羊膜提取液治疗兔干眼症的实验研究

目的:研究羊膜提取液对苯扎氯铵诱导的兔干眼的治疗作用。方法:选择新西兰大白兔26只(26眼,均为右眼),使用0.2%的苯扎氯铵制作兔干眼症模型,随机分为两组:对照组(A组,13眼)使用磷酸盐缓冲液(phosphate buffered saline,PBS)滴眼,实验组(B组,13眼)使用1%羊膜提取液(amniotic extraction)滴眼,4次/d。另选取2只兔作为正常对照。分别于治疗前和治疗1、2、4、8wk行Schirmer I试验(SchirmerⅠtest,SⅠt)、角膜荧光素染色(corneal fluorescein staining,FL)、泪液总蛋白含量、淀粉酶活性、乳铁蛋白、溶菌酶含量检测,并进行结膜印迹细胞检查。结果:不同组间、不同时间点间SⅠt、FL、溶菌酶活性及结膜杯状细胞密度相比,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前两组SⅠt、FL、溶菌酶活性及结膜杯状细胞密度相比,差异无统计学意义(P>0.05);治疗1、2、4、8wk后,B组SⅠt、FL、溶菌酶活性较治疗前均有不同程度改善,差异有统计学意义(P<0.05),B组结膜杯状细胞密度与治疗前相比有所增加,但差异无统计学意义(P>0.05);治疗1、2、4、8wk后,A组SⅠt、溶菌酶活性及结膜杯状细胞密度均有不同程度下降,差异有统计学意义(P<0.05),A组FL评分与治疗前相比有不同程度增加,但差异均无统计学意义(P>0.05)。A、B两组各时间点SⅠt、FL、溶菌酶活性及结膜杯状细胞密度相比,差异均有统计学意义(P<0.05)。同一组内不同时间点,泪液中总蛋白量、乳铁蛋白、淀粉酶活性差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前A、B两组泪液中总蛋白量、乳铁蛋白、淀粉酶的活性相比,差异无统计学意义(P>0.05);治疗4、8wk后两组泪液中总蛋白量、乳铁蛋白、淀粉酶的活性相比,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论:羊膜提取液能有效治疗兔干眼症,具有良好的临床应用前景。

人羊膜匀浆提取液对角膜碱烧伤后新生血管PEDF和VEGF表达及角膜新生血管的影响

目的:探讨人羊膜匀浆提取液对角膜碱烧伤后新生血管形成过程中色素上皮衍生因子(PEDF)和血管内皮生长因子(VEGF)表达及角膜新生血管的影响。方法:选取2015-06/2016-06在佛山爱尔眼科医院治疗的角膜碱烧伤患者32例37眼,随机分为A、B两组。其中A组17例19眼,采用40mg/L人羊膜匀浆提取液治疗,B组15例18眼,采用3g/L泼尼松龙滴眼液治疗。在治疗不同的时间点(1、4、7、14、21、28d)观察角膜新生血管的生长,同时检测新生血管形成过程中PEDF及VEGF的表达水平。结果:A组患者在使用人羊膜匀浆提取液治疗后,PEDF表达水平显著高于B组,差异有统计学意义(P=0.001),在治疗28d后,PEDF表达水平达到了0.721±0.314,而B组患者PEDF表达水平仅有0.538±0.253,两组患者PEDF表达水平间的差异具有统计学意义(P<0.05);A组VEGF表达水平在不同的时间点检测时均低于B组,在治疗28d后,A组患者VEGF表达水平为0.152±0.020,B组患者VEGF表达水平为0.302±0.031,两组患者VEGF表达水平间的差异具有统计学意义(P<0.05);A组患者角膜新生血管数量显著低于B组患者,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:人羊膜匀浆提取液可以促进患者角膜碱烧伤后新生血管形成过程中PEDF表达。

羊膜匀浆提取液对大鼠碱烧伤后角膜瘢痕形成的抑制作用

目的观察大鼠角膜碱烧伤使用羊膜匀浆提取液(extraction of amniotic membrane,EAM)后角膜瘢痕的变化,探讨羊膜匀浆提取液应用于角膜碱烧伤的临床价值及作氉用机理。方法取SD大鼠40只随机分为EAM组(20只)和对照组(20只),所有大鼠通过1 mol·L-1的NaOH溶液建立右眼角膜碱烧伤模型。EAM组行EAM滴眼,每天4次,对照组用PBS缓冲液滴眼。通过裂隙灯显微镜下观察大鼠角膜透明性,角膜共聚焦显微镜动态观察大鼠角膜超微结构的变化,计算肌成纤维细胞的数量。结果碱烧伤后28 d,EAM组的角膜透明度评分明显好于对照组,两组分别为2.36±0.81和3.36±1.12(P<0.01)。碱烧伤后第9天、第11天、第14天EAM组肌成纤维细胞密度均小于对照组,各时间点EAM组、对照组分别为(201±39)个·mm-2、(291±48)个·mm-2,(248±84)个·mm-2、(349±105)个·mm-2,(108±57)个·mm-2、(175±62)个·mm-2,两组之间差异均有统计学意义(均为P<0.01)。结论新鲜EAM可以有效抑制碱烧伤后肌成纤维细胞的激活和增殖,减少角膜瘢痕的形成。

人羊膜匀浆提取液抑制大鼠角膜碱烧伤后新生血管生成

目的:研究人羊膜匀浆提取液对角膜碱烧伤后新生血管形成过程中色素上皮衍生因子(pigment epithelium-derived fac-tor,PEDF)和血管内皮生长因子(vascular-endothelial growthfactor,VEGF)的表达影响及对角膜新生血管的抑制作用。方法:SD大鼠54只建立双眼角膜碱烧伤模型,随机分为3组:A组为3g/L氧氟沙星滴眼液组,B组为10g/L泼尼松龙滴眼液组,C组为新鲜人羊膜匀浆提取液组,并分别于治疗后不同时间点进行角膜新生血管增生情况观察,HE染色病理学观察,免疫组化行VEGF和PEDF的表达检测。结果:B,C组比A组新生血管增生少,多形核白细胞(poly-morphonuclear leukocyte,PMN)浸润程度轻,VEDF表达水平显著降低,但B,C两组之间VEDF表达无显著性差异(P>0.05)。C组PEDF表达水平显著高于A,B组(P<0.01),但A,B之间PEDF表达无显著性差异(P>0.05)。结论:新鲜人羊膜匀浆提取液能减少碱烧伤后角膜组织中PMN浸润,增强角膜组织PEDF的表达水平。

羊膜提取液抑制兔Epi-LASIK术后haze形成的作用和机制

目的:探讨羊膜提取液(AE)抑制兔微型角膜刀法准分子激光角膜上皮瓣下磨镶术(Epi-LASIK)后角膜上皮下雾状混浊(haze)形成的作用和机制。方法:新西兰白兔36只72眼按照随机数字表法分为三组:AE组、激素组和溶媒对照组。构建Epi-LASIK动物模型,术后AE组滴用AE眼液,激素组滴用1g/L磷酸地塞米松眼液,溶媒对照组滴用不含AE的溶媒眼液。术后1、4、8wk在裂隙灯下进行haze分级评估。HE染色观察角膜上皮的修复,免疫组织化学法观察角膜上皮细胞NF-kB P65蛋白的表达。用ELISA法检测炎症细胞因子(TNF-α、TGF-β1和IL-1β)和抗炎症细胞因子(IL-4、IL-10和IL-13)的表达水平。结果:HE染色结果显示,与激素组和溶媒对照组比较,Epi-LASIK术后1wk,AE组兔角膜上皮基底细胞形态较均匀,排列较规则;术后4wk时,AE组浅基质层内出现少量新生胶原纤维,排列较规则,形成少量瘢痕;术后8wk,AE组角膜浅基质层见少量新生胶原纤维,排列规则,极少形成瘢痕。在术后早期(1wk和4wk),AE组与激素组、溶媒对照组相比,具有明显抑制炎症因子(TNF-α、TGF-β1和IL-1β)和促进抗炎症因子(IL-4、IL-10和IL-13)分泌的作用,组间比较差异有显著统计学意义(P<0.01)。而且,在术后早期(1wk和4wk),AE组与激素组、溶媒对照组相比,角膜上皮细胞NF-kB通路关键组份P65蛋白浅染,细胞核淡染,明显抑制NF-kB信号通路的激活。结论:羊膜提取液可能通过抑制角膜上皮细胞的NF-kB信号通路,减轻炎症反应,从而减少胶原与瘢痕形成和haze的发生。

羊膜匀浆提取液抑制兔角膜新生血管及超微结构的研究

目的: 观察羊膜匀浆提取液对大鼠碱烧伤后抑制角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)以及对角膜超微结构的影响,探讨羊膜匀浆提取液(amnioticmembrane,AM)临床应用的合理浓度。方法: SD大鼠40只40眼,通过1mol/L的NaOH建立角膜碱烧伤模型。对照组(A组)行PBS液点眼4次/d,其余三组(B、C、D组)分别行240,400,560μg/mL的AM点眼。通过裂隙灯显微镜记录并比较四组角膜新生血管的生长情况。角膜共聚焦显微镜动态观察损伤后角膜的超微结构。结果: 损伤后的各个时间点,C组的角膜新生血管面积与A、B两组均有显著性差异(P<0.05),即随着羊膜匀浆提取液浓度的增加,其抑制角膜新生血管的作用增强。但是C、D两组之间的CNV面积差异无统计学意义。角膜共聚焦显微镜观察发现,羊膜匀浆提取液治疗组的多形核细胞浸润明显少于对照组。结论: 羊膜匀浆提取液对碱烧伤后角膜新生血管的抑制作用呈剂量依赖性,但当浓度达到400μg/mL,其对角膜新生血管的抑制作用趋于稳定。这可能部分与羊膜匀浆提取液抑制碱烧伤炎症反应有关。

共聚焦显微镜观察人羊膜匀浆提取液对大鼠碱烧伤后角膜超微结构的影响

目的通过角膜共聚焦显微镜活体动态观察人羊膜匀浆提取液对大鼠角膜碱烧伤后角膜超微结构的影响,探讨羊膜匀浆提取液应用于角膜碱烧伤后的临床价值及作用机理。方法 SD大鼠40只(40只眼),通过1 mol/L的氢氧化钠(NaOH)溶液建立右眼角膜碱烧伤模型。随机分为实验组和对照组,实验组行人羊膜匀浆提取液(AM)点眼,每日4次,对照组用PBS液点眼,每日4次。碱烧伤后行共聚焦显微镜动态观察大鼠角膜各层细胞数量以及形态的变化。结果实验组角膜上皮层炎症细胞形成晚,数量较少;基质层纤维结构排列较为规则,肌成纤维细胞的增殖和激活较少、角膜新生血管数量少,管径细。结论新鲜人羊膜匀浆提取液可以有效促进大鼠碱烧伤后角膜上皮细胞的增殖,抑制炎症细胞浸润,减少角膜新生血管的形成,抑制成纤维细胞的激活和增殖,减少角膜瘢痕的形成,有利于碱烧伤后大鼠角膜的透明愈合。

羊膜匀浆提取液与羊膜移植对大鼠碱烧伤后新生血管抑制作用的比较

目的比较羊膜匀浆提取液和羊膜移植对大鼠角膜碱烧伤后新生血管的影响。方法 SD大鼠30只随机分为三组,每组10只。使用3 mm直径圆形滤纸片浸入1 mol·L-1,NaOH溶液中60 s后放置于大鼠角膜中央建立右眼角膜碱烧伤模型。A组行PBS(磷酸缓冲盐溶液)液点眼,B组行羊膜移植术,C组行AM(羊膜匀浆提取液)点眼。通过裂隙灯显微镜观察三组的角膜新生血管情况。结果碱烧伤后11 d,三组的角膜新生血管面积分别为(49.12±2.05)、(35.17±1.95)、(34.04±1.37)mm2。B、C两组的新生血管面积比A组显著减少(q A、B=15.59,P A、B<0.001,q A、C=19.340 6,P A、C<0.001),而B、C组之间没有显著性差异(q=1.499 4,P>0.05)。结论新鲜人羊膜匀浆提取液与羊膜移植均能有效减少角膜新生血管形成。

人羊膜匀浆提取液治疗眼表疾病的基础研究进展

人羊膜匀浆提取液治疗眼表疾病是近几年来发展较快的一项眼科技术。羊膜匀浆提取液比羊膜移植术使用更加方便快捷。在眼表疾病的基础研究中应用广泛。本文就羊膜匀浆提取液的制备,理化性质以及眼表疾病的应用进展作一综述。

人羊膜上皮细胞混悬液治疗兔急性角膜碱烧伤的实验研究

目的:结合体外细胞实验和在体动物实验研究羊膜上皮细胞(amnion epithelial cell,AEC)混悬液对兔角膜上皮细胞(cornea epithelial cell,CEC)生物学行为的影响及对急性角膜碱烧伤的治疗作用。方法:细胞实验:实验组将AEC及CEC于Transwell小室中培养,上室为AEC混悬液,下室接种CEC,对照组上室仅为培养基,于不同时间点行CCK-8法检测CEC的增殖活性;免疫细胞化学法检测PCNA表达;细胞划痕法观察细胞迁移能力。动物实验:采用改良的兔角膜碱烧伤模型制备方法:将10mm直径环钻轻置于角膜中央,向环钻中央加入NaO H溶液,1min后去环钻迅速冲洗兔眼,随机分三组(空白对照、AEC混悬液滴眼液治疗组、结膜下注射治疗组),于术后每周行裂隙灯显微镜及荧光素钠染色观察角膜情况。第28d摘除眼球并固定行HE染色,免疫组织化学法检测角膜VEGF、mcp-1的表达。结果:CCK-8法示AEC混悬液作用后的CEC增殖活性增强(P<0.05);免疫细胞化学法显示PCNA阳性表达增强(P<0.05);划痕试验示AEC干预后CEC迁移加快。动物实验表明,滴眼液组和结膜下注射组的角膜恢复时间明显缩短,CNV面积均少于对照组(P<0.05),滴眼液组和结膜下注射组之间差异无统计学意义(P>0.05);HE染色示治疗组角膜组织炎症细胞浸润更少,组织排列更规则;免疫组化显示组织中VEGF、mcp-1表达更低(P<0.05),而滴眼液组和结膜下注射组之间差异无统计学意义(P>0.05)。结论:AEC混悬液促进CEC增殖和迁移,影响CEC生物学行为变化。经AEC混悬液点眼及结膜下注射治疗兔眼碱烧伤后角膜修复加快,且两种方法抑制炎症反应及CNV形成,有望成为治疗急性角膜碱烧伤的新方法。

不同浓度人羊膜匀浆上清液培养大鼠许旺细胞的增殖

背景:许旺细胞是周围神经修复过程的重要细胞,而研究发现人羊膜细胞分泌的多种细胞因子能够促进许旺细胞增殖。目的:观察不同浓度人羊膜匀浆上清液对鼠许旺细胞(RSC96)生长的影响。方法:使用含体积分数20%胎牛血清的高糖DMEM培养基原代培养RSC96细胞株,传代至第2代用于实验研究。根据人羊膜匀浆上清液在培养基中的不同体积分数(0,10,15,20,25%)分组。结果与结论:人羊膜匀浆上清液的总蛋白浓度为675 mg/L,表皮生长因子、碱性成纤维生长因子和血管内皮生长因子浓度分别为(470.625±2.546),(4.121±0.026)和(0.172±0.002)ng/L。在培养第1-7天,10%和15%人羊膜匀浆上清液组的增殖率大于20%和25%人羊膜匀浆上清液组(P<0.05);10%、15%人羊膜匀浆上清液组显示出促进细胞增殖的作用,而20%、25%人羊膜匀浆上清液组显示出抑制细胞增殖的作用;各实验组的细胞活力与对照组接近(P>0.05)。提示人羊膜匀浆上清液低浓度时(10%和15%)具有促进RSC96增殖作用,高浓度时(20%和25%)抑制RSC96增殖。

前节相干光断层扫描观察羊膜匀浆提取液对兔眼滤过手术疗效的影响

目的通过眼前节相干光断层扫描(AS-OCT)观察羊膜匀浆提取液对兔滤过手术疗效的影响,探讨羊膜匀浆提取液对结膜瘢痕的抑制作用,以及前节OCT在滤过泡观察中的临床应用价值。方法新西兰白兔20只,随机分为对照组和羊膜匀浆液(AM)组。均取右眼行标准小梁切除术。术后A组行氯霉素滴眼液点眼,B组行AM点眼。通过前节OCT观察两组滤过泡形成情况,以及眼压的变化。结果滤过术后7、14、28 d,AM组的眼压明显低于对照组,术后14、28 d,AM组功能性滤过泡的有效率明显高于对照组。结论新鲜人羊膜匀浆提取液可以有效抑制结膜瘢痕形成,促进功能性滤过泡的形成,有效减低眼压。而前节OCT活体动态观察滤过泡内部结构图像清晰、客观稳定。

人羊膜匀浆上清液治疗兔角膜碱烧伤的病理研究

目的:观察人羊膜匀浆上清液促进兔角膜碱烧伤后角膜上皮和基质修复的作用,为临床上应用人羊膜匀浆上清液点眼治疗眼碱烧伤提供理论依据。方法:将制备的羊膜匀浆上清液点眼治疗兔角膜碱烧伤,并对治疗后的角膜照相观察角膜上皮愈合和基质修复情况。结果:羊膜匀浆上清液治疗角膜碱烧伤后眼充血明显减轻,角膜上皮愈合较快,角膜上皮细胞排列整齐,基质中炎症细胞浸润减轻且胶原纤维排列整齐。结论:早期应用羊膜匀浆上清液能促进兔角膜碱烧伤后角膜的愈合及膜基质有序修复。

人羊膜匀浆上清液对兔角膜碱烧伤后上皮愈合的影响

目的:观察人羊膜匀浆上清液对兔角膜碱烧伤后角膜上皮愈合的影响。方法:将制备的不同浓度的羊膜匀浆上清液点眼治疗兔角膜碱烧伤,筛选出最佳浓度的羊膜匀浆上清液,同时设立羊膜匀浆上清液组、bFGF(贝复舒眼液)组和对照组,对治疗后的角膜愈合照相并行角膜上皮愈合率的比较。结果:羊膜匀浆上清液治疗角膜碱烧伤后角膜上皮愈合较快。结论:羊膜匀浆上清液能促进兔角膜碱烧伤后角膜上起愈合,早期应用即能发挥作用。

自制羊膜提取液在兔眼准分子激光屈光性角膜切削术后的应用研究

目的:探讨自制羊膜提取液对兔眼准分子激光屈光性角膜切削术(photorefractive keratectomy,PRK)后角膜上皮下雾状混浊(Haze)的影响。方法:常规方法获取新鲜健康人羊膜,保留上皮细胞,反复冻融、过滤,获得羊膜匀浆液,室温下保存备用。选择健康新西兰大白兔27只,在相同条件下,双眼行PRK,术后实验动物随机分为实验组、对照组、空白组,每组9只兔,18只眼。术后双眼给予局部抗生素眼药水,术后48 h实验组滴用羊膜提取液,对照组用0.1%磷酸地塞米松眼液,空白组用不含羊膜提取液的赋形剂。分别于术后1、2、4、8周记录角膜Haze情况并按Fantes等级标准进行评分,行眼前节照相记录Haze的形态。随机每组选择3只兔作为病理观察用,分别于术后1、4、8周各处死1只,摘除眼球做病理切片检查,观察术区角膜、炎症细胞及成纤维细胞情况。结果:PRK术后早期,3组动物角膜荧光素钠染色均为阳性,但多数角膜上皮缺损均在术后3d修复。PRK术后Haze的发生率为100%,所有术眼均在术后1周左右开始出现程度不同的Haze,术后4周时Haze尤其明显,直至术后8周。实验组和对照组角膜Haze形成程度相似,且明显低于空白组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:羊膜提取液具有促进兔角膜上皮修复的作用,并能减少PRK术后兔Haze的形成。

羊膜匀浆液对兔小梁切除术后滤过泡及TGFβ1、CTGF表达的影响

目的研究羊膜匀浆提取液在兔实验性小梁切除术后对滤过泡及TGFβ1、CTGF表达的影响。方法将30只新西兰大白兔随机平均分为实验组和对照组,选右眼行标准小梁切除术。实验组于术后当天开始每天用羊膜匀浆液点眼,对照组单纯用氯霉素滴眼液点眼。在不同时间点分别作临床及病理观察。结果共22眼形成功能性滤过泡,其中实验组14眼,对照组8眼(P<0.05)。眼压除术前与术后2d差异无统计学意义(P>0.05)外,其余观察点差异均有统计学意义(P<0.05)。实验组成纤维细胞(Fb)数目较对照组少(P<0.05)。免疫组化染色观察TGFβ1、CTGF的表达,实验组低于对照组(P<0.05)。结论羊膜匀浆上清液点眼无并发症发生,且能增强滤过泡滤过功能及降眼压效果,对滤过泡TGFβ1、CTGF表达有抑制作用。

人羊膜匀浆上清液对脂多糖致伤的大鼠肺微血管内皮细胞增殖及分泌炎症因子的影响

目的：探讨人羊膜匀浆上清液（hAHS）对脂多糖（LPS）致伤的大鼠肺微血管内皮细胞（RPMVECs）增殖及其分泌促炎因子的影响。方法：用新鲜人羊膜制备hAHS,用考马斯亮蓝法和ELISA法分别测定hAHS中总蛋白和表皮生长因子（EGF）、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）、血管内皮生长因子（VEGF）、白介素-4（IL-4）、IL-10、血管生成素-1（Ang-1）、人β-防御素2（HBD2）的含量。MTT法检测不同体积分数hAHS（0、10%、15%、20%、25%）作用于RPMVECs后细胞增殖活性的变化,确定hAHS促进RPMVECs增殖的最佳浓度。根据共培养条件不同,将RPMVECs随机分为4组：N组（10%FBS＋DMEM/F12）,A组（10%FBS＋DMEM/F12＋15%hAHS）,B组（10%FBS＋DMEM/F12＋LPS）和C组（10%FBS＋DMEM/F12＋15%hAHS＋LPS）。各组细胞在干预后0、12、24、48、72h用MTT法测定吸光度值（A值）,并分别于培养6、8、10、12、24h时用ELISA法测定RPMVECs培养上清液中TNF-α、IL-6、IL-8的含量。结果：hAHS中总蛋白浓度为（725.125±12.625）mg/L,其中EGF、bFGF、VEGF、IL-4、IL-10、Ang-1、HBD2的浓度分别为（504.785±4.665）、（4.426±0.138）、（0.185±0.006）、（25.650±4.104）、（13.733±2.197）、（15.561±0.496）和（4.763±0.714）ng/L。hAHS的体积分数在10%~20%时均具有促进RPMVECs增殖的作用且以15%hAHS培养后第7、9天的增殖率最佳,而25%hAHS在第7、9、11天使RPMVECs增殖率小于0%hAHS组（P〈0.05）。A组48和72h细胞增殖活性较N组显著增加,B组24、48和72h的增殖活性较N组显著降低;C组24、48和72h的增殖活性较B组显著升高（P〈0.05）。ELISA结果显示,B组各时间点的IL-6和TNF-α的含量以及8、10、12和24h的IL-8含量均显著高于N组（P〈0.05）;C组10和12h的IL-6含量,8、10、12和24h的IL-8含量及各时间点的TNF-α含量均显著低于B组（P〈0.05）。结论：hAHS含有促进组织修复、调节免疫反应、降低血管通透性及杀伤致病微生物的多种生长因子、细胞因子,对LPS致伤的RPMVECs增殖具有促进作用,并减少致伤后炎症因子分泌。

塞来昔布与羊膜匀浆提取液对兔角膜热烧伤后角膜新生血管面积及基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的影响

目的比较塞来昔布与羊膜匀浆提取液对兔角膜热烧伤后角膜新生血管(corneal neovascularization,CNV)面积及基质金属蛋白酶-2(matrix metallo-proteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)表达的影响,为临床上塞来昔布治疗CNV提供理论依据。方法建立36只兔角膜热烧伤动物模型,随机分为3组:阴性对照组、羊膜匀浆提取液组、塞来昔布组,每组12只,8只用于观察,4只用于取材。各组兔均于造模后第1天开始球结膜下注射,至造模后第14天;阴性对照组注入90 g·L^(-1)生理盐水0.1 mL,羊膜匀浆提取液组注入羊膜匀浆提取液0.1 mL,塞来昔布组注入8 mg·mL^(-1)塞来昔布溶液0.1 mL。对比热烧伤后4 d、7 d、14 d在裂隙灯显微镜下所观察到的各组角膜的组织形态及新生血管的生长状况,并测算CNV面积;各组均于热烧伤后第7天随机取4只兔完整角膜,行免疫组织化学染色并用计算机图像分析系统检测MMP-2、MMP-9的表达。结果角膜热烧伤后第4天,阴性对照组、羊膜匀浆提取液组、塞来昔布组都可见不同程度的角膜水肿,角膜缘血管充血扩张,新生的小血管芽呈毛刷状,垂直角膜缘切线向内生长。热烧伤后4 d、7 d、14 d,CNV面积阴性对照组为(11.32±1.11)mm^2、(38.49±4.64)mm^2、(43.30±4.39)mm^2;羊膜匀浆提取液组为(9.69±1.30)mm^2、(31.15±4.85)mm^2、(37.19±5.27)mm^2;塞来昔布组为(8.47±1.20)mm^2、(30.31±4.93)mm^2、(36.69±3.54)mm^2。热烧伤后4 d、7 d、14 d,阴性对照组的CNV面积均明显大于羊膜匀浆提取液组和塞来昔布组,差异均有统计学意义(均为P<0.05);羊膜匀浆提取液组的CNV面积与塞来昔布组相比,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。热烧伤后第7天MMP-2和MMP-9表达阴性对照组大于羊膜匀浆提取液组和塞来昔布组,差异均有统计学意义(均为P<0.05);羊膜匀浆提取液组与塞来昔布组相比,差异均无统计学意义(均为P>0.05)。结论塞来昔布与羊膜匀浆提取液均能有效抑制角膜热烧伤后新生血管的生长,可能与其抑制MMP-2、MMP-9在热烧伤后角膜中的表达有关。

乳酸钠林格液羊膜腔灌注术治疗晚期妊娠羊水过少的临床效果分析

目的探究在晚期妊娠羊水过少治疗中乳酸钠林格液羊膜腔灌注术的临床效果。方法选取68例晚期妊娠羊水过少患者,采用随机数字表法分成对照组与研究组,每组34例。对照组患者采用常规治疗,研究组患者采用乳酸钠林格液羊膜腔灌注术治疗。比较两组患者羊水污染率、剖宫产率、胎儿窘迫发生率及治疗前后羊水指数(AFI)。结果研究组患者羊水污染率为17.65%,明显低于对照组的41.18%,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组患者剖宫产率、胎儿窘迫发生率为5.88%、2.94%,明显低于对照组的23.53%、17.65%,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前,两组患者AFI比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后,两组患者AFI明显大于治疗前,研究组AFI为(8.34±1.05)cm,明显大于对照组的(4.34±0.78)cm,差异有统计学意义(P<0.05)。结论乳酸钠林格液羊膜腔灌注术治疗晚期妊娠羊水过少临床效果突出,可提高患者AFI,降低羊水污染率,控制污染程度,改善分娩结局和新生儿结局。

羊膜穿刺术的临床病历分析

目的:分析羊膜液细胞染色体核型,了解高风险人群中异常染色体出现的频率、类型。方法:对51例具有产前诊断指征即母血清筛查染色体异常高风险,高龄孕妇,不良产史,夫妇一方有染色体异常,曾生育过染色体病患儿的孕妇等进行孕中期羊膜穿刺术,抽取羊膜液进行培养与染色体分析。结果:发现异常核型3例,异常检出率为5.88%。证实了羊膜液细胞培养与染色体核型分析,在产前诊断中起重要作用。结论:对具有产前诊断指征的孕妇进行产前诊断,羊膜液细胞培养及染色体核型分析,可防止缺陷儿的出生,提高人口素质。