利用罗非鱼下脚料提取鱼油的工艺研究

以鱼油的提取率为指标,研究从罗非鱼下脚料提取鱼油的工艺。结果表明:酶解底物80℃加热30min;利用中性蛋白酶进行酶解的工艺条件为:液固比1:1、酶添加量1%、酶解温度30℃和酶解时间20min,鱼油的提取率达11.9%,酸值和过氧化值分别为2.21mg/g和2.93mmol/kg,达到了比较好的效果。罗非鱼鱼油中脂肪酸组成主要是饱和脂肪酸和单不饱和脂肪酸,其含量分别为30.6%和37.6%,多不饱和脂肪酸主要是亚油酸,其含量为17.9%,而EPA和DHA的含量较低,总含量仅为1%。

乳酸菌利用罗非鱼下脚料水解液发酵L-乳酸的探讨

以罗非鱼(Oreochromis spp.)下脚料为原料,采用高温热水抽提法提取其蛋白质作为乳酸菌发酵L-乳酸的氮源。以酵母膏作为对照,探讨了保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)、嗜热链球菌(Streptococcus thermophi-lus)和鼠李糖乳杆菌(L.rhamnosus)在罗非鱼下脚料水解液培养基中的生长情况及L-乳酸的产量。结果显示,3种乳酸菌在2种培养基中均能良好地生长,pH下降明显;L-乳酸产量随乳酸菌菌种不同而异,其中鼠李糖乳杆菌在罗非鱼下脚料水解液培养基中发酵10 h后,L-乳酸净产量为3.38 g.L-1,与以酵母膏作为氮源的产酸水平相当。可见罗非鱼下脚料水解液可以替代酵母膏作为L-乳酸发酵的一种低成本氮源。

碱性蛋白酶酶解罗非鱼下脚料蛋白动力学研究

以加工罗非鱼片废弃的下脚料蛋白和碱性蛋白酶为原料,以水解度为指标,考察温度、底物质量浓度、酶用量及pH等因素对碱性蛋白酶酶解罗非鱼下脚料蛋白水解度的影响。得到碱性蛋白酶水解罗非鱼下脚料蛋白的适宜工艺条件为:酶解温度50℃、底物质量浓度20g/L、酶用量为0.067g/L、pH9.50、反应时间180min,此时水解度为22.00%。同时得到50℃条件下酶失活常数Kd为37.9min-1,反应速率常数K2为244.2min-1、米氏常数KM为29.27g/L、最大反应速度Vmax为28.41g/(min.L);并建立了相应的水解动力学模型。验证实验表明:建立的水解动力学模型与实际水解过程基本吻合。

氨肽酶对罗非鱼下脚料水解液脱苦的研究

为了更好地利用罗非鱼下脚料制备呈味肽,研究了罗非鱼下脚料水解液脱苦的酶解工艺。利用巨大芽孢杆菌L-19发酵制备得到活性为1.06×104U/mg的氨肽酶粉剂,以罗非鱼下脚料经中性蛋白酶所得的呈味肽为氨肽酶酶解底物,经酶解试验确定,最适的p H、温度、酶用量和时间分别为:p H8.5、60℃、6.0×104U/g和10 h。在最适的条件下,呈味肽溶液的游离氨基酸增量为5 607.71 mg/L,疏水氨基酸的增加量占63.63%,苦味基本消失,表明氨肽酶具有良好的水解能力和脱苦能力。

罗非鱼下脚料酶解工艺的响应面法优化

采用AS.1398中性蛋白酶对罗非鱼下脚料进行水解,利用响应曲面分析法对酶解工艺条件进行优化,最终确定AS.1398中性蛋白酶水解罗非鱼下脚料的最佳条件为:酶浓度=0.56%,温度=53℃,pH=7.1,水解时间t=4h,液固比为3∶1,此时水解度为36.2%。

木瓜蛋白酶对罗非鱼下脚料的水解作用

试验结果表明,木瓜蛋白酶水解罗非鱼下脚料蛋白的适宜条件为:底物浓度1∶1.5,温度60℃,加酶量1100 IU/g原料,初始pH,酶解3 h;最佳水解条件下的酶解液氨基态氮含量达1.25 g/L,蛋白质含量5.19%,氮回收率为69.88%。酶活力下降是酶解反应减缓的主要原因之一。

罗非鱼下脚料蛋白合成类蛋白反应的工艺优化

以罗非鱼下脚料为原料,采用Alcalase蛋白酶对其进行控制酶解,制备不同水解度的罗非鱼下脚料酶解蛋白,在此基础上添加胃蛋白酶对其进行合成类蛋白反应的研究。以类蛋白产率为指标,在反应温度恒定(37℃)的条件下,通过单因素实验,确定底物水解度为40%、反应时间24h,选取底物浓度、加酶量和pH值3个因素进行响应面实验,通过响应面分析法优化合成类蛋白反应的最佳工艺组合为:底物浓度44.16%,加酶量4.12%,pH值5.08;在此条件下,类蛋白产率达到(10.08±0.03)%,与响应面二次模型预测值(10.11%)无显著差异。

罗非鱼下脚料营养成分的分析及评价

通过测定罗非鱼下脚料的各组分营养成分,对罗非鱼下脚料进行营养分析与评价。结果表明,罗非鱼下脚料占整鱼质量的56.3%,其中水分、粗蛋白、粗脂肪、碳水化合物和粗灰分的含量分别为60.5%、18.4%、10.6%、0.9%、8.8%;罗非鱼下脚料中氨基酸含量达26.38%(干重),其中,必需氨基酸占总氨基酸的比例(WEAA/WTAA)为36%,呈味氨基酸占总氨基酸的比例(WFAA/WTAA)为45%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比例(WEAA/WNEAA)为55%,必需氨基酸指数(EAAI)为83.16,生物价(BV)为78.95,表明罗非鱼下脚料中的必需氨基酸的构成比例符合FAO/WHO的标准;罗非鱼下脚料不饱和脂肪酸(UFA)占脂肪酸总量的50.8%;矿物质元素中钙含量最高,达43600 mg/kg。因此,罗非鱼下脚料是一种富含蛋白质、脂肪酸和矿物质元素的水产生物资源,有待进一步开发利用。

酶法水解对罗非鱼下脚料蛋白功能特性的影响

以罗非鱼下脚料为原料,采用Alcalase蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶对其进行控制酶解,通过pH-stat法控制水解程度,制备不同水解度(1.0%～15.0%)的罗非鱼下脚料酶解蛋白,探讨酶的种类和水解度对其乳化性和发泡性的影响。结果表明:在水解度较低(3.0%～5.0%)时,酶解蛋白的乳化性和发泡性较好,随着水解度进一步增大,酶解蛋白的乳化性和发泡性均降低;比较而言,由中性蛋白酶水解得到的酶解蛋白乳化性较好,而风味蛋白酶水解得到的酶解蛋白发泡性较好;此外,pH值(2～10)对轻度酶解蛋白的乳化性和发泡性影响较大,在pH 4.0～5.0范围内,酶解蛋白的乳化性和发泡性最差。

微孔膜过滤罗非鱼下脚料蛋白酶解液的效果研究

先后用0.45μm和0.22μm的微孔膜过滤罗非鱼下脚料木瓜蛋白酶酶解液,分别比较了酶解液和两种过滤液的各项指标及其热稳定。结果表明,微孔过滤有助于酶解液的澄清、脱腥和热稳定性,其效果随着孔径的减小而增强;微孔过滤使蛋白质、可溶性固形物含量略有降低,0.45μm与0.22μm过滤液的蛋白质含量分别减少3.12%和10.42%;微孔过滤对酶解液的水分、灰分、氨基态氮、三氯乙酸可溶解性蛋白含量及pH基本没有影响。

罗非鱼下脚料分离蛋白的制备及其性质研究

采用酸碱法(pH-shifting)提取罗非鱼下脚料蛋白,主要探讨提取的pH对提取蛋白的得率、分离蛋白的基本成分、溶解性、乳化性和分子量分布的影响。结果表明:在料液比1∶9(g/g)、pH 2.0、pH 3.0以及pH 12.0、pH 13.0条件下溶解,pH 5.5条件下沉淀,提取蛋白得率达52%以上。冷冻干燥制备罗非鱼下脚料分离蛋白粉,其蛋白含量高于85%(干基)。功能特性的研究显示,在pH12.0条件下提取的分离蛋白功能特性最好,其溶解度和乳化活性指数分别为60.80%和42.07 m2/g。SDS-PAGE电泳分析显示,不同pH条件下提取的罗非鱼下脚料蛋白的分子量分布差别不大,主要显示分子量为200 ku和44.3 ku的蛋白条带,分别是肌原纤维蛋白组分中的肌球蛋白和肌动蛋白,另有部分蛋白条带在14.30 ku,属于小分子的肌浆蛋白。

罗非鱼下脚料复合酶水解物锌螯合盐的制备

以罗非鱼下脚料为原料,通过正交试验优化中性蛋白酶与风味蛋白酶的复合酶解条件,并对酶解液进行超滤,比较不同超滤组分的螯合效果,利用紫外吸收和傅立叶红外扫描对螯合盐进行了鉴定。结果表明:复合酶水解条件为温度55℃、加酶量1500U/g、复合比1∶2、固液比1∶4、自然pH值;水解度为14.43%酶解液的螯合率为77.92%,其超滤组分中,10KDa以下组分的螯合效果最好,螯合率达到89.36%,1KDa以下组分的螯合率较低为61.45%。

二次回归正交旋转组合优化罗非鱼下脚料酶解液螯合锌的工艺条件

以罗非鱼下脚料酶解液为原料,在单因素的基础上,用二次回归正交旋转组合方法优化其与硫酸锌的螯合条件,结果显示,在配位比2.70∶1、温度71.3℃、时间15min、pH6.86条件下,酶解液与硫酸锌的螯合率可达到87.56%。各个因素对螯合率影响大小的顺序是:配位比>pH>温度>时间。

不同方法纯化的尼罗罗非鱼下脚料蛋白酶解物锌螯合盐的理化特性

研究罗非鱼下脚料蛋白酶解物锌螯合盐(CH-0)及乙醇纯化(CH-Ⅰ)与透析纯化组分(CH-Ⅱ)的理化特性及体外自由基的清除能力,为多肽螯合盐的纯化研究提供理论基础。结果表明,CH-0的蛋白质含量(干基计)为71.86%,CH-Ⅰ和CH-Ⅱ分别为75.94%与78.83%;CH-0的锌含量为16.08%,CH-Ⅰ和CH-Ⅱ分别为14.49%与12.20%;凝胶层析结果显示,CH-Ⅰ、CH-Ⅱ与CH-0相比,有3个相同的主吸收峰,且大分子与小分子杂峰减少;氨基酸分析结果表明CH-Ⅱ中的Asp、Glu、Gly、Lys、Arg和His的含量均高于CH-Ⅰ,且都高于CH-0,与透析纯化相比,乙醇纯化必需氨基酸与支链氨基酸损失较大;CH-0、CH-Ⅰ和CH-Ⅱ对羟基自由基与DPPH自由基的清除率随浓度增强而增强,以IC50值计,CH-Ⅰ、CH-Ⅱ比CH-0的清除能力分别提高了8.92%、24.01%与38.06%、46.13%。罗非鱼下脚料,蛋白酶解物(EH10K)有较好的超氧阴离子自由基清除能力,浓度为10.00 mg/m L时清除率为69.27%,而CH-0、CH-Ⅰ与CH-Ⅱ则显示了负清除作用。纯化方法对罗非鱼下脚料蛋白酶解物锌螯合盐的理化特性有影响。

罗非鱼下脚料酶解液特定腐败菌的分离和鉴定

采用PCR-DGGE和PCR-RFLP技术研究了罗非鱼下脚料酶解液冷藏过程中的特定腐败菌。结果表明：酶解液在冷藏条件下,在20 d左右腐败,细菌总数在0~12 d里逐渐增加（8.71×102~8.13×107cfu/g）,12 d之后趋向稳定。16S r RNA的PCR-RFLP及序列比对分析结果显示,随机挑取的18株细菌分成三个分型,其中分型1占61%,与Genbank核酸数据库的假单胞菌（Pseudomonas sp.）有最大相似性;PCR-DGGE图谱显示酶解液的细菌菌相随时间的延长而逐渐减少,腐败终点菌相单一。DGGE主要条带测序结果表明,酶解液存在三个类群的细菌,分别是假单胞菌属、气单胞菌属（Aeromonas）和不动杆菌属（Acinetobacter）,其中在酶解液腐败终点,荧光假单胞菌（Pseudomonas fluorescens）占绝对优势,与RFLP结果相符。

罗非鱼下脚料酶解制备呈味肽的研究

为了更好地综合利用罗非鱼下脚料,研究了罗非鱼下脚料制备呈味肽的酶解工艺。采用碱性蛋白酶对罗非鱼下脚料进行酶解,确定酶解的最佳条件:温度55℃,pH 7.5,液固比3∶1,加酶量800U/g和酶解时间5h。在最佳条件下,短肽得率达到24.6%。

超滤对罗非鱼下脚料蛋白水解液分离特性的影响

通过对罗非鱼下脚料蛋白水解液经超滤处理,去除杂质和大分子物质,通过葡聚糖凝胶柱层析法测定其分子量,研究了超滤对水解液分离特性的影响。结果表明:超滤处理有效地截留原酶解液中的起浑物质起到了澄清作用,可以在透过液中保留原酶解液的鲜味和甜味,有效去除了腥味。超滤后的酶解产物中含有多肽混合物,其中58.30%的多肽分子量大于4 467,27.0%的多肽分子量介于759～4 467之间,小于759的肽占14.71%。表明超滤后的肽的分子量基本上是小于6 000的。酶解液中蛋白肽的分子量控制在6 000以下,有利于人体对多肽的消化吸收。

利用罗非鱼下脚料提取鱼油的工艺研究

本研究以鱼油的提取率为指标，研究从罗非鱼下脚料提取鱼油的工艺。结果表明：在液固比1：1的条件下，对酶解底物先在80℃加热30min，冷却后添加1％的中性蛋白酶，在30℃下酶解20min，经离心萃取分离后，鱼油的提取率为11．9％，酸值和过氧化值分别为2．21mg／g和2．93mmol／L，达到了比较好的效果。

罗非鱼下脚料蛋白水解液制备锌蛋白盐的研究

以罗非鱼下脚料蛋白水解液为原料,经过超滤处理后,对锌蛋白盐的合成工艺条件进行了初步探讨。结果显示最佳螯合条件为:pH6.0,80℃,14min,配位比为1.5:1,ZnSO4为锌源,此条件下,锌的螯合率为68.12%。并采用红外光谱对锌蛋白盐进行定性分析,结果显示,氨基的特征吸收峰发生了红移,初步证实了螯合物的存在。

罗非鱼下脚料酸法水解工艺的优化研究

以罗非鱼下脚料为原料,酸法水解罗非鱼下脚料蛋白质。以水解度为指标,通过盐酸、柠檬酸、乳酸的单因素试验,确定选用盐酸进行正交试验,得出罗非鱼下脚料蛋白质酸水解的最佳条件为:盐酸用量5.5%,温度95℃,水解时间9h,料液比1:3,罗非鱼下脚料蛋白质水解度达到66.47%。