊断

目的开展β地中海贫血的基因分析及产前基因诊断。方法应用PCR-RDB技术,完成了54例β地贫患者及双亲共216条染色体的基因突变类型及频率数据。并进行8个家庭的8例β地贫高风险胎儿的产前诊断。结果 8例被检胎儿中4例为一种突变类型的杂合子,2例为双重杂合子,2例为正常胎儿。有6例出生后基因分析验证结果与产前诊断完全一致。结论显示,进行产前诊断能较准确地控制重型β地贫患儿出生,对实行优生具有重要意义。

PCR技术及其在中国人β地中海贫血基因突变类型和产前诊断中的应用

地中海贫血、甲型血友病及杜氏进行性肌营养不良(DMD)是我国常见和危害严重的遗传病,目前尚无满意治疗方法。开展基因诊断及产前诊断是防止患儿出生、取得预防效果、提高人口素质、优生优育的重要措施。本项目在国内最先建立并采用国际上先进的PCR即聚合酶链反应技术,大大减化了以往的基因诊断步骤,使之便于在全国推广。我们应用PCR结合ASO(等位基因特异的寡核苷酸)探针斑点杂交技术。

两例β-地中海贫血病例中罕见HBB基因突变的鉴定

目的明确2例疑似β-地中海贫血病例的珠蛋白基因突变,探讨基因型与血液学表型的关系。方法采用血细胞常规检测和血红蛋白电泳进行血液学表型分析,用PCR-反向点杂交法检测常见的α-地中海贫血和β-地中海贫血基因突变,应用PCR-DNA测序技术对β珠蛋白基因(HBB)进行测序,检测基因突变类型。结果2例无亲缘关系的汉族病例血液学检测结果呈现轻型β-地中海贫血样表型,但未检测到常见的α-和β-地中海贫血基因突变;DNA测序发现2个病例均为HBB基因Codon5(-CT)碱基缺失性突变(血红蛋白变异数据库HGVS命名为:HBB:c.17_18delCT,为β0突变)的杂合子。结论罕见β0突变Codon5(-CT)的杂合子携带者即可产生轻度贫血,联合运用血液学、血红蛋白电泳和基因检测是检出罕见地中海贫血基因突变的有效方法,在地中海贫血高发区有助于降低罕见致病突变的漏检率和减少重症患儿的出生。

罕见β-珠蛋白基因突变导致儿童β-地中海贫血的研究

目的:研究儿童罕见β-地中海贫血(β-地贫)的β-珠蛋白基因突变类型、血液学特征和临床表现。方法:选取广西医科大学第一附属医院2022年1—12月检测地中海贫血的病例。血细胞分析仪行血常规检测,高效液相色谱法行血红蛋白(Hb)分析;跨越断裂点聚合酶链反应(Gap-PCR)法、荧光PCR熔解曲线法和DNA测序检测α-地中海贫血(α-地贫)和β-地贫基因突变。结果:共检出99例β-地贫患儿,其中2例为罕见β-珠蛋白基因突变导致β-地贫的患儿。病例1为1岁女患儿,轻度贫血,血常规示Hb 101.00 g/L,红细胞计数(RBC)5.43×10^(12)/L,红细胞平均体积(MCV)56.90 fL,红细胞平均血红蛋白量(MCH)18.60 pg,红细胞平均血红蛋白浓度(MCHC)327.00 g/L,红细胞比容(HCT)0.31 L/L和红细胞体积分布宽度(RDW)0.19;Hb分析结果示Hb A25.70%,Hb F 2.60%。基因分析及DNA测序结果显示β-珠蛋白基因IVS-Ⅰ-2(T>C)突变杂合子。病例2为6岁男孩,轻度贫血,血常规示Hb 94.90 g/L,RBC 4.97×10^(12)/L,MCV 59.97 fL,MCH 19.11 pg,MCHC 318.70 g/L,HCT 0.30 L/L,RDW 0.15;Hb分析结果示Hb A25.80%,Hb F 1.90%。基因分析及DNA测序结果显示β-珠蛋白基因CD95(+A)杂合子突变。结论:首次在国内发现β-珠蛋白基因CD95(+A)杂合子突变导致β-地贫的患儿,临床表现为轻度贫血,Hb A2水平增高;首次报道国内儿童β-珠蛋白基因IVS-Ⅰ-2(T>C)杂合子β-地贫的血液学特征、Hb分析和临床表现。这两种β-地贫基因突变类型在国内较罕见,提示临床上容易漏诊。

贺州市地贫初筛阳性儿童β-地中海贫血基因突变类型分析

目的:研究贺州市β-地中海贫血患儿地中海贫血基因突变的位点及其频率分布情况。方法:对212例地贫初筛阳性者进行地中海贫血基因检测,抽取静脉血2mL(EDTA抗凝),采用PCR体外扩增结合DNA芯片反向点杂交技术,进行β-地贫的临床诊断。结果:212例地贫初筛阳性者共检出β-地中海贫血儿童72例,检出率为33.96%,共检出10种突变基因,22种基因型,居前4位的依次是:CD41-42(-TTCT)(38.89%)、CD17(A→T)(11.11%)、-28(A→G)(6.94%)、IVS-II-654(C→T)(5.56%),其中,单突变杂合子8种(70.83%),双突变杂合子10种(22.22%),单突变纯合子2种(4.17%),另外,检出少见位点突变CD14-15(+G)和CD41-42(-TTCT)/IVS-I-1(G→T\G→A)各1例,占2.78%。结论:贺州市是β-地中海贫血高发区,患儿基因突变类型较多,做好地中海贫血初筛普查非常重要。应对地中海贫血初筛阳性者进行地中海贫血基因诊断,同时,建立β-地中海贫血基因网络档案库。

广西β地中海贫血基因突变类型的研究

广西少数民族较多,交通不甚方便,β地中海贫血基因类型和发生率与其他省区可能有所不同,本文研究了β地贫30例56条染色体。材料和方法一、临床资料:30例重型β地贫,其中4例复合血红蛋白 E。男性17例,女性13例,年龄1～31岁,平均7岁,汉族18例,壮族12例,均为广西籍。临床上有贫血表现和肝脾肿大。Hb 20～93g/L,平均50.7g/L,RBC 1.69～3.94×1012/L,平均2.55×1012/L,网织红细胞2.1%～27%,平均6.9%。

β地中海贫血的基因突变类型及临床表现型特点

选取2015年6月~2015年12月收集的78例患者临床资料作为研究对象。结果本组78例患儿中，33例（42.31%）为 IVS-II654（C → T）、21例（26.92%）为 CD41-42（-TCTT）、8例（10.26%）为 TATAbox-28（A → G）、8例（10.26%）为 CD17（A → C）、5例（6.41%）为 CD27-28（＋C），SD43（G → T）、TATAbox-29（A → G）及 CD71-72（＋A）各1例；临床表现型特点主要包括年龄、血红蛋白 A2、血糖蛋白 F，其中-28/654型患儿发病年龄（11.31±7.82）个月，相较于41-42/654型（5.83±3.50）个月、17/654型（3.49±0.56）个月差异显著，具有统计学意义（t=5.649、8.809， P〈0.05）；相较于其他类型，-28/41-42型 Hbg（85.97±5.98）l 显著更高，差异具有统计学意义（P〈0.05）。β地中海贫血基因突变类型具有显著的复杂性，不同类型下的临床表现性特征也会产生相应变化，积极利用基因检测技术加强β地中海贫血的诊断对提高治疗针对性与有效性尤为重要。

闽南地区21例罕见地中海贫血基因突变分析

目的研究福建闽南地区地中海贫血(又称地贫)的罕见基因突变类型。方法收集2017年11月至2022年5月厦门大学附属成功医院来自于福建闽南地区的38例因血液学检测的结果与常规基因突变测定结果不相符、可能是罕见的地贫类型的样本,其中男16例,年龄5~47岁;女22例,年龄15~56岁,运用跨越断裂点聚合酶链反应和DNA测序法进行一一鉴定。结果本研究检出了地贫罕见基因突变21例,其中包括了罕见的α珠蛋白基因突变6种,分别是8例泰国型缺失(--T HAI)、2例中国香港型缺失(HKαα)、2例菲律宾型(--FIL)、1例CD 30(-GAG)、1例CD 122 CAC>CAG,WSM和1例αα/αααanti4.2,其中,2例--FIL来源于一对母子;罕见β珠蛋白基因突变6种,分别为1例CD56 GGC>GAC、2例IVS I-129 A>G、1例同时检出CD54 GTT>GTC和Terminal CD+32 A>C两种突变、1例113A>G(Poly A(A>G)AATAAA>AATAAG)、1例越南型-HPFH(Vietnamese HPFH)缺失型β地贫,其中CD54 GTT>GTC突变为首次报道。结论本研究通过测定的几种较罕见地贫基因加以了分析,对福建闽南地区地贫基因突变的种类加以了补充,可为地贫基因的检测诊断提供必要的分子信息。

海南昌江地区人群αβ复合型地中海贫血基因突变类型的研究

目的:研究海南昌江地区人群αβ复合型地中海贫血(地贫)基因突变类型及检出率.方法:采用膜反向杂交技术检测β地贫基因.用gap-PCR法检测三种常见α地贫缺失基因型:东南亚型缺失(--SEA)、右侧缺失(-α3.7)、左侧缺失(-α4.2),采用反向点杂交法检测3种常见的突变型α-地中海贫血基因(QSM、CSM和WSM).结果:海南昌江地区αβ复合型地中海贫血检出率高,在212例β地贫患者中检出复合α地贫的共102例,检出率为48.11%,β地贫杂合子复合-α4.2/α是本次研究中检出的主要复合型地贫类型,其次为-α3.7/αα,以轻型β地贫复合α地贫为主要突变类型.结论:海南昌江地区αβ复合型地贫检出率高.-α4.2/αα是本地区β地贫杂合子检出的主要复合α地贫基因型,其次为-α3.7/αα.准确诊断β地贫合并α地贫双重杂合子对本地人群正确进行遗传咨询和做好优生优育的准备都具有十分重要的意义.

1例产前诊断罕见β-地中海贫血的分析

目的通过回顾性分析1对产前地中海贫血筛查阳性的夫妇及其胎儿的诊断、基因检测过程,探讨罕见地中海贫血的产前诊断策略。方法抽取可疑孕妇及其丈夫的静脉血标本进行血常规和血红蛋白电泳检查。用抽取的可疑孕妇及其丈夫的静脉血标本及胎儿的羊水标本,采用多重跨越断裂点聚合酶链式反应(Gap-PCR)方法和聚合酶链式反应/反向点杂交法(RDB-PCR)检测三者的地中海贫血基因类型。对不符合遗传规律的结果进一步利用β-珠蛋白基因序列测序进行分析。结果孕妇及其丈夫的红细胞平均体积(MCV)和红细胞平均血红蛋白含量(MCH)均减低。孕妇及其丈夫的血红蛋白电泳结果显示血红蛋白A2(HbA2)和血红蛋白F(HbF)均升高。在常见地中海贫血基因检测中,受检孕妇地中海贫血基因型为-α4.2/αα、41-42M/βN,其丈夫地中海贫血基因型为-α3.7/αα、-28M/βN。胎儿地中海贫血基因型为αα/αα、41-42M/41-42M,不符合遗传学规律。测序结果显示,孕妇的β-珠蛋白基因存在CD41-42(-TTCT)突变杂合子,其丈夫的β-珠蛋白基因测序结果为-28A->G突变与罕见的CD43(GAG→AAG)突变双重杂合突变。胎儿(羊水)的测序结果为CD41-42(-TTCT)突变和罕见的CD43(GAG→AAG)突变的双重杂合突变,测序结果符合遗传学规律。结论应严格按照地中海贫血筛查到诊断的步骤对可疑的夫妇进行检查,对地中海贫血初筛阳性的夫妇进行产前诊断时,如一方存在检测结果与临床表型不吻合的情况或胎儿结果不符合遗传学规律时,应采用基因测序等方法进一步检测,联合应用多种方法进行确诊,从而避免重型地中海贫血患儿的出生。

重庆市璧山区孕妇地中海贫血基因缺失和突变类型分析

目的:研究重庆市璧山区孕妇地中海贫血基因缺失和突变类型。方法:选取重庆市璧山区孕妇1 080例,对其地中海贫血基因缺失和突变类型进行检测,分析检测结果。结果:15种突变类型β-地贫阳性例数159例、3种缺失型α-地贫阳性例数239例、2种突变型α-地贫阳性例数5例,总计403例,阳性率37.31%。结论:对重庆市璧山区孕妇地中海贫血基因缺失和突变类型进行检测,能够为临床诊疗提供有利依据。