茯苓多糖对磷酸铵镁致羊肾小管上皮细胞损伤的保护作用

氧化损伤在结石的形成过程中具有重要作用。茯苓多糖(PCP)具有抗炎、抗氧化、免疫调节等多种作用。本研究探讨PCP对磷酸铵镁(MAP)诱导的羊肾小管上皮细胞(RTECs)炎症和氧化应激的影响。结果显示,PCP显著减轻MAP诱导的氧化应激,表现为乳酸脱氢酶(LDH)和丙二醛(MDA)水平降低,超氧化物歧化酶(SOD)活性升高。PCP抑制MAP对炎症细胞因子IL-6和TNF-α的诱导作用。Western blot试验显示,PCP能增加Nrf2、 HO-1和NQO1的表达。综上所述,PCP通过提高细胞Nrf2、NQO1、HO-1的表达水平,从而对MAP诱导的肾小管上皮细胞氧化应激和炎症起到保护作用,这为羊尿结石的中药防控提供了依据。

磷酸铵镁对羊肾小管上皮细胞的损伤作用

为了研究磷酸铵镁(MAP)对羊肾小管上皮细胞(RTECs)的损伤作用,取20份结石羊尿沉渣进行镜检,并观察肾脏组织病理变化;其中在14份尿沉渣中观察到磷酸铵镁晶体,肾组织结构严重受损,RTECs变性坏死。观察尿结石羊症状并采集样品进行实验室检测。胶原酶组织块消化法分离培养羊RTECs,角蛋白18进行鉴定。MAP分别处理羊RTECs 12,24和48 h,CCK-8法检测羊RTECs的活力,Western blot法检测羊RTECs NF-κB信号通路的表达及Caspase-3、Bcl-2和Bax的水平,ELISA法检测细胞上清中IL-6和TNF-α的水平及LDH表达量。结果显示,尿结石羊尿液pH值比健康羊高,血液和尿液镁离子和磷离子水平也明显升高。胶原酶消化能获得较多且完整的肾小管节段,12 d左右细胞融合达80%~90%,呈典型的铺路石状,纯化后95%以上细胞CK-18鉴定为阳性。MAP能显著降低羊RTECs的活力,使IL-6和TNF-α的表达增加,细胞LDH含量增多。MAP组羊RTECs p-IκBα和p-NF-κB p65蛋白相对表达量增加,凋亡蛋白Caspase-3的表达明显增加,Bcl-2/Bax比值降低。综上所述,MAP能导致羊RTECs炎症反应与损伤,激活NF-κB通路,诱导细胞的凋亡。