改进羊大肠杆菌病灭活疫苗效力检验方法的试验总结

羊大肠杆菌病灭活疫苗又可称羊大肠埃希氏菌病灭活疫苗。本品是用免疫原性良好的大肠埃希氏菌 ,接种于适宜的培养基内培养 ,将培养物经甲醛溶液灭活后加氢氧化铝胶制成的 ,主要用于预防羊大肠埃希氏菌病 ,免疫期为 5个月。我厂羊大肠杆菌病灭活疫苗的效力检验 ,长期以来一直采用传统、较落后的本动物试验方法 ,不但成本高 ,检验程序复杂 ,而且与内地先进的检验技术有较大的差距 ,严重影响和制约着本疫苗检验技术的发展、进步。通过引进“豚鼠代替本动物 (羊 )进行效力检验羊大肠杆菌病灭活疫苗”的检验技术 ,不仅使检验方法更加科学、成本也能下降 68%。

使用合成培养基生产羊大肠杆菌病灭活疫苗的初步试验

设计了一种适用于羊大肠杆菌病灭活疫苗生产的合成培养基 (MM培养基 ) ,与原生产用 2 %蛋白胨肉汤培养基比较试验。经活菌计数、无菌检验、安全检验和效力试验证明 ,两种培养基在实验室制备的疫苗 ,均达到了《规程》

用MM培养基生产羊大肠杆菌病灭活疫苗的试验

本试验研制出一种适于生产羊大肠杆菌病灭活疫苗的培养基 (MM培养基 )。该培养基不需要牛肉 ,可替代 2 %蛋白胨肉汤培养基 ,使疫苗生产成本由原成本 0 .0 1 4元 /mL下降至0 .0 0 2 1元 /mL。活菌计数、无菌检验、安全检验和效力试验证明 ,用该培养基制备的疫苗 ,均达到了《中华人民共和国兽用药物制品规程》

兔大肠杆菌病二价蜂胶灭活疫苗的研究

从分离鉴定的 15株致病性大肠杆菌中 ,筛选出 2株流行广泛 ,致病力强 ,免疫原性好 ,具有血清型 (0 10 3、0 85 )代表性的大肠杆菌作为制苗菌株 ,以蜂胶为佐剂 ,研制出的兔大肠杆菌病二价蜂胶灭活疫苗 ,使用安全 ,免疫效果好 ,保护率达87%以上。该苗在 4℃保存期为 8个月以上。在黑龙江、辽宁两省免疫 2万只家兔 ,1～ 2年的观察表明 ,用苗后兔群未出现不良反应 ,且用苗后仔兔成活率由 5 0 %左右提高到 85 %以上 。

猪大肠杆菌病(本地株)多价灭活疫苗的应用

采用猪群中分离获得的O8、O9、O149、O157血清型菌株混合,经甲醛灭活 ,以氢氧化铝为佐剂,按一定比例配制成含 10亿个 /mL的大肠杆菌病(本地株)多价灭活苗。应用表明:该大肠杆菌病 (本地株 )多价灭活苗对仔猪的保护率达95 03%,可以显著减少仔猪的发病和死亡。

禽霍乱、大肠杆菌病和克雷伯菌病多价蜂胶三联灭活疫苗的研制

利用禽巴氏杆菌C48-1、C48-2强毒株、禽大肠杆菌O78和O1血清型强毒株及克雷伯菌临床分离株制苗,通过疫苗对鸡的免疫效力试验、疫苗最小免疫剂量试验、疫苗产生坚强免疫力时间的测定、疫苗免疫期的测定和疫苗保存期的测定等,研制出禽霍乱、大肠杆菌病和克雷伯菌病多价蜂胶三联灭活疫苗。结果该三联灭活疫苗安全可靠,免疫原性良好,最小免疫剂量为0.5 mL/只,免疫7 d后产生坚强保护力,疫苗对上述疾病的保护率为100%,免疫期为6个月,4℃条件下保存期为9个月。

鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗研究(I报)——疫苗制备及免疫效力试验

要研究以鸡大肠杆菌常见致病性血清型O_1、O_2、O_(78)3个血清型菌株制备成鸡大肠杆菌多价蜂胶灭活疫苗,以1ml/只免疫1月龄鸡,3周后攻毒保护车100%;每ml含10^(10)菌,10mg蜂胶佐剂的疫苗外观呈深褐,颗粒微小均匀,流动性好,使用方便;固体培养可获得大量抗原,简化浓缩工艺,其免疫效果明显好于液体培养菌疫苗.

鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗的研制

鸡致病性大肠杆菌的血清型很多，不同地区和鸡场的血清型不尽相同，往往造成单价灭活苗免疫失败，而各地区最常见的血清型只有几个，称之为地区优势血清型，因此选用当地或本场有代表性的优势血清型菌株，制备多价大肠杆菌病的灭活苗成为近年来研究的热点。

应用小白鼠对鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗进行效检的研究

为寻找更好的鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗的效检方法,本研究应用小白鼠代替本动物“鸡”,对鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗进行效检。结果表明,小白鼠免疫体重为18～22g,疫苗免疫剂量为0.3ml/只;免疫后10d,攻毒体重为20～28g,攻毒剂量为2～3×107CFU/只时,可代替本动物“鸡”对鸡大肠杆菌病多价蜂胶灭活疫苗进行效检,判定标准为免疫组8/10以上保护,对照组5/5死亡为合格。本效检方法可缩短检验期限7d,降低检验成本,具有更敏感、更特异、更客观、更简便等特点。

猪大肠杆菌病多价灭活疫苗的研制

我们采用我省猪群中分离获得的O8、O9、O149、O157血清型菌株混合,经甲醛灭活,以氢氧化铝为佐剂,按一定比例配制成含10亿个/mL的大肠杆菌病(本地株)多价灭活苗。应用试验研究表明,该大肠杆菌病(本地株)多价灭活苗对仔猪的保护率达96.13%,可以显著减少仔猪的发病和死亡。

鸡大肠杆菌病和新城疫二联油乳剂灭活疫苗研制与应用

本研究采用致病性大肠杆菌O1,O2,O78 三个血清型菌株接种适宜培养基 ,收获菌液 ,经浓缩后 ,与灭活的鸡新城疫Lasota株鸡胚尿囊液混合 ,制备成油乳剂二联灭活疫苗。应用二联灭活疫苗免疫18日龄鸡 ,0.25ml/只 ,皮下注射 ,免疫后21天攻毒测保护力 ,新城疫保护率100 %,大肠杆菌病保护率80 %～100 %,免疫持续期可达4个月 ,产蛋鸡在开产前2～3周免疫二联苗0.5ml/只 ,免疫后6个月ND保护率为100 %,大肠杆菌病保护率为80 %,免疫期可达8个月。安全试验结果 :18日龄雏鸡0.5ml/只 ,120日龄成鸡2ml/只 ,试验鸡全部健活。疫苗在4～8℃保存期为12个月 ,10℃保存期为4个月 ,1998～1999年在全省不同地区、不同品种鸡应用20万羽份 。

禽霍乱与大肠杆菌病多价蜂胶二联灭活疫苗的研究

为研制绿色环保型的禽霍乱与大肠杆菌病多价二联灭活疫苗 ,本研究以禽多杀性巴氏杆菌强毒株C4 8_1、C4 8_2和禽致病性大肠杆菌常见血清型 0 1/ 0 15 4、0 2 / 0 86、0 78、0 18、0 8/ 0 93等为制苗菌株 ,分别以改良马丁琼脂和马丁肉汤进行固体表面培养和高密度发酵培养制备抗原 ,将灭活的抗原铺以具有广谱生物学活性的天然物质_蜂胶为免疫增强剂 ,已拥有完全自主知识产权的纳米蜂胶疫苗制造工艺技术平台制备禽霍乱与大肠杆菌病多价蜂胶二联灭活疫苗。试验结果表明 ,疫苗安全可靠 ,无明显的干扰现象 ,免疫后 5～ 7d产生坚强保护力 ,对禽霍乱和鸡大肠杆菌病的近期保护率均为10 0 %。以实验动物小鼠代替本动物进行二联疫苗效检取得成功 ,本效检方法可缩短检验期限 7d ,降低检验成本 ,具有更敏感、更特异、更客观、更简便等特点。禽霍乱采用攻毒法 ,大肠杆菌采用改良微量凝集试验测定抗体效价法测定禽_大二联疫苗的免疫期与保存期。结果表明 ,该疫苗的免疫期为 6个月以上 ,- 10℃保存期为 18个月 ;4℃～ 8℃为 12个月 ;15℃～ 30℃为 6个月。田间免疫试验表明 ,疫苗安全可靠 ,现场应用已逾 2亿羽份 。

鹅大肠杆菌油佐剂灭活疫苗的研制

从湛江地区疑似大肠杆菌病的病死鹅组织中分离鉴定2株致病性大肠杆菌O86K61和O44K74,以此制备油佐剂灭活疫苗。用上述疫苗接种20日龄雏鹅,35日龄加强免疫一次,分别于27、35、42、50日龄检测免疫鹅血清抗体水平,并进行攻毒保护试验。结果表明,制备的大肠杆菌油佐剂灭活疫苗安全可靠,免疫后15、30d后,免疫鹅血清抗体水平分别达到1∶32和1∶128;且免疫鹅能抵抗1010/mL的致病性大肠杆菌攻击,对照组鹅全部发病,有明显临床症状,从发病鹅组织中分离到致病性大肠杆菌。

鸡大肠杆菌中草药佐剂多价灭活疫苗最小免疫量试验

取10日龄SPF雏鸡,分为两组。通过免疫攻毒试验检测了3个批次的鸡大肠杆菌中草药佐剂多价灭活疫苗的最小免疫量。结果证明,该灭活疫苗的最小免疫量为1/10个预设剂量。

鸡大肠杆菌自家灭活疫苗的安全性与免疫效力试验

随着我国养禽业的发展，特别是进人新世纪以来，禽大肠杆菌病已上升为主要的传染病之一。其发生及流行有越发严重的趋势。可以引起家禽的肝周炎、心包炎、腹膜炎和全眼炎等一系列病变。死亡率较高，常给规模化的养禽场和专业户造成严重的损失。由于大肠杆菌耐药性的普遍存在，从而使禽大肠杆菌病的控制成为一大难题。

禽霍乱+大肠杆菌病二联蜂胶灭活疫苗与油佐剂疫苗注射部位的动态病理组织学比较观察

用禽霍乱+大肠杆菌二联蜂胶灭活疫苗和油佐剂疫苗分别胸肌注射免疫肉鸡,分别于免疫后7d、14d和28d剖杀,取注射部位的肌肉组织,常规石蜡包埋切片观察。结果为,蜂胶疫苗免疫组免疫后7d时,肌纤维轻度水肿,纤维间有大量淋巴细胞和巨噬细胞的浸润,巨噬细胞吞噬有蜂胶颗粒,14d时肌纤维则恢复正常;油苗注射组免疫后,7d时肌肉中度水肿,其间有大量油乳状疫苗残留,镜检可见肌纤维断裂、坏死,其间有较多较大的油囊,囊壁由大量增生的成纤维细胞、异嗜性粒细胞、巨噬细胞、小血管及淋巴样细胞组成,细胞增生持续存在到28d,最后形成肉芽肿结构。研究结果表明,蜂胶疫苗免疫后对局部组织学影响明显小于油苗注射组。

鸡自家大肠杆菌油乳剂灭活疫苗的研制

从河北省几个大肠杆菌病较严重的大型鸡场分离到29株大肠埃希氏菌,分离菌株的生化特性符合大肠埃希氏菌的特性。以该菌株为抗原研制了自家大肠杆菌油乳剂灭活疫苗,并对其物理性状、安全性、免疫效力、保存期及抗体消长规律进行了检测。结果表明,试验鸡疫苗在免疫后3周到9个月内对大肠杆菌的攻击获得全部保护。疫苗40℃保存15个月,其免疫效力没有下降。

藏鸡大肠杆菌油乳剂灭活疫苗的研制及免疫效力试验

鸡大肠杆菌病是由病原性大肠埃希氏杆菌引起的禽类传染病，由于大肠杆菌在自然界广泛分布，同时也是禽肠道的正常菌群，经常可从健康鸡的肠道中分离出致病性大肠杆菌血清型，表明大肠杆菌是条件致病菌或引起继发感染。禽舍中的粪便和灰尘是致病性大肠杆菌的重要来源，细菌经呼吸道、消化道、种蛋等途径使禽发生感染。各种年龄的家禽对大肠杆菌都能感染，但多发生于幼龄家禽，特别是雏鸡的发病率和病死率均较高。近年来，随着规模化养鸡业的迅速发展，鸡大肠杆菌病在西藏流行非常严重，几乎遍布所有的鸡场，给养鸡业带来很大的经济损失。同时，由于血清型众多和滥用抗生素导致耐药菌株的大量出现，使药物控制的难度越来越大，疫苗免疫接种成为有效预防该病的途径。

鸡多杀性巴氏杆菌病、大肠杆菌病二联灭活疫苗研制初探

将鸡多杀性巴氏杆菌菌液、大肠杆菌菌液分别经甲醛灭活,加氢氧化铝胶,弃去部分上清液,将二者按3∶1的比例混合制成二联灭活疫苗。疫苗接种鸡安全;接种21d后对免疫鸡攻毒,免疫鸡对两种疫病的免疫保护均达到3/4以上,说明将鸡巴氏杆菌、大肠杆菌制成二联灭活疫苗是完全可行的。

鸡大肠杆菌蜂胶多价灭活疫苗对肉仔鸡大肠杆菌病的防治效果

近年来,本地区养鸡业发展迅速,但各种鸡病也随之增加,尤其是鸡大肠杆菌病广泛流行,给养鸡业造成很大经济损失。对本病的防治曾应用过庆大霉素、氯霉素及氟哌酸等一些药物均无明显效果。1995年初以来,改用鸡大肠杆菌蜂胶多价灭活疫苗防治该病,取得了满意的效果,现报告如下。