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江苏地区2株山羊痘病毒的分离与鉴定
被引量:
2
1
作者
易成功
朱相儒
+6 位作者
满成连
韩卫洲
张伟伟
秦涛
陈素娟
彭大新
夏同海
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期322-324,共3页
为对江苏部分地区羊场羊痘病毒进行有效的监测和防控,及时了解病毒遗传进化趋势,降低规模化养羊业的风险,本研究从江苏部分地区养羊场采集疑似羊痘病羊的皮肤丘疹、水疱或脓疱组织病料样品,分别接种9日龄SPF鸡胚绒毛尿囊膜、胎羊睾丸细...
为对江苏部分地区羊场羊痘病毒进行有效的监测和防控,及时了解病毒遗传进化趋势,降低规模化养羊业的风险,本研究从江苏部分地区养羊场采集疑似羊痘病羊的皮肤丘疹、水疱或脓疱组织病料样品,分别接种9日龄SPF鸡胚绒毛尿囊膜、胎羊睾丸细胞(LT)和牛肾细胞(MDBK),观察鸡胚病变和细胞病变情况。同时通过PCR方法扩增羊痘病毒p32基因进行序列分析,并进行p32基因限制性片段长度多态性分析。结果显示,接种鸡胚绒毛尿囊膜形成典型的痘斑,胚体出血;系统进化分析显示,两株分离株属于山羊痘病毒(GTPV);限制性片段长度多态性分析结果也显示符合GTPV的特征。本研究所分离到的2株GTPV,为当地制定山羊痘的防控策略提供依据。
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关键词
山
羊
痘病毒
P32基因
胎
羊睾丸细胞
限制性片段长度多态性分析
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职称材料
用免疫荧光技术检测细胞培养物中兔出血症病毒
被引量:
1
2
作者
薛掌林
张述斌
康文彪
《中国养兔》
2009年第1期31-33,26,共4页
用本所实验室制备的兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic diseasevirus,RHDV)高免血清,按常规方法提纯出抗体(IgG),用异硫氰酸荧光素(FITC)标记IgG。在细胞培养时,培养瓶中放入玻片,当细胞长成单层时,按常规方法接种病毒液,培养24、48、96...
用本所实验室制备的兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic diseasevirus,RHDV)高免血清,按常规方法提纯出抗体(IgG),用异硫氰酸荧光素(FITC)标记IgG。在细胞培养时,培养瓶中放入玻片,当细胞长成单层时,按常规方法接种病毒液,培养24、48、96、120h时取出玻片,用荧光抗体染色,在荧光显微镜下观察不同代次的细胞毒。经观察:兔肾上皮细胞(RK)毒培养到36~48h、羊睾丸细胞(ST)毒培养到72~96h时可观察到特异性荧光,随着培养时间的延长,荧光亮度增强,胞浆内充满特异性荧光。用肝组织强毒病料触片,呈特异性荧光,对照细胞培养48h无荧光出现,证实了两株细胞培养物中有大量的兔出血症病毒存在,从而成功的分离培养出了兔出血症病毒细胞毒。
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关键词
免疫荧光技术
羊睾丸细胞
兔肾上皮
细胞
兔出血症病毒
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职称材料
用免疫荧光技术检测细胞培养物中兔出血症病毒
3
作者
薛掌林
张述斌
康文彪
《畜牧兽医杂志》
2009年第3期15-17,19,共4页
用本实验室制备的兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)高免血清,按常规方法提纯出抗体(IgG),用异硫氰酸荧光素(FITC)标记IgG。在细胞培养时,培养瓶中放入玻片,当细胞长成单层时,按常规方法接种病毒液,培...
用本实验室制备的兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)高免血清,按常规方法提纯出抗体(IgG),用异硫氰酸荧光素(FITC)标记IgG。在细胞培养时,培养瓶中放入玻片,当细胞长成单层时,按常规方法接种病毒液,培养24、48、96、120h时取出玻片,用荧光抗体染色,在荧光显微镜下观察不同代次的细胞毒。经观察:兔肾上皮细胞(RK)毒培养到36—48h,羊睾丸细胞(ST)毒培养到72—96h时可观察到特异性荧光,随着培养时间的延长,荧光亮度增强,胞浆内充满特异性荧光。用肝组织强毒病料触片,呈特异性荧光,对照细胞培养48h无荧光出现,证实了两株细胞培养物中有大量的兔出血症病毒存在,从而成功的分离培养出了兔出血症病毒细胞毒。
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关键词
免疫荧光技术
羊睾丸细胞
兔肾上皮
细胞
兔出血症病毒
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职称材料
用酶联免疫吸附法检测细胞培养物中兔出血症病毒
4
作者
薛掌林
张述斌
康文彪
《畜牧兽医杂志》
2009年第4期19-20,23,共3页
用本实验室提纯的兔出血症病毒抗体(IgG),采用改良过碘酸钠(NaIO4)交联法,将辣根过氧化物酶(HRP)标记在抗体上,以4×10聚苯乙烯微量酶标板作为载体,用酶联免疫吸附法双抗体夹心法检测了兔肾上皮细胞(RK)培养的RHDV16代、18代细胞毒...
用本实验室提纯的兔出血症病毒抗体(IgG),采用改良过碘酸钠(NaIO4)交联法,将辣根过氧化物酶(HRP)标记在抗体上,以4×10聚苯乙烯微量酶标板作为载体,用酶联免疫吸附法双抗体夹心法检测了兔肾上皮细胞(RK)培养的RHDV16代、18代细胞毒和羊睾丸细胞(ST)培养的RHDV19代、24代、26代细胞毒,均呈特异性阳性反应,P/N值>2.1,正常细胞培养物标本为阴性结果,P/N值<2.1,试验结果与免疫荧光试验相吻合。
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关键词
酶联免疫吸附法
羊睾丸细胞
兔肾上皮
细胞
兔出血症病毒
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职称材料
题名
江苏地区2株山羊痘病毒的分离与鉴定
被引量:
2
1
作者
易成功
朱相儒
满成连
韩卫洲
张伟伟
秦涛
陈素娟
彭大新
夏同海
机构
扬州大学兽医学院
江苏省动物重要疫病与人兽共患防控协同创新中心
徐州睢宁魏集镇双惠养羊专业合作社
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第4期322-324,共3页
基金
苏北科技专项资金(富民强县)项目(BN2014002)
文摘
为对江苏部分地区羊场羊痘病毒进行有效的监测和防控,及时了解病毒遗传进化趋势,降低规模化养羊业的风险,本研究从江苏部分地区养羊场采集疑似羊痘病羊的皮肤丘疹、水疱或脓疱组织病料样品,分别接种9日龄SPF鸡胚绒毛尿囊膜、胎羊睾丸细胞(LT)和牛肾细胞(MDBK),观察鸡胚病变和细胞病变情况。同时通过PCR方法扩增羊痘病毒p32基因进行序列分析,并进行p32基因限制性片段长度多态性分析。结果显示,接种鸡胚绒毛尿囊膜形成典型的痘斑,胚体出血;系统进化分析显示,两株分离株属于山羊痘病毒(GTPV);限制性片段长度多态性分析结果也显示符合GTPV的特征。本研究所分离到的2株GTPV,为当地制定山羊痘的防控策略提供依据。
关键词
山
羊
痘病毒
P32基因
胎
羊睾丸细胞
限制性片段长度多态性分析
Keywords
goat pox virus
p32 gene
LT cells
restriction fragment length polymorphismanalysis
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
用免疫荧光技术检测细胞培养物中兔出血症病毒
被引量:
1
2
作者
薛掌林
张述斌
康文彪
机构
甘肃省畜牧兽医研究所
出处
《中国养兔》
2009年第1期31-33,26,共4页
文摘
用本所实验室制备的兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic diseasevirus,RHDV)高免血清,按常规方法提纯出抗体(IgG),用异硫氰酸荧光素(FITC)标记IgG。在细胞培养时,培养瓶中放入玻片,当细胞长成单层时,按常规方法接种病毒液,培养24、48、96、120h时取出玻片,用荧光抗体染色,在荧光显微镜下观察不同代次的细胞毒。经观察:兔肾上皮细胞(RK)毒培养到36~48h、羊睾丸细胞(ST)毒培养到72~96h时可观察到特异性荧光,随着培养时间的延长,荧光亮度增强,胞浆内充满特异性荧光。用肝组织强毒病料触片,呈特异性荧光,对照细胞培养48h无荧光出现,证实了两株细胞培养物中有大量的兔出血症病毒存在,从而成功的分离培养出了兔出血症病毒细胞毒。
关键词
免疫荧光技术
羊睾丸细胞
兔肾上皮
细胞
兔出血症病毒
Keywords
Fluorescent antibody technique
Sheep testis cells
Rabbit kidney epithelial cells
Rabbit hemorrhagic disease virus
分类号
S858.291 [农业科学—临床兽医学]
下载PDF
职称材料
题名
用免疫荧光技术检测细胞培养物中兔出血症病毒
3
作者
薛掌林
张述斌
康文彪
机构
甘肃省畜牧兽医研究所
出处
《畜牧兽医杂志》
2009年第3期15-17,19,共4页
文摘
用本实验室制备的兔出血症病毒(rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV)高免血清,按常规方法提纯出抗体(IgG),用异硫氰酸荧光素(FITC)标记IgG。在细胞培养时,培养瓶中放入玻片,当细胞长成单层时,按常规方法接种病毒液,培养24、48、96、120h时取出玻片,用荧光抗体染色,在荧光显微镜下观察不同代次的细胞毒。经观察:兔肾上皮细胞(RK)毒培养到36—48h,羊睾丸细胞(ST)毒培养到72—96h时可观察到特异性荧光,随着培养时间的延长,荧光亮度增强,胞浆内充满特异性荧光。用肝组织强毒病料触片,呈特异性荧光,对照细胞培养48h无荧光出现,证实了两株细胞培养物中有大量的兔出血症病毒存在,从而成功的分离培养出了兔出血症病毒细胞毒。
关键词
免疫荧光技术
羊睾丸细胞
兔肾上皮
细胞
兔出血症病毒
Keywords
Fluorescent antibody technique
Sheep testis cells
Rabbit kidney epithelial cells
Rabbit hemorrhagic disease virus
分类号
S855.3 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
用酶联免疫吸附法检测细胞培养物中兔出血症病毒
4
作者
薛掌林
张述斌
康文彪
机构
甘肃省畜牧兽医研究所
出处
《畜牧兽医杂志》
2009年第4期19-20,23,共3页
文摘
用本实验室提纯的兔出血症病毒抗体(IgG),采用改良过碘酸钠(NaIO4)交联法,将辣根过氧化物酶(HRP)标记在抗体上,以4×10聚苯乙烯微量酶标板作为载体,用酶联免疫吸附法双抗体夹心法检测了兔肾上皮细胞(RK)培养的RHDV16代、18代细胞毒和羊睾丸细胞(ST)培养的RHDV19代、24代、26代细胞毒,均呈特异性阳性反应,P/N值>2.1,正常细胞培养物标本为阴性结果,P/N值<2.1,试验结果与免疫荧光试验相吻合。
关键词
酶联免疫吸附法
羊睾丸细胞
兔肾上皮
细胞
兔出血症病毒
Keywords
ELISA
Sheep testis cells
Rabbit kidney epithelial cells
Rabbit hemorrhagic disease virus
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
江苏地区2株山羊痘病毒的分离与鉴定
易成功
朱相儒
满成连
韩卫洲
张伟伟
秦涛
陈素娟
彭大新
夏同海
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
2
下载PDF
职称材料
2
用免疫荧光技术检测细胞培养物中兔出血症病毒
薛掌林
张述斌
康文彪
《中国养兔》
2009
1
下载PDF
职称材料
3
用免疫荧光技术检测细胞培养物中兔出血症病毒
薛掌林
张述斌
康文彪
《畜牧兽医杂志》
2009
0
下载PDF
职称材料
4
用酶联免疫吸附法检测细胞培养物中兔出血症病毒
薛掌林
张述斌
康文彪
《畜牧兽医杂志》
2009
0
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