夹层杯集菌离心涂片法与改良罗氏培养法检测抗酸杆菌的比较

目的评价夹层杯集菌离心涂片法（夹层杯法）检测抗酸杆菌的临床诊断价值。方法收集2008年7—12月就诊于湖南省湘潭、湘乡、邵东和耒阳4个县（市）结核病防治部门共1190例肺结核可疑症状者的1782份痰标本（晨痰642份，即时痰1140份），每份标本同时采用夹层杯法与改良罗氏培养法（培养法）平行处理，对其检测结果进行比较。结果对晨痰标本检测的阳性率，培养法为26．64％（171／642），高于夹层杯法的阳性率23．52%（151／642），两者差异有显著性（Х^2=4．56，P=0．04）；对即时痰标本检测的阳性率，培养法为23．33％（266／1140），高于夹层杯法的阳性率18．07％（206／1140），两者差异有高度显著性（Х^2=34．60，P=0．00）。夹层杯法对晨痰的阳性检出率高于即时痰（Х^2=7．62，P=0．01）；培养法对晨痰的阳性检出率与即时痰比较，差异无显著性（Х^2=2．42，P=0．12）。结论夹层杯法检测抗酸杆菌的阳性率低于培养法，但简单、省时，便于进行质量控制，是一种很有推广价值的检测方法；夹层杯法检测晨痰抗酸杆菌的阳性率较高，故应尽量留取晨痰作抗酸杆菌检测。

结核菌玻片快速培养法与罗氏培养法比较

将结核菌玻片快速培养法与罗氏培养法进行比较.方法:自 2014 年 1 月至 2015 年 1 月门诊、住院已确诊或可疑是结核病的患者 120 例其中随机分为采用 B960 进行快速培养药敏组和改良罗氏培养基组,将两组结果进行比较.结果:结核菌玻片快速培养法所需时间明显短于罗氏培养法.结核菌玻片快速培养法的药物敏感试验结果与罗氏培养法相比,符合率在90%以上,平均报告时间短于罗氏培养法.结论:结核菌玻片快速培养法有助于肺结核的诊断和治疗,是一种快速有效可靠的方法。

痰直接厚涂片法和改良罗氏培养法检查结果的比较

目的探讨结核菌细菌学检查方法对肺结核的诊断价值。方法收集荆门市疾病预防控制中心结核病防治所2008年1-5月的30例临床肺结核患者的合格痰标本,对其采用直接厚涂片法(即在薄涂片法的基础上把痰液体积增加1.5-2.0倍量进行涂片),同时将标本接种到改良罗氏培养基上进行分支杆菌分离培养,并对涂片与培养结果进行比较与分析。结果30例肺结核患者的痰标本细菌学报告为:直接厚涂片法15例阳性,15例阴性;改良罗氏培养基法28例阳性,2例阴性。其中15例属涂片阳性培养阳性,13例属涂片阴性培养阳性,2例属涂片阴性培养阴性。结论痰涂片简便、快捷、成本低,是可以直接发现病原菌的检查方法,但其敏感性低;而传统的改良罗氏培养基法敏感性明显高于涂片法,精确可靠且特异性高,不仅能了解分枝结核杆菌有无生长繁殖能力,还为进一步试验(药敏、菌型鉴定)提供了基础。

结核菌培养方法对照与效果分析

结核病病程长，病死率高，而结核菌分裂周期长，生长速度慢，给临床诊断和治疗带来许多困难。因此结核工作者高度关注和重视结核菌的培养。本文使用简易结核菌血清琼脂斜面培养法与传统罗氏培养法、BacT ALERT3D 培养系统进行对照试验，现将结果分析报告如下。

T-SPOT.TB与分枝杆菌改良罗氏固体培养法在肺结核诊断中的价值比较

目的比较结核感染T淋巴细胞酶联免疫斑点试验(T-SPOT.TB)与分枝杆菌改良罗氏固体培养法在肺结核诊断中的价值。方法选择2017年1月至2018年1月于新蔡县人民医院就诊的80例疑似肺结核患者为研究对象,以分枝杆菌改良罗氏固体培养法为金标准,采用Kappa一致性检验分析T-SPOT.TB检查结果与金标准的一致性。结果 80例疑似肺结核患者中,分枝杆菌改良罗氏固体培养法检测活动性结核病显示41例为阳性,39例为阴性。80例疑似肺结核患者中,T-SPOT.TB检测结核分枝杆菌感染显示46例为阳性,34例为阴性。T-SPOT.TB与分枝杆菌改良罗氏固体培养法的一致性Kappa值为0.763,一致性良好。结论 T-SPOT.TB有助于检测结核分枝杆菌感染,从而辅助指导肺结核的诊断。

两种结核分枝杆菌培养法在结核小鼠感染模型实验中的应用对比

目的采用两种结核分枝杆菌培养法(BACTEC MGIT 960培养法与罗氏(L?wenstein-Jensen,L-J)培养法)同时验证利福平(rifampin,RIF)在结核感染小鼠模型中的治疗效果,探讨采用BACTEC MGIT 960培养系统在结核感染的小鼠模型中的应用价值。方法实验分为BACTEC MGIT 960培养组与L-J培养组,经尾静脉注射1.0×10~6 CFU/mL H37Rv菌液感染36只C57BL/6雌性小鼠,感染一周后18只小鼠采用利福平治疗四周,18只小鼠注射等量磷酸缓冲液(PBS)作为对照,用BACTEC MGIT 960快速培养与罗氏培养法对36只小鼠肺、脾及肝组织匀浆液进行培养。结果采用BACTEC MGIT 960培养法,RIF治疗组中肝、肺及脾组织培养物的报阳时间分别为(187.11±10.20) h、(347.22±12.70) h、(276.39±13.09) h,对照组为(142.50±11.70) h、(251.67±16.63) h、(230.28±7.22) h,组间对比差异有显著性(P<0.001);罗氏培养法,RIF治疗组中肝、肺及脾组织荷菌量分别为(5.15±0.15) log_(10) CFU、(3.30±0.23) log_(10) CFU、(3.40±0.25) log_(10) CFU,对照组荷菌量分别为(5.90±0.25) log_(10) CFU、(3.88±0.31) log_(10) CFU、(4.15±0.30) log_(10) CFU,组间对比差异有显著性(P<0.001)。结论采用BACTEC MGIT 960培养法和罗氏培养法进行荷菌量检测,其培养结果相符,但是前者检测出阳性结果时间平均缩短一半,并且区分度也较高,说明BACTEC MGIT 960培养法在动物模型的荷菌量检测中更有优势,可运用于结核感染动物模型中荷菌量的检测。

结核分枝杆菌培养快速烟酸测定法的研究

目的评价结核分枝杆菌培养快速烟酸测定法在肺结核诊治中的应用价值,建立一种经济、快速的结核分枝杆菌培养方法。方法将能与结核菌代谢产物-烟酸发生颜色反应的物质加入结核分枝杆菌液体培养基中,对128例患者痰标本进行抗酸菌培养,同时以改良罗氏培养法作为对照,对两种方法所用时间进行比较。结果快速烟酸测定法比改良罗氏培养法提前10 d左右。结论快速烟酸测定法比常规结核分枝杆菌培养方法所用时间短,经济、实用、快速,适合在各级结核病医院推广应用。

痰涂片法与痰培养法检测抗酸杆菌结果比较

为评价痰标本直接厚涂片法和改良罗氏培养法检测抗酸杆菌对肺结核的诊断价值，笔者对377例肺结核患者同时应用这两种方法进行抗酸杆菌检测。现将结果报道如下：

两种方法在结核分枝杆菌培养中的比对研究

目的比较MGIT960系统液体培养法与改良罗氏(L-J)培养法在结核分枝杆菌培养中的效果。方法选择2015年1月至2017年12月到该所就诊的活动性肺结核患者3 685例,对每份病例标本分别进行痰涂片抗酸染色(萋-尼法)镜检、改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法,并分别计算抗酸染色镜检与改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法的阳性符合率;统计改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法的阳性率、污染率及培养时间。结果痰涂片镜检与改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法的阳性符合率分别为94.21%(114/121)和82.64%(100/121)。改良罗氏(L-J)培养法和MGIT960系统液体培养法结果符合率为93.70%(3 197/3 412),所需的培养时间分别为28.0(25.0~31.0)d和16.5(14.0~19.0)d。结论MGIT960系统液体培养法阳性率与传统的改良罗氏(L-J)培养法基本一致,报告时间平均缩短至16.5 d,比改良罗氏(L-J)培养法提前10.0 d以上,为临床早诊断、早治疗提供了可靠依据,而且为后续进行的药敏试验提供了菌株。

结核菌及其耐药性不同检测方法的临床应用评价

目的对目前临床上用于检测结核分枝杆菌(MTB)及其耐药性的传统及分子生物学方法进行系统评价,为设计合理的诊断路径提供指导意义。方法对标准菌株(H37Rv)、敏感、单耐及耐多药MTB进行梯度浓度稀释后,作为评估的实验样本,从检测结果的准确性、检测周期、最低检出限方面对不同方法进行评价。结果MTB检测方面,XpertMTB/RIF检测MTB的检出下限(3×10~2cfu)与培养法相当,比基因芯片和GenoType~ MTBDRplus的检出下限低;耐药性检测方面,在MTB含量不足(≤3×10~2cfu)的情况下XpertMTB/RIF对利福平(RFP)的检测存在假阳性结果,GenoType~ MTBDRplus检测3×10~4cfu链霉素耐药MTB时出现RFP和异烟肼(INH)耐药的假阳性结果;检测周期方面,XpertMTB/RIF在2 h内可完成报告,基因芯片和GenoType~ MTBDRplus在当天8 h内可完成报告,培养及比例法药敏需4~8周可报告结果。结论目前不同的MTB及耐药检测方法各有优缺点,在临床应用方面应综合考虑患者的病情、经济状况等选取合理的诊断路径。

采用快速离心沉淀法检测初诊肺结核患者痰内抗酸杆菌

目的:与罗氏培养法进行比较,分析快速离心沉淀集菌涂片法,检测初诊肺结核患者痰液抗酸杆菌的效果,指导以后结核病的细菌学检查。方法:对90例来我院就诊且诊断为肺结核的初诊患者收集痰液,作快速离心沉淀集菌涂片和罗氏培养。结果:初诊病人离心沉淀集菌涂片法阳性率为73.3%,罗氏培养法阳性率为66.7%;两种方法检出率的差异无显著性(χ2=0.95,P>0.05)。结论:对于初诊病人,留取3份痰标本作快速离心沉淀集菌涂片可以达到和罗氏培养相接近的阳性检出率。

脊柱结核不同技术与病理标本结核分枝杆菌培养及药敏试验对比

目的比较研究脊柱结核Bac T/ALERT3D法、改良罗氏培养法等不同技术与病理标本脓液、病灶壁等结核分枝杆菌培养及药敏试验结果,探讨应用价值较高的技术和标本。方法 2016年2月—2018年2月期间,方便选择该院脊柱结核患者的病理标本作为资料,共96例,包含脓液、病灶壁,并进行结核分枝杆菌培养,分别采用Bac T/ALERT3D法、改良罗氏培养法,并针对培养阳性细菌进行药敏试验,分析不同培养方法、不同病理组织标本的阳性率,并进行比较。结果在BacT/ALERT3D法中,病理标本病灶壁培养结果阳性率45.09%显著高于脓液阳性率28.98%(χ2=16.41,P<0.05),在改良罗氏培养法中,病理标本病灶壁培养结果阳性率31.27%显著高于脓液阳性率16.24%(χ2=18.55,P<0.05),即不同病理标本培养结果均存在差异,且均以病灶壁阳性率最高(P<0.05)。结论与改良罗氏培养法相比,Bac T/ALERT3D法检出率更高,利于结核病的早期诊治,其中病灶壁标本培养阳性率更高,应用价值相对更高,值得推广应用。

3种结核分枝杆菌检测方法的比较研究

目的比较沉淀集菌法、罗氏培养法和聚合酶链反应(PCR)方法检测结核分枝杆菌的临床价值。方法收集2012年6月至2013年5月张家港市第一人民医院临床确诊且经抗结核治疗两月后结核患者的痰标本102份,用以上3种方法进行平行检查。结果 102份标本中,沉淀集菌法检测结果阳性标本92份,阳性率90.19%,罗氏培养法阳性48份,阳性率47.06%,PCR法阳性77份,阳性率75.49%。沉淀集菌法与罗氏培养法的符合率为56.86%,而PCR法与沉淀集菌法符合率为81.37%,与罗氏培养法符合率为61.76%。结论 3种方法联合运用,可弥补单独采用一种方法阳性率低的缺点,从而提高检测的准确度。

恒温扩增法快速检测结核分枝杆菌复合群的临床应用

目的比较痰涂片、罗氏培养法和恒温扩增荧光法在快速检测临床标本中结核分枝杆菌的检测效果,分析恒温扩增荧光法在临床应用中的优势。方法选取2018年1月至2019年5月期间在惠州市结核病防治研究所结核科就诊的1000名肺结核患者作为研究对象,采集足量晨痰标本,同时采用痰涂片镜检法、罗氏培养法、恒温扩增荧光法进行结核杆菌检测。采用阳性率来评价检测方法的检测效果;采用Kappa值来评价恒温扩增荧光法与罗氏培养法的检测效果一致性。结果1000例肺结核患者的痰标本进行痰涂片法、罗氏培养法、恒温扩增荧光法的检测阳性率分别为44.7%、55.4%和70.3%;对恒温扩增荧光法和罗氏培养法的检测结果进行一致性检验,Kappa值为0.592(P﹤0.01)。结论恒温扩增荧光法检测肺结核患者痰标本的阳性率明显高于传统的涂片镜检法和罗氏培养法,且恒温扩增法与临床金标准罗氏培养法的检测结果具有中等程度的一致性。恒温扩增荧光法具有阳性率高、结果客观准确、操作简便、检测耗时短、操作风险低等优点,具有良好的临床应用价值。

三种方法检测结核分枝杆菌复合群的比较分析

目的初步研究恒温扩增法(Isothermal amplification)、环介导恒温扩增法(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)、改良罗氏培养基培养法在诊断结核分枝杆菌(Mtuberculosis,Mtb)复合群的临床验证和应用,评估这三种方法检测Mtb复合群的效能。方法选取肇庆市8县区的结核病防治机构2015年1月-2016年8月1496份痰标本,取587例痰培养阳性的培养物,同时进行恒温扩增法、LAMP、改良罗氏培养法检测Mtb复合群。结果罗氏培养法Mtb复合群阳性587例,阳性率39.2%(95%CI:36.7%-41.7%),以此作金标准。恒温扩增法检测Mtb复合群阳性570例,阳性率38.1%(95%CI:35.6%-40.6%),其灵敏度93.1%(95%CI:90.8%-95.1%),特异度97.4%(95%CI:96.2%-98.4%),阳性预期值95.9%(95%CI:94.0%-97.4%),阴性预期值95.6%(95%CI:94.1%-96.9%);LAMP检测Mtb复合群阳性578例,阳性率38.6%(95%CI:36.1%-41.2%),灵敏度93.1%(95%CI:90.8%-95.1%),特异度96.5%(95%CI:95.2%-97.7%),阳性预期值94.6%(95%CI:92.5%-96.3%),阴性预期值95.6%(95%CI:94.1%-96.9%)。结论改良罗氏培养基培养法诊断Mtb复合群具有高度的准确度和特异性,恒温扩增法和LAMP具有等同效能,而LAMP实操比更优,更适合基层结核病实验室应用。

3种检测方法在HIV合并结核分枝杆菌感染诊断中的对比研究

目的对比3种检测方法在HIV合并结核分枝杆菌感染中的诊断价值,以期找到最优的检测方法或检测方法组合。方法收集2013年1月至2015年12月确诊为HIV合并结核分枝杆菌感染患者的各类标本115份。每例患者均用相同类型的标本进行直接涂片抗酸染色镜检、罗氏培养和实时荧光定性PCR法检测。结果以任意1种标本检出阳性计算阳性率,115例HIV合并结核分枝杆菌感染患者的标本直接涂片抗酸染色法与罗氏培养法检测的阳性率比较,差异有统计学意义(χ~2=19.865,P=0.001);直接涂片抗酸染色法与实时荧光定性PCR法检测的阳性率比较,差异有统计学意义(χ~2=0.028,P=0.001);罗氏培养法与实时荧光定性PCR法检测的阳性率比较,差异无统计学意义(χ~2=21.261,P=0.868)。应用罗氏培养法来检测脓液、粪便和尿液,其检出率都达到了100.0%。实时荧光定性PCR法检测脑脊液、胸腔积液及腹水等含菌量较少的标本,检出率达到100.0%。罗氏培养法与实时荧光定性PCR法在检测痰液标本时检出率也较高(>80.0%)。而从标本类型上来看,脓液标本3种方法均全部检出结核分枝杆菌,粪便和尿液标本用培养的方法检测结核分枝杆菌阳性率均为100.0%。支气管肺泡灌洗液的检出率也较高,均大于70.0%。结论实时荧光定性PCR在检测低排菌量标本如脑脊液、胸腔积液及腹水时具有明显优势;脓液标本3种方法均全部检出结核分枝杆菌,粪便和尿液标本用培养的方法均能100.0%检测出结核分枝杆菌。