高效液相色谱法制备罗汉果甜甙Ⅴ标准品

为深入研究罗汉果中功能成分的药理药效,进一步开发罗汉果中的有效成分,将罗汉果鲜果的水提物以AB 8吸附树脂分离、D 280离子交换树脂脱色后,利用半制备高效液相色谱法得到三萜皂甙类化合物罗汉果甜甙Ⅴ标准品,纯度达98 5%。色谱柱为AlltechEconosphereNH2柱;流动相为乙腈 水(体积比为68∶32)溶液,流速5mL/min;检测波长203nm;柱温40℃。此方法具有操作简便、重现性好、产品纯度高等优点。

罗汉果甜甙对小鼠细胞免疫功能的调节作用

目的:观察罗汉果甜甙对小鼠细胞免疫功能的调节作用。方法:用罗汉果甜甙给正常和环磷酰胺(CTX)抑制小鼠灌胃,检测小鼠巨噬细胞吞噬功能和T细胞的增殖作用。结果:显示罗汉果甜甙对正常小鼠免疫功能无明显作用,但能显著提高CTX免疫抑制小鼠的巨噬细胞吞噬功能和T细胞的增殖作用。结论:罗汉果甜甙对CTX免疫抑制小鼠的细胞免疫功能具有一定的正调节作用。

固相萃取-高效液相色谱法快速测定罗汉果甜甙V的含量

建立一个快速、简单、准确的固相萃取预处理高效液相色谱法测定罗汉果甜甙V含量的方法。样品经C18固相萃取管(200mg/3mL)纯化后以高效液相色谱检测。色谱柱为NH2P-50,流动相为V(乙腈)∶V(水)=85∶15,流速为1mL/min,检测波长为210nm。标准曲线自0.025g/L～1.000g/L呈线形关系(r2=0.9993)。研究表明:固相萃取法能很好的纯化罗汉果甜甙Ⅴ,回收率高达98.80%,RSD为0.52%。此法样品处理简单,溶剂消耗少,费用减少,分析结果重现性好,适于推广应用。

闪提技术提取罗汉果甜甙

通过比较超声法、微波法及闪提法提取罗汉果甜甙的效率,发现闪提法具有较好的提取效果。通过正交试验优选得到罗汉果甜甙的最佳闪提条件为:料液比1∶20、转速6000 r/min、常温下提取4 min。最佳条件下甜甙提取率为10.057%,说明闪式提取技术是一种高效和低成本的提取方法。

罗汉果甜甙加工废液发酵乙醇的研究

罗汉果甜甙生产中排放的柱流液废水中含有大量的糖类及其它成分,采用罗汉果甜甙加工废液实施乙醇发酵的研究。结果表明在发酵温度30℃,糖化酶添加量为0.10 g/50 mL,pH为5.5,发酵时间72 h的条件下,乙醇得率达28.69%。

罗汉果浓缩汁及罗汉果甜甙防龋性实验研究

主要研究罗汉果浓缩汁及罗汉果甜甙对变形链球菌生长、产酸、粘附的影响,并与蔗糖、果糖、葡萄糖和木糖醇进行比较,探讨其作为天然高倍甜味剂的防龋效果。结果表明:变形链球菌在含罗汉果浓缩汁培养液中的生长速度和粘附性均显著低于蔗糖(P<0.05),但产酸性较高;在含罗汉果甜甙的培养液中几乎不生长繁殖,与木糖醇差异不显著(P>0.05)。研究结果表明:罗汉果浓缩汁是一种低致龋性蔗糖替代品,尤其是罗汉果甜甙,可作为保健型高倍甜味剂而广泛应用。

紫外分光光度法在罗汉果甜甙V产品质量控制中的应用

采用紫外分光光度法对罗汉甜牌降糖颗粒产品进行质量控制。通过对降糖颗粒中各种基质成分进行紫外扫描,确定在λ=203nm处,除罗汉果甜甙V外其他组分不对测定构成干扰,样品测定实验结果表明罗汉果甜甙V在5~200μg/mL范围内线性关系良好？R2=0.9994？,平均回收率为99.4%,RSD为0.52%（n=6）。该方法较高效液相色谱法（HPLC）经济节约、简便易操作、快速准确,可作为罗汉果甜甙V产品质量控制的手段。

微波技术在鲜罗汉果甜甙提取中的应用

采用正交试验法考察了微波技术提取罗汉果甜甙工艺中罗汉果投料物液比、微波输出功率、提取时间对提取效率的影响 ,优选出微波提取的最佳方案。以此方案为实验组 ,以常规水煮法为对照组 ,进行平行实验。结果证明 :微波提取罗汉果甜甙的效率明显优于常规水煮法。是一种省时、省能、操作简便的新的提取方法。

高效液相色谱法测定罗汉果甜甙中甜蜜素

采用高效液相色谱法测定了罗汉果甜甙中的甜蜜素。将样品溶于水后,用Carrez试剂沉淀其中的杂质,离心,用次氯酸钠将样品溶液中的甜蜜素转化为N,N-二氯环己胺经正己烷萃取后测定。采用EclipseXDB-C18不锈钢柱分离,以乙腈-水(85+15)作流动相,二极管阵列检测器检测波长为314nm。结果显示,甜蜜素在样品溶液浓度为0.1mg/L^2mg/L范围内呈良好的线性关系,回收率为89.9%~94.7%,检出限为5mg/kg,测定结果的相对标准偏差小于5%。方法操作简便,结果准确可靠。

一种罗汉果甜甙提取工艺的研究

创建了一种用膜分离技术从罗汉果中提取甜甙的新方法。其方法采用多种不同的膜件与传统的工艺技术有机结合,从罗汉果中提取甜甙,用多种不同的膜对罗汉果浸出液进行分离、提取和浓缩。分离、提取和浓缩一次完成,产品收率高,无污染,设备简单,投资少。

不同生长周期的罗汉果鲜果中甜甙V和总黄酮含量变化规律研究

通过使用HPLC法对不同生长周期的罗汉果鲜果中罗汉果甜甙V和总黄酮的含量进行测定,总结出罗汉果中罗汉果甜甙V和总黄酮含量的变化规律,并对二者进行比较研究,结果表明坐果50d后,罗汉果甜甙Ⅴ的增加比较快,80d后,罗汉果甜甙Ⅴ的含量趋于稳定;随着生长周期的增加,罗汉果总黄酮的含量增加,40～50d中增长最快,坐果约50d后达到最高值,从60d开始总黄酮的含量迅速下降到20d水平,然后趋于稳定。

罗汉果甜甙V在各部位的含量分布

以鲜罗汉果为原材料,将果皮、果囊和种子分离后,分别真空干燥得到罗汉果果皮、果囊和种子的质量百分数分别为25.42%～32.45%、30.00%～43.89%和29.29%～37.56%,再各取适量在微波辐射条件下,以水为溶剂提取罗汉果水溶物,经浓缩干燥,得到各部位水提物,将各提取物用无水乙醇回流后,利用分析型高效液相色谱法测定,得出干燥的罗汉果中果皮、果囊和种子中甜甙Ⅴ的含量在各部位的百分含量分别为0.26%、2.36%和0.06%。

罗汉果浓缩汁及罗汉果甜甙对小鼠血脂代谢的影响

为了研究罗汉果浓缩汁及罗汉果甜甙对小鼠血脂代谢的影响,利用高脂饲料饲喂ICR小鼠建立高血脂动物模型。饲养60d后,测定各组小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)及高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)含量。结果表明,罗汉果浓缩汁组及罗汉果甜甙组小鼠血清平均TC含量分别为98.14mg/dL和86.07mg/dL,分别比高脂模型组降低了17.3%和27.5%,效果显著(P<0.05);TG含量分别为153.54mg/dL和118.98mg/dL,分别降低了28.4%和44.5%,显著低于高脂模型组(P<0.05);HDL-C平均含量分别为73.89mg/dL和70.01mg/dL,分别升高了34.4%和27.3%,达到显著水平(P<0.05)。因此罗汉果浓缩汁及罗汉果甜甙均有正向调节机体血脂代谢的生理功能。

罗汉果水提取物及其甜甙的体内抗氧化作用

利用高脂饲料饲喂ICR小鼠建立高脂模型,测定并比较了试验组与模型对照组及正常对照组的血清谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量,探讨了罗汉果水提取物及其甜甙的体内抗氧化作用。试验结果表明,罗汉果水提取物及罗汉果甜甙均显著提高高脂模型小鼠的血清GSH-Px和SOD的活性(P<0.05),明显降低血清MDA的含量(P<0.05),罗汉果水提取物及罗汉果甜甙均具有强抗氧化作用。同时,罗汉果水提取物与罗汉果甜甙在提高小鼠体内抗氧化作用方面效果差异不显著(P>0.05)。

罗汉果甜甙对雄性小鼠的遗传毒性研究

目的探讨罗汉果甜甙对成年雄性小鼠的遗传毒性。方法采用小鼠急毒试验、小鼠精子畸形试验、小鼠骨髓微核试验及生殖、淋巴器官重量指数分析方法。结果罗汉果甜甙对小鼠经口最大耐受剂量为15g/kg。微核试验与精子畸形试验的小鼠均分6组,即罗汉果甜甙0.25g/kg、0.5g/kg、1g/kg、5g/kg 4个剂量组与阴、阳性对照组。其中灌胃剂量为0.25g/kg、0.5g/kg、1g/kg时,均未诱发各组的精子畸形率、骨髓微核率增高,与阴性对照组相比均无显著差异(P>0.05);当剂量达到5g/kg时诱发的精子畸形率、骨髓微核率均略高于阴性对照组但有显著性差异(P<0.05)。灌胃罗汉果甜甙各剂量组小鼠的生殖与淋巴器官重量指数与阴性对照组相比无显著变化(P>0.05)。结论经口最大给药剂量为15g/kg,属于无毒级。罗汉果甜甙以0.25g/kg,0.5g/kg及1g/kg的剂量灌胃小鼠无生殖与遗传毒性。当灌胃剂量达到5g/kg时,则对雄性小鼠有轻微的潜在遗传毒性。

罗汉果甜甙分离提取新工艺的研究

目的:为提高罗汉果甜甙生产效率和产品的质量(纯度),利用闪式提取法改进传统超声波法和微波法提取罗汉果甜甙的生产工艺。方法:通过正交试验优选罗汉果甜甙最佳分离提取工艺,并利用高效液相(HPLC)检测方法,检定纯化后的甜甙样品纯度。结果:最佳闪式提取条件:物料加18倍量水,温度40℃,提取时间7 min甜甙最佳提取率为8.77%;获得的罗汉果甜甙的纯度为92%以上。结论:建立了高效生产罗汉果甜甙的新工艺。

HPLC法测定不同生长期罗汉果甙ⅡE,Ⅲ,Ⅴ的含量

采用HPLC法测定同一产地不同生长期罗汉果中罗汉果甙ⅡE、Ⅲ、Ⅴ的含量。结果表明,在生长初期罗汉果中主要含具有苦味的甙Ⅱ及无味的甙Ⅲ,随着生长期的增加,苦味甙ⅡE、无味甙III含量逐渐减少,甜甙Ⅴ在50d时开始出现,并随生长期增加,到80d后含量达到最高。

功能型甜味植物—罗汉果的开发与应用

介绍了将功能型甜味植物罗汉果用于新型天然甜味剂罗汉果浓缩汁和罗汉果甜甙的研究开发现状及其在食品等领域的应用。

不同生长期罗汉果蛋白组图谱比较研究

目的:分析、比较30d和60d两个不同时期罗汉果蛋白质组图谱,寻找与罗汉果发育、成熟及罗汉果甜甙生成密切相关基因,为罗汉果的开发和品种改良提供基础。方法:采用双向电泳(2-DE)技术构建30d和60d罗汉果蛋白质组图谱,应用Im-ageMaster 2D图像分析软件对所得蛋白质组图谱进行分析。结果:30d和60d两个不同时期罗汉果蛋白质组图谱有明显差别,与30d罗汉果蛋白组图谱比较,随果实发育、成熟,60d罗汉果有29个新的蛋白产生,30个蛋白消失,16个蛋白表达3倍升高和15个蛋白表达50%下调。结论:罗汉果生长、发育和成熟的不同阶段受特定基因的表达调控。

鲜罗汉果素的稳定性研究

鲜罗汉果素是一种天然甜味剂,其主要甜味成分为罗汉果甜甙。本文用高温、沸水、酸、碱、紫外等条件对其进行处理,通过测定罗汉果总甙含量、甜甙V含量、甜度、吸光度的变化,检验鲜罗汉果素的稳定性,为罗汉果素在食品工业和药品工业的广泛应用提供了参考数据。实验结果表明,罗汉果素是一种对一般高温、一般酸、碱度和紫外环境都相当稳定的高甜度的天然甜味剂。