罗伊氏菌素对产气荚膜梭菌的体外抑制作用

产气荚膜梭菌(Clostridium perfringens,Cp)是一种急性人畜共患病——坏死性肠炎的主要病原菌。罗伊氏菌素(Reuterin)是少数益生菌以甘油为发酵底物的产物,具有广谱抗菌活性。本研究旨在观察罗伊氏菌素对产气荚膜梭菌不同细菌型的体外抑制作用,以及不同储存温度对罗伊氏菌素抑菌性能的影响。利用甘油诱导罗伊氏乳杆菌合成罗伊氏菌素,通过丙烯醛-色氨酸法测定其浓度。以96孔板OD检测法和平板滴定法测定罗伊氏菌素对A型、B型、C型、D型和E型5种产气荚膜梭菌标准菌株的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)。比较-20℃、室温RT(25℃)及37℃储存24 h后的罗伊氏菌素对产气荚膜梭菌A型和C型的抑菌性能。结果表明:罗伊氏菌素样品浓度为26.13μmol/mL。不同浓度罗伊氏菌素处理后,96孔板法抑菌性能检测中A型和D型最为敏感,MIC值分别为0.78μmol/mL和0.52μmol/mL,B型、C型和E型菌株也较敏感,MIC值分别为1.57μmol/mL,1.57μmol/mL和1.83μmol/mL;平板滴定法中0.26μmol/mL罗伊氏菌素处理后5种标准菌已全部被抑制。罗伊氏菌素经不同储存温度处理后测定抑菌性能,以产气荚膜梭菌A型和C型为例,结果抑菌性能未发生变化,其MIC分别为0.78μmol/mL和1.57μmol/m L。本研究证明,罗伊氏菌素对产气荚膜梭菌具有较好的体外抑制作用,且其抑菌性能不受储存温度影响。

罗伊氏菌素与儿茶素协同对变异链球菌的抑制作用

为探讨儿茶素与罗伊氏菌素(主要抗菌成分为3-羟基丙醛(3-hydroxypropionaldehyde,3-HPA))对诱发龋齿的变异链球菌的抑制作用及其机制,本研究测定了罗伊氏菌素与儿茶素单独使用和联合作用时对变异链球菌的最小抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC),经计算分级抑制浓度指数得知,当儿茶素(1/8 MIC)和3-HPA(1/4 MIC)联合使用时具有协同作用。测定生物膜含量、胞外多糖(extracellular polysaccharide,EPS)含量和有机酸含量3个指标时发现,协同组使各指标含量显著减小(P<0.05),且效果优于单一组。扫描电子显微镜结果显示,协同组生物膜结构改变明显、膜厚度降低、菌体数量减少。综上可看出,儿茶素和3-HPA协同使用能够抑制菌体的聚集与黏附、参与底物代谢,提高酸度、延缓生物膜生长成熟,可作为新型抑菌剂应用于防龋产品,为今后开发天然、安全的防龋产品提供理论依据。

罗伊氏乳杆菌体外抑菌和免疫调节性能的研究

采用牛津杯法,比较了罗伊氏乳杆菌不同培养上清液对单增李斯特菌、金黄色葡萄球菌、阪崎克罗诺杆菌、大肠杆菌4种指示菌的抑菌性能;以小鼠巨噬细胞系RAW264.7为细胞模型,考察了罗伊氏乳杆菌的免疫调节作用。结果表明:罗伊氏乳杆菌甘油发酵的上清液较MRS培养的上清液,对4种指示菌的抑菌性能都有明显提高,其中对金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径提高达40 mm;加热处理甘油发酵的上清液,能够增强罗伊氏乳杆菌对4种指示菌的抑菌活性;罗伊氏乳杆菌能够明显抑制脂多糖(LPS)刺激的小鼠巨噬细胞系RAW264.7分泌炎性细胞因子IL-6。

罗伊氏乳杆菌的益生功能

罗伊氏乳杆菌是目前已报道的几乎可存在于所有脊椎动物和哺乳动物肠道内的乳酸杆菌,是具有益生功效的肠道益生菌。通过对罗伊氏乳杆菌良好的肠道定植能力和其产生的罗伊氏菌素的介绍,阐明其可能的益生作用机理。重点论述了罗伊氏乳杆菌促进人类和动物健康功能的研究进展,并探讨了今后罗伊乳杆菌益生菌制剂的工业化发展趋势。