六妹羊肚菌子实体多肽分离纯化及抗氧化活性

采用碱提酸沉法获得六妹羊肚菌(Morchella sextelata)子实体蛋白质粗提物,以蛋白质酶解的水解度和粗多肽对DPPH自由基的清除率为指标,筛选蛋白酶进行酶解,所得粗多肽依次采用超滤法、DEAE-52纤维素层析法和Sephadex G-25层析法得到多肽,测定其抗氧化活性,通过二级质谱鉴定其氨基酸序列及相对分子质量,并测定不同温度、pH体外模拟胃液和肠液条件下多肽对DPPH自由基清除率的影响。结果表明:羊肚菌子实体蛋白质粗提物提取率为32.94%,其中蛋白质含量为78.3%;碱性蛋白酶酶解效果最好,纯化得到的SE-1对DPPH、ABTS和·OH自由基清除率分别为(86.7±1.75)%、(95.3±1.21)%和(80.6±1.35)%,具有较强的抗氧化活性;SE-1的氨基酸序列为Gly-Gly-Pro-Pro-Gly-Gly-Glu-Asp-Gly-Gly-Phe-Gly-Gly-Met,相对分子质量为1206;分别在25~55℃、pH4~8、体外模拟胃液和肠液消化处理2 h内,多肽对自由基的清除率较高。