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运用cDNA-AFLP技术初步鉴定两种方法合成的cDNA的指纹图谱
被引量:
3
1
作者
史胜青
张守攻
+2 位作者
李春秀
汪阳东
齐力旺
《分子植物育种》
CAS
CSCD
2006年第1期79-82,共4页
在植物基因克隆以及构建cDNA文库时,都需要合成高质量的双链cDNA,并要达到一定的数量。然而研究者经常受到试验样品量的限制。特别是比较稀少的植物材料,例如植物的根尖、茎尖或花的雌、雄蕊等,难以获得足够的RNA,以致影响cDNA的合成量...
在植物基因克隆以及构建cDNA文库时,都需要合成高质量的双链cDNA,并要达到一定的数量。然而研究者经常受到试验样品量的限制。特别是比较稀少的植物材料,例如植物的根尖、茎尖或花的雌、雄蕊等,难以获得足够的RNA,以致影响cDNA的合成量,无法开展下游的实验。以PCR为基础合成第二链cD-NA的Smart技术(LD-PCR),能够以50ng的总RNA为反转录模板合成高质量的双链cDNA。但研究者对第二链采用PCR方法是否有些基因信息丢失或丰度上发生很大的变化存有疑虑。针对以上存在的问题,通过置换合成和长距离PCR(LD-PCR)两种方法合成3个月的梭梭幼苗茎尖双链cDNA,EcoRI和MseI限制性内切酶双酶切后,用16对选择性扩增引物对两种cDNA进行cDNA-AFLP的指纹图谱分析。结果表明,置换合成和LD-PCR两种方法合成的cDNA指纹图谱中,分别有条带约495条和470条。其中,相同的条带共计433条,不同的条带分别有62条和37条,分别为各自合成方法总指纹数的12.5%和7.87%,相同的指纹信息达87%以上。这说明两种方法合成的cDNA存在着较大的差异,合成方法对cDNA合成质量的影响较大,为研究人员选用何种cDNA合成方法提供了借鉴。
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关键词
梭梭(Haloxylon
Ammodendron)
置换合成法
LD-PCR
法
CDNA-AFLP
下载PDF
职称材料
Ti_3SiC_2及Ti_3SiC_2基复合材料的研究现状及发展
被引量:
5
2
作者
周晓龙
陈敬超
+2 位作者
曹建春
杜焰
甘国友
《昆明理工大学学报(理工版)》
2003年第3期18-21,共4页
介绍了Ti3SiC2陶瓷材料的微观结构与性能, 认为该材料良好的综合性能有望解决陶瓷材料的脆性问题. 并概述了Ti3SiC2 及Ti3SiC2基复合材料各种制备方法的特点和研究状况、应用前景和发展趋势.
关键词
Ti3SiC2陶瓷材料
微观结构
机械性能
物理性能
碳硅钛三元化合物
脆性
六方晶系
复合材料
制备方
法
CVD
法
压制烧结
法
自蔓延
法
多步骤
合成
工艺
法
电弧熔化
法
热压成型
法
固态
置换
原位反应
合成
法
下载PDF
职称材料
题名
运用cDNA-AFLP技术初步鉴定两种方法合成的cDNA的指纹图谱
被引量:
3
1
作者
史胜青
张守攻
李春秀
汪阳东
齐力旺
机构
中国林业科学研究院林研所细胞生物学实验室
出处
《分子植物育种》
CAS
CSCD
2006年第1期79-82,共4页
基金
国家973项目(G1999016003)
国家转基因与产业化专项(J2002-B-005)与(JY03-B-28-02)
国家高技术研究发展(863)计划(2003AA244020)资助.
文摘
在植物基因克隆以及构建cDNA文库时,都需要合成高质量的双链cDNA,并要达到一定的数量。然而研究者经常受到试验样品量的限制。特别是比较稀少的植物材料,例如植物的根尖、茎尖或花的雌、雄蕊等,难以获得足够的RNA,以致影响cDNA的合成量,无法开展下游的实验。以PCR为基础合成第二链cD-NA的Smart技术(LD-PCR),能够以50ng的总RNA为反转录模板合成高质量的双链cDNA。但研究者对第二链采用PCR方法是否有些基因信息丢失或丰度上发生很大的变化存有疑虑。针对以上存在的问题,通过置换合成和长距离PCR(LD-PCR)两种方法合成3个月的梭梭幼苗茎尖双链cDNA,EcoRI和MseI限制性内切酶双酶切后,用16对选择性扩增引物对两种cDNA进行cDNA-AFLP的指纹图谱分析。结果表明,置换合成和LD-PCR两种方法合成的cDNA指纹图谱中,分别有条带约495条和470条。其中,相同的条带共计433条,不同的条带分别有62条和37条,分别为各自合成方法总指纹数的12.5%和7.87%,相同的指纹信息达87%以上。这说明两种方法合成的cDNA存在着较大的差异,合成方法对cDNA合成质量的影响较大,为研究人员选用何种cDNA合成方法提供了借鉴。
关键词
梭梭(Haloxylon
Ammodendron)
置换合成法
LD-PCR
法
CDNA-AFLP
Keywords
Haloxylon A mmodendron, Replacement synthesis method, LD-PCR, cDNA-AFLP
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
下载PDF
职称材料
题名
Ti_3SiC_2及Ti_3SiC_2基复合材料的研究现状及发展
被引量:
5
2
作者
周晓龙
陈敬超
曹建春
杜焰
甘国友
机构
昆明理工大学材料与冶金工程学院
出处
《昆明理工大学学报(理工版)》
2003年第3期18-21,共4页
基金
云南省自然科学基金(项目编号: 98E043M).
文摘
介绍了Ti3SiC2陶瓷材料的微观结构与性能, 认为该材料良好的综合性能有望解决陶瓷材料的脆性问题. 并概述了Ti3SiC2 及Ti3SiC2基复合材料各种制备方法的特点和研究状况、应用前景和发展趋势.
关键词
Ti3SiC2陶瓷材料
微观结构
机械性能
物理性能
碳硅钛三元化合物
脆性
六方晶系
复合材料
制备方
法
CVD
法
压制烧结
法
自蔓延
法
多步骤
合成
工艺
法
电弧熔化
法
热压成型
法
固态
置换
原位反应
合成
法
Keywords
ceramics
Ti3SiC2
properties
fabrication
分类号
TB321 [一般工业技术—材料科学与工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
运用cDNA-AFLP技术初步鉴定两种方法合成的cDNA的指纹图谱
史胜青
张守攻
李春秀
汪阳东
齐力旺
《分子植物育种》
CAS
CSCD
2006
3
下载PDF
职称材料
2
Ti_3SiC_2及Ti_3SiC_2基复合材料的研究现状及发展
周晓龙
陈敬超
曹建春
杜焰
甘国友
《昆明理工大学学报(理工版)》
2003
5
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
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