置换色谱及其在生物分子分离纯化中的研究进展

介绍了置换色谱及其实验条件 。

双钯柱自置换色谱法浓缩氘的实验研究

采用双钯柱自置换色谱法建立了1套氘浓缩实验装置。研究并讨论了该装置对氘的富集效果。实验结果表明:氘丰度为2.0%和5.0%的样品经富集后,最大氘丰度分别达到31.6%和67.3%。该装置结构简单、操作方便,适宜对低氘丰度的氢同位素气体进行有效富集。

用于氢同位素分离的置换色谱分离材料的研究进展

置换色谱法是一种较有优势的氢同位素分离方法,而分离材料的性能是决定置换色谱法分离效果的一个关键因素。目前研究的置换色谱分离材料包括钯材料和很多非钯材料。钯虽然价格昂贵,但由于其出色的分离性能而难以用廉价金属或合金来替代。本文简要介绍了置换色谱法分离氢同位素的原理,重点介绍了几种置换色谱含钯分离材料(纯钯、载钯硅藻土、载钯氧化铝、钯铂合金等)的性能,初步分析了置换色谱分离材料的发展方向。

置换色谱法分离纯化大豆磷脂的研究

采用置换色谱法分离纯化了大豆磷脂,研究表明:以二氯甲烷-甲醇为流动相、置换剂选择10%乙醇胺、流速0.5 mL/min、上样量为110 mg,在此置换条件下,获得的PE、PC、PI含量可进一步富集,分别为从52.9%、8.7%、30%增长至78.8%、45.3%、84%,其回收率分别为48.4%、81.6%、65.9%。

基于氨基酸的新型树枝状色谱置换剂的合成及性能

高效置换剂的设计与合成一直是置换色谱发展的重要方向。采用固相合成方法合成了新型树枝状聚电解质置换剂Phe-D和Leu-D,并与置换剂BAEE进行了对比研究。研究结果显示,置换剂的动态亲和性随着lgΔ值增大而降低。在lgΔ<0.845时,BAEE具有最高的动态亲和力;而随着lgΔ进一步升高,Phe-D展现出最强的动态亲和力,这种趋势一直维持至lgΔ值达到3.08。蛋白质的静态置换实验表明,新型置换剂对蛋白质具有更高的置换百分率。这种高置换率主要源于置换剂中伯胺基团数量的增加;同时,Phe-D分子中苯基的引入使模型蛋白的置换百分率提高了70%,展示了苯基对蛋白质置换的促进作用。

离子交换介质内蛋白置换行为的观测与解析

以肌醇六磷酸钠(PAS)为置换剂研究了绿色荧光蛋白(eGFP)在Q Sepharose HP离子交换色谱(IEC)介质上的置换行为。置换色谱结果表明,不同浓度PAS下eGFP均可形成稳定的置换列并成功分离。利用共聚焦激光扫描显微镜(CLSM)技术对eGFP在离子交换色谱介质内吸附动力学的观测发现,eGFP在IEC介质内的吸附是由表面扩散和孔扩散共同作用的复杂行为。置换过程中不同时刻的CLSM图像显示,eGFP置换不仅取决于置换剂的亲和力,也与置换剂与介质的结合过程相关;介质内荧光强度的分析表明,eGFP置换首先发生在介质的外层,PAS浓度的降低导致置换速率下降。这与置换色谱的结果相吻合。CLSM不仅为蛋白置换动力学的研究提供了一种直观观测技术,CLSM结果也确认了蛋白质置换过程的复杂性。

离子交换法提纯混合生育酚的工艺研究

利用树脂柱离子交换分离技术,对分离提纯天然生育酚工艺进行了研究。以分子蒸馏后的混合生育酚粗品为原料,经强碱性离子交换树脂柱处理,得到含量在85%以上的混合生育酚产品,生育酚的收率在89.8%～91.6%之间。经过树脂柱提纯所得产品,采用置换色谱,可以一定程度地将同系物分离,特别是能很好地将δ-与β+γ-、α-生育酚分开,获得纯度90%以上的β+γ-生育酚产品以及纯度80%以上的的δ-生育酚产品。

无水型双(全氟丁基磺酰)亚胺锂的合成与表征

以全氟丁基磺酰氟为原料,经胺化、成盐、中和、置换反应合成了无水型双(全氟丁基磺酰)亚胺锂。优化了双(全氟丁基磺酰)亚胺三乙胺盐的合成条件。较优的条件为:n(C4F9SO2NH2)∶n(C4F9SO2F):n(NEt3)=1:1.04:1.4,反应温度80℃,反应时间42h。在该条件下,反应收率可达99%以上,合成双(全氟丁基磺酰)亚胺锂的总收率为53.3%。通过FT-IR、1 H-NMR、MS和ICP等对中间体及最终产物进行了表征。