一例输入性非洲锥虫病的实验室诊断

目的对一例输入性非洲锥虫病进行实验室诊断。方法收集住院患者病例资料,采用吉氏染色法镜检患者的血样和脑脊液样品。提取患者血样中布氏锥虫基因组DNA,以布氏锥虫表达位点相关基因(ESAG)、冈比亚锥虫特异性糖蛋白(Tgs GP)和罗得西锥虫血清抗性相关(SRA)基因为靶基因,进行PCR扩增,对扩增产物进行电泳、测序,在Gen Bank中进行同源性比对。结果患者,女,41岁,福建福州人,在坦桑尼亚赛伦盖蒂国家公园观看动物期间(2018/07/28-29),右后脚跟被不明昆虫叮咬,8月6日回国。8月8日开始出现发热、咳嗽、全身无力等症状,于福州市某大型三甲医院就诊,临床诊断为感染性发热。经头孢地尼(抗感染)和散利痛(退热)治疗后,未见好转。患者于8月9日转诊到福州市另一大型三甲医院,经头孢唑肟(抗感染),达菲(抗病毒),沐舒坦、十位龙胆花(化痰),天兴、复方二氯醋酸异丙胺(保肝),营养支持等治疗,体温仍控制不佳,肝酶进行性升高。8月14日,患者将医院采集的血样和脑脊液送福建省疾病预防控制中心检测疟原虫。吉氏染色镜检结果显示,全血样本中未见疟原虫,但可见疑似布氏锥虫的锥鞭毛体。脑脊液中未检出锥虫。对患者血样作进一步分子生物学检测,PCR结果显示,布氏锥虫ESAG属特异性引物扩增片段长度为260 bp,冈比亚锥虫特异性引物未扩增出条带,罗得西锥虫特异性SRA引物扩增片段长度为266 bp。序列比对结果显示,EASG的扩增序列与AY682003.1同源性为95%,SRA基因的扩增序列与AJ345058.1同源性为99%。患者确诊为罗得西锥虫感染后,分别于第1、3、7、14、21天静脉注射20 mg/kg苏拉明(由WHO提供),每次注射剂量不超过1 g。1个疗程结束后,患者基本恢复,出院后按医嘱定期至医院复查,均未检出锥虫。结论该病例经实验室诊断分析,确诊为输入性罗得西锥虫感染。