羊红细胞铜锌超氧化物歧化酶的纯化及部分性质研究

目的从羊红细胞中分离纯化铜锌超氧化物歧化酶 (Cu ,Zn SOD) ,并对其部分理化性质进行研究。方法采用有机溶剂去除血红蛋白、热变性、超滤浓缩、丙酮沉淀、DE FF柱色谱的方法 ,对羊红细胞Cu ,Zn SOD进行分离纯化。结果羊红细胞 5 2 0g得Cu ,Zn SOD总活力为 4 6 70 0 0u ,比活为 812 6u/mg·pro,纯化倍数为 2 6 .2 ,活性回收率为 6 1%。理化性质分析表明 :该酶的最大紫外吸收波长为 2 5 8nm ,亚基相对分子量为 16 .1kD ,每个亚基含 1个铜原子和 1个锌原子。pH在 6～ 11范围内该酶稳定性很好 ,在 35℃～ 75℃范围内 ,保温 2 0min ,酶活基本没有损失。 2mmol/L的SDS对Cu ,Zn SOD没有明显的抑制作用 ,而 2mmol/L的H2 O2 对该酶表现出较强的抑制作用。结论采用此方法分离纯化的Cu ,Zn SOD达到电泳纯 ,其理化性质与其它动物血液来源的Cu ,Zn SOD一致。

羊红细胞SOD的提取及其稳定性研究

以羊红细胞为原料提取SOD,采用正交试验法对超声波细胞破碎工艺进行了探讨。结果发现:当超声波功率为250W,超声时间为10min,加水量为1:6,超声温度为30℃的条件下提取到的酶总活力为487200U/L,经纯化后的总活力为319600 U/L。比活力分别为28.47U/mg蛋白和1488.55U/mg蛋白。整个过程酶提取率达65.6%。对酶的稳定性研究发现,其稳定性较好,可用于工业生产。

应用多个胃癌组织提取物通过鞣化羊红细胞电泳以提高对胃癌的诊断

以正常胃粘膜和5个胃癌的3MKCL提取物作抗原应用FTEEM试验对149例胃癌、良性胃病、其它肿瘤及正常人进行测检。以正常胃粘膜作抗原,各受试组FTEEM仅出现个别阳性。应用单个胃癌抗原检测胃癌病人阳性率为71.43％,而用5个胃癌抗原阳性率可提高到90.49％。应用胃癌提取物作抗原在其它肿瘤病人中均存在不同程度的FTEEM交叉反应。结果表明,应用多种胃癌提取物作抗原可提高胃癌患者FTEEM阳性率。如能进一步扩大抗原成分,并对抗原进行各种非特异性物质的吸收纯化,将会提高其特异性和敏感性。

羊红细胞超氧化物歧化酶的研究

自羊红细胞分离得到一种高等电点的铜.锌-超氧化物歧化酶(Cu.ZnSOD)。其沉降系数(S)为3.23,亚基分子量为16600,等电点为8.50,紫外最大吸收峰位于259nm,酶分子中含有铜和锌,氨基酸组成特点与其它动物来源的Cu.Zn-SOD相同。该酶的比活性为5500U/mg(黄嘌吟氧化酶—细胞色素还原法);对KCN的抑制作用敏感,最适pH值为6。

21例银屑病患者的醛化鞣酸化羊红细胞电泳的观察

本文对21例银屑病患者进行了醛化鞣酸化羊红细胞电泳(FTEEM)测定,以21名健康人为对照组。结果银屑病进行期缓慢率较正常人有高度显著差异。

一起羊附红细胞体病及其继发症的诊治

羊附红细胞体是羊红细胞的一种立克次体寄生虫,附着在红细胞膜表面或游离于血浆中,通过蚊蝇、节肢动物叮咬以及受污染的机械传播。急性附红细胞体病会导致幼年动物严重的溶血性贫血和死亡。慢性附红细胞体病因年龄、营养水平、免疫状态以及其他疾病交叉感染等情况会产生不同程度的发病率。羊感染该病的主要症状为虚弱、贫血、生长不良,部分有黄疸。附红细胞体病致病力低,且通常症状轻微,临床不容易诊断,潜在危害大,严重影响着养羊业的发展。本文通过介绍一起羊附红细胞体病继发症的诊治过程为该病今后的治疗提供参考。

体外诱导绵羊红细胞特异性抗体形成及单纯疱疹病毒感染对它的影响

本文建立了一种较稳定、理想的人淋巴细胞体外诱导绵羊红细胞(SRBC)特异性抗体生成的系统。用SRBC体外刺激人扁桃体淋巴细胞,用溶血空斑法计数针对SRBC特异性抗体形成细胞。发现极低量抗原可诱导其抗体形成,抗体形成量随抗原量呈规律性变化;在抗原刺激后的第4天特异性抗体开始出现,第6天达高峰,并稳定维持至第8天;在辅助刺激剂美洲商陆(PWM)存在下,抗体形成量显著高于无PWM的情况;除去人扁桃体细胞中粘附细胞(主要是巨噬细胞)才能诱导最适抗体形成。将具感染性的HSV-1与SRBC一起加入淋巴细胞培养中,可显著抑制SRBC诱导的特异性抗体形成,这一抑制效应与病毒的感染量有关。此系统中同时加入α-干扰素则可部分解除病毒的抑制效应,并且解除效果与α-干扰素的剂量有关。

用鸡红细胞作免疫原的溶血素测定法

1979年徐学瑛等报告采用免疫小鼠血清溶血素代替脾细胞作体外溶血实验的简便方法。该法不需要采用淋巴细胞分离等较为复杂的手段,因此,对实验结果的影响因素更少及操作更为简便,目前国内多数学者均采用本法略加改进后用于对一些药物的研究,我们在探讨本法的实验方法学技术中,发现鸡红细胞是一种很好的免疫原,可代替羊红细胞用于血清溶血素实验,现将我们的实验方法及结果报告如下。材料、方法和结果一、动物和免疫小白鼠为本院动物场饲养,18～20g,雌雄兼用。鸡红细胞在4℃冰箱中保存于Alsever氏液中,临用时用生理盐水离心洗涤三次,配成5%混悬液,每鼠腹腔注射0.2ml免疫。二、补体制备取2只豚鼠血清混合。

鸡红细胞致小鼠迟发型超敏反应动物模型及补体C_3水平

用鸡红细胞和羊红细胞作致敏原，诱导小鼠迟发型超敏反应，结果在攻击后，两种致每文原的足垫部肿胀程度逐渐增高，３小时最为明显，４８小时后逐渐降低。用ＳＲＢＣ作致敏原可使小鼠血清Ｃ３含量明显升高。

甲亢患者红细胞结合荧光标记羊抗人IgG值的测定及其临床意义(附34例病例分析)

本文应用荧光免疫技术测定了34例甲亢患者的红细胞IgG值,同时观察了抗甲状腺球蛋白抗体及抗甲状腺微粒体抗体,结果显示:甲亢患者红细胞抗体结合值高于正常对照组(P<0.01),支持甲亢存在多种免疫异常的观点。

羊附红细胞体解离方法的比较研究

羊附红细胞体病对羊群有一定的危害性,本文将展开对羊附红细胞体解离方法的研究。为了能够得到准确的实验结果,首先要获取红细胞感染率较高的阳性抗凝血作为实验样品,使用多种方法对红细胞体进行解离,然后比较这几种方法对羊附红细胞体的解离效果。主要采用SDS-PAGE方法检测。结果显示,在针对羊附红细胞体解离方法当中,在200m L的抗凝血液当中加入1m L的双向红莲灭,保持在4℃左右的情况下,36h后会有比较好的分离效果。传统的水溶法,其解离的效果会比较差,但可明显降低羊附红细胞的感染率及感染的强度,效率也比较高。希望能够通过本文的研究,为业界提供更多的参考。

淋巴细胞型白血病的免疫学分型

免疫学的最新近展使人们对白细胞的分化和白血病细胞的来源有了重要的认识。除传统的标记如B细胞表面的免疫球蛋白(Smlg)、细胞浆内免疫球蛋白(Clg)、T细胞表面的羊红细胞(E)受体外,MC Ab的应用可更细致的分析正常细胞和恶性细胞的表现型。能准确的鉴别正常不成熟白细胞和白血病母细胞;能明确的划分细胞发育阶段。

硫代黄素荧光染色法显示周围血液中的淋巴细胞异质性

本文对人周围血液内的淋巴细胞进行了E-玫瑰花环和EAC玫瑰花环试验及硫代黄素荧光染色。实验证明人周围血液中的大部分淋巴细胞是蓝色核蓝色荧光胞质的小淋巴细胞和蓝色荧光核胞质无荧光而含有蓝白色块状荧光的淋巴细胞。其次是深蓝色核鲜蓝色荧光胞质的淋巴细胞和桔黄色核或桔红色核、黄色荧光胞质的淋巴细胞。此外,有时还可以看到灰蓝色——灰黄色核淡蓝绿色荧光胞质和淡黄色荧光的淋巴细胞。偶而可见桔红色核几乎看不到胞质的淋巴细胞。蓝色较小的细胞核境界不清楚的淋巴细胞和含有蓝白色块状荧光的淋巴细胞及桔黄色核黄色荧光胞质的淋巴细胞与羊红细胞能形成E-玫瑰花环,是T细胞。另一种较小的蓝色荧光的淋巴细胞和深蓝色核、鲜蓝色荧光胞质的淋巴细胞及桔红色核、黄色荧光胞质的淋巴细胞与特异性抗体和补体致敏的羊红细胞能形成EAC玫瑰花环,是B细胞。

电针对机体细胞免疫的影响

观察70例患者(包括60例针麻及10例药麻),在针(或药)麻前及诱导20分钟后各自患者耳垂取血一次,部分患者在针刺24小时后又取血一次。电针主穴为合谷或足三里。作为体外细胞免疫检测方法我们采用改进的微量全血技术做玫瑰花(包括活性、非活性)及淋巴细胞转化试验。在做活性玫瑰花试验的同时,计数白细胞总数及淋巴细胞分类百分数以计算活性玫瑰花形成细胞(RFC)的绝对值。结果见到在活性RFC中针刺诱导后提高均值为12.7±1.43,降低均值为6.8±1.77。活性RFC绝对值的提高均值为175.33±63.59。然而药麻组的活性RFC在药麻后变动不明显。在淋巴细胞转化试验中,提高均值为12.7±1.29,降低均值为7.0±2.19。在针刺24小时后仍见提高效应。以上提高变动多见于针前细胞免疫水平偏低或一般者,而降低变动可见于针前水平偏高者。在活性、非活性玫瑰花及淋巴细胞转化三项试验中,提高或降低变动相符,提高约12~13%,降低约6~7%,两者相比皆以提高为主。

羊巴贝斯虫病的诊断与治疗

羊巴贝斯虫病是由莫氏巴贝斯虫、绵羊巴贝斯虫等寄生于绵羊、山羊红细胞内引起的一种血液原虫病,又称梨形虫病,俗称巴贝斯焦虫病、蜱热、红尿热,临床常出现血红蛋白尿,故又称红尿症、血尿症,在我国广泛存在,常呈地方性流行,严重制约养羊业的健康持续性发展。笔者于2016年诊治了一例典型病例,通过综合诊治取得满意疗效,现报告如下。

常见β受体阻断药对正常小鼠脾细胞抗体形成的影响

目的研究普萘洛尔、美托洛尔、MELE对正常小鼠脾细胞抗体形成的影响。方法随机将64只小鼠分为8组,8只/组。分别口服25.0,12.5mg/kg的普萘洛尔;25.0,12.5mg/kg的美托洛尔,32.0,16.0,8.0mg/kg的MELE,0.5%的羧甲基纤维素钠(CMC)溶液。每日1次,连续7d。末次给药后第3天用SRBC致敏,第5天处死。然后分离脾脏,处理后于413nm处用分光光度法(QHS)测定其溶液的吸光度值。结果高剂量时,普萘洛尔、美托洛尔、MELE均能促进脾淋巴细胞抗体的形成。结论β受体阻断药具有增强体液免疫的作用。

羊焦虫病的防治对策

羊焦虫病作为一种常见血液寄生虫病,其病原细胞存储于羊红细胞中,对其持续性造成损伤,多发生于3~10月份。该疾病以患羊高热、贫血、黄疸等为核心状况,其致病率及死亡率较高,是造成养羊业经济损失的高危疾病。基于此,应对其疾病防治对策进行分析。

党参多糖对小鼠免疫功能的影响

目的探讨党参多糖对小鼠免疫反应的影响。方法分别用羊红细胞(SRBC)和卵清蛋白为抗原给小鼠注射后,灌服党参多糖,检测相应抗体生成水平。结果党参多糖组SRBC抗体生成水平和卵清抗体生成水平均显著高于对照组。结论党参多糖对正常小鼠抗体生成有增强作用。

琼脂糖板溶血法测定血清总补体活性

我们参考了国外文献并结合实验室条件作了改进,建立了测定血清总补体活性的琼脂糖板溶血法。 1 材料 1.1 绵羊红血球、琼脂糖、溶血素 1.2 巴比妥缓冲液巴比妥0.575g、巴比妥钠0.185g、NaCl8.5g、MgCl2·6H2O0.168g、CaCl2（无水）0.028g、

130例多聚人血清白蛋白受体阳性血清标本分析

某些乙型肝炎患者血清中有多聚人血清白蛋白受体(polymerized human serum albumin receptor, PHSA_R),因此检验血清PHSA_R阳性可做为临床判断乙肝病毒(hepatitis B virus, HBV)感染的慢性化和严重程度以及HBV复制的参考指标。