屠宰羊胃容物对M-112木霉产孢活化制曲的影响

为探索屠宰羊胃容物对M-112木霉产孢活化制曲的影响,为利用屠宰场牛羊胃内容物生产动物益生菌剂、植物生物防治剂、(半)纤维素酶制剂及其饲料提供科学的基础数据,采用屠宰羊胃容物对M-112木霉的菌丝体生长量、产孢数量、木聚糖酶活性、活化代数及制曲等进行了研究。结果表明:1)M-112木霉在不含羊胃内容物的培养基Ⅰ中生长的菌丝体重量比含12%羊胃容物培养基Ⅰ的重,在含18%和28%羊胃容物的培养基Ⅰ中对M-112木霉菌丝的生长有促进作用,而且28%比18%的促生长作用更加明显,大于28%羊胃容物含量的培养基Ⅰ对木霉菌的生长促进作用急剧下降。2)M-112木霉在纯培养基Ⅱ中产生的孢子数较少;在16%～18%羊胃容物的培养基Ⅱ中对M-112木霉菌产孢有明显的促进作用;大于26%羊胃容物的培养基Ⅱ对木霉菌产孢有抑制作用。3)M-112木霉在含46.62%羊胃容物培养基Ⅲ中进行活化培养,从第5代开始产木聚糖酶的酶活达到稳定状态,保持在12 000～12 500 U/mL。4)利用M-112木霉第5代活化菌种,在含羊胃容物17%的培养基Ⅲ中,按1∶5经2次放大制曲,其酶活逐步增加,最大酶活力达到12 454 U/mL。

木霉菌发酵羊胃容物产木聚糖酶的分离纯化及特性

目的：为城市屠宰场牛羊胃容物类的生物垃圾型可再生资源的潜在工业化开发应用（城市无害鲜生物垃圾变废为宝的低碳生物循环经济工程）提供了部分可靠科学依据。方法：M-112木霉菌固态发酵羊胃容物的粗酶提取液，经20-60％饱和度的硫酸铵粗分级分离、SephadexG-25脱盐、SephadexG-150到SephadexG-100分子筛顺序纯化，通过蛋白质测定、酶活测定、SDS—PAGE和底物-PAGE电泳等。结果：制备到一种分子量约为64．7kDa的电泳纯木聚糖酶，其回收率为5．59％，纯化倍数10．43。比活力为253．36IU／mg。纯化出的木聚糖酶，经性质研究表明，其Km=11．20g／L，Vmax=0．70μmol／min；最适温度为65℃，最适pH为6．O，该酶在中温条件下稳定性好，在酸性至弱碱性（pH3．0～8．0）条件下稳定性好。结论：采用改良的凝胶色谱技术，首次纯化出木霉菌固态发酵羊胃容物所产的木聚糖酶。

M-112木霉固态发酵羊胃容物产木聚糖酶的条件优化

通过研究培养基料比、固液比、无机盐、接种量以及培养时间等单因素对M-112木霉固态发酵羊胃容物的影响,并采用正交实验设计优化了固态发酵条件。研究表明,M-112木霉固态发酵羊胃容物产木聚糖酶是可行的,影响产酶最主要的因素为接种量。优化的发酵条件为胃容物50%,玉米:麦麸=5:5,CaCl2浓度0.5%,初始pH值5.0,固液比1:3,每10 g干培养基接种量2 ml(孢子数1.2～1.6×108 cfu/ml),发酵时间72 h,发酵温度30℃。经优化后的酶活水平达到了138.504 IU/ml。较已报道的同种木霉的最高发酵酶活提高达3倍左右。

DY芽孢杆菌固态发酵羊胃容物产木聚糖酶培养条件的优化

本文以DY芽孢杆菌固态发酵羊胃容物为研究对象,通过羊胃容物添加量、营养基料比（玉米粉：麸皮）、固液比、接种量、初始pH、无机盐等单因素对固态发酵羊胃容物产木聚糖酶活力的影响,以及正交实验对发酵条件的优化,其筛选到的最优发酵条件为：每20g固态发酵培养基中,羊胃容物50%、营养基料50%（玉米粉：麸皮=2：1）、固液比1：4、接种量6ml（3~5×107cfu/ml）、初始pH7.0、K＋5g/L、Na＋4g/L、Mn2＋0.3g/L、35℃下发酵48h,其酶活力达到95.03 U/ml。