不同热处理条件下羊血浆蛋白体外模拟消化研究

目的研究不同热处理条件下羊血浆蛋白的体外模拟消化特性及其蛋白质二级结构的变化规律。方法采用胃蛋白酶对热处理后的羊血浆蛋白进行体外模拟消化,利用茚三酮法、十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdodecylsulfatepolyacrylamidegelelectrophoresis,SDS-PAGE)、表面电位(Zeta potential)及粒径、傅立叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FTIR)等表征羊血浆蛋白的水解程度及消化产物的结构特性。结果热处理可使羊血浆蛋白消化产物水解度增加,90℃热处理时水解度达到最大值,热处理可产生更多的低分子量组分,消化降解更为完全。90℃热处理时羊血浆蛋白消化产物的粒径分布单一,聚集程度最高。70~90℃热处理组的红外光谱显示酰胺Ⅰ带向低波数方向有不同程度红移,随着热处理程度的增加,羊血浆蛋白消化产物中α-螺旋结构含量先增加后减少,其余二级结构含量均无明显变化规律。结论热处理对羊血浆蛋白体外模拟消化均有一定的促进作用,从蛋白质变性的角度考虑,羊血浆蛋白的热处理强度不宜超过90℃20 min。

羊血浆中凝血酶的提取工艺及稳定性研究

以羊血浆为原料提取凝血酶,采用等电点沉淀法从羊血浆中提取凝血酶原,经钙离子激活得到凝血酶,通过凝血酶效价测定、蛋白质浓度测定,计算出凝血酶的比活力。结果发现采用等电点沉淀法提取的凝血酶原经激活后得到的凝血酶总活力为4850,比活力为9.47 U/mg。表明该工艺简洁可行,适合于工业化生产。

羊血浆蛋白对高温杀菌鱼糜制品凝胶特性的影响

为改善高温杀菌鱼糜制品的品质,研究羊血浆蛋白对121℃处理鱼糜制品凝胶特性的影响。以白鲢鱼糜为原料,测定羊血浆蛋白的添加对鱼糜凝胶质构特性、凝胶强度、持水性、折叠性、白度和流变特性的影响,并通过测定分子间作用力和溶解率的变化探究其影响机制。结果表明,与对照组相比,随着羊血浆蛋白的添加,高温处理鱼糜制品的硬度、弹性、胶粘性和咀嚼性显著增大(P<0.05),持水性显著增强(P<0.05),折叠性能增强,白度降低。当添加量为2%时,鱼糜制品的凝胶强度增加了92.88%。分子间作用力和溶解率分析显示,添加羊血浆蛋白能够提高体系氢键和非二硫共价键含量,从而改善高温处理鱼糜制品凝胶品质。

羊血浆蛋白对鲢鱼鱼糜凝胶特性的影响

以鲢鱼鱼糜为原料,研究添加羊血浆蛋白(0.5%、1%、1.5%、2%、2.5%、3%,质量分数)对鱼糜凝胶的质构特性、凝胶强度、持水性、白度、流变特性及溶解率的影响.结果表明,与空白组对比,随着羊血浆蛋白添加量的增加,鱼糜凝胶的硬度、咀嚼性、胶黏性显著增大(P<0.05),白度显著降低(P<0.05);当添加的质量分数为2%时,持水性增强了2.16%.流变结果表明,添加羊血浆蛋白,鲢鱼鱼糜的G'和G''显著增加(P<0.05).溶解率分析显示,当添加2%羊血浆蛋白时,鱼糜凝胶溶解率最低,与空白组相比,降低了18.37%,说明羊血浆蛋白可以提高非二硫共价键(尤其是ε-(γ-Glu)-Lys)的含量,为有效利用羊血浆蛋白,开发高品质淡水鱼糜制品提供了理论依据.

绵羊血浆法检测肝素钠效价的影响因素及改进方法的研究

目的研究绵羊血浆法检测肝素钠效价的影响因素和改进方法。方法参照羊血浆法,研究测定过程产生气泡、样品中的固形物、样品pH值、NaCl浓度对肝素钠效价测定的影响。结果气泡对效价测定的影响较小,固形物是影响效价测定主要因素,含固形物酶解液的效价为（2.87±0.01）U/mL,除去固形物后的效价为24.60U/mL,提升了约8.5倍。去除固形物的样品,pH为7.5~9.5时对效价测定影响不大,pH在6.5与7.0时,对效价的测定影响较小;而样品中存在固形物时,表现出随着样品pH的上升,效价也上升,样品在pH9.0时的效价是样品在pH6.5时的3.4倍。酶解液固形物主要为：蛋白47.86%、NaCl39.16%、脂肪4.12%,其中蛋白主要为小分子多肽占91.34%。NaCl浓度对样品测定没有影响,小分子多肽是影响效价测定主要因素。该改进方法回收率在98.92%~101.53%之间。结论改进方法可靠,通过测定值计算出的肝素钠产值与实际生产过程中的肝素产值一致。该方法可用于肝素钠生产过程每个环节中肝素效价的测定。

羊血浆法测定海普林软膏中肝素钠生物效价的探讨

目的研究用羊血浆法代替兔全血法检测海普林软膏中肝素钠生物效价的可行性。方法通过比较标准品和供试品在相同浓度下加入同量羊血浆 ,经重钙化一定时间后的凝固程度 ,测定供试品效价。结果供试品效价为340 .0u/g ,相当于标示量的 97.1 % ,经兔全血法复核符合规定。结论此法操作简单 ,结果准确 ,重现性好 ,可用于产品的质量控制。

肝素钠的兔血浆与羊血浆效价测定平行性考察

目的 :采用兔血浆法和羊血浆法测定肝素钠的效价 ,比较两种方法在临床操作过程中的可行性并考察两种方法测定结果的平行性。方法 :采用兔血浆和羊血浆法。结果 :羊血浆法比兔血浆法易于掌握 ,误差较小。结论

pH对羊血浆蛋白热诱导凝胶特性的影响

采用质构、动态流变分析等方法,研究了p H对羊血浆蛋白热诱导凝胶特性的影响。研究结果表明,p H对羊血浆蛋白热诱导凝胶特性具有显著影响(P<0.05)。p H 5.0时,羊血浆蛋白热诱导凝胶硬度最小且保水性较差,微观结构粗糙、松散、孔径较大,为典型的颗粒状凝胶结构;p H 8.6时,热诱导凝胶的硬度、保水性最大,且具有致密有序的微观结构,是典型的良好线状凝胶。p H 5.0和8.6时羊血浆蛋白热胶凝过程中储能模量-温度曲线均呈现"稳定于0 Pa附近后骤升"的两段式变化;p H 5.0时,羊血浆蛋白的变性温度为71.5℃,p H 8.6时为80.9℃,与其凝胶点温度一致。SDS-PAGE电泳结果表明球蛋白与白蛋白聚集体是形成羊血浆蛋白凝胶体的主要蛋白,其中p H 5.0时,部分51 k U的蛋白质先以二聚体、再以多聚体的形式进行聚集。本研究表明p H可以调控和改变羊血浆蛋白热诱导凝胶。

羊血浆蛋白抗氧化肽酶法制备与工艺优化

以羊血浆蛋白为原料,采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶、糜蛋白酶7种蛋白酶进行酶解,以酶解物的总抗氧化能力和水解度为评价指标,确定最佳的蛋白酶;采用单因素试验方法和正交试验方法对温度、pH和酶解时间等因素进行优化;采用Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳分析羊血浆蛋白抗氧化肽分子量分布。结果表明,碱性蛋白酶酶解羊血浆蛋白过程中,其酶解物的总抗氧化能力均显著高于其他6种蛋白酶,水解度仅次于风味蛋白酶,显著高于其他5种蛋白酶(p<0.05);影响碱性蛋白酶酶解羊血浆蛋白获得抗氧化肽的因素主次顺序为温度<酶解时间<pH;结论:碱性蛋白酶是制备羊血浆蛋白抗氧化肽的最佳蛋白酶,碱性蛋白酶酶解羊血浆蛋白获得羊血浆蛋白抗氧化肽的最佳工艺条件为酶解6 h,温度55℃,pH11,且其组成复杂,由多种小分子肽组成。

肝素钠及其制剂效价测定方法的改进

目的建立用羊血浆法测定肝素钠及其制剂效价方法,并与现行药典的兔全血法比较。方法在梯度剂量的标准溶液和供试品溶液中加入等量的羊血浆,经重钙化一定时间后观察凝固程度,测定供试品效价。结果羊血浆法与兔全血法测定结果比较,无显著性差异(P>0.05),羊血浆法精密度、重现性良好(RSD<1.0%)。结论羊血浆法准确、可靠,较兔全血法操作更简便,适于肝素钠及其制剂的效价测定。

Optimization of Drying Process for Plasma Protein from Tibetan Sheep

Fresh blood of Tibetan sheep was subjected to protein separation and spray drying, and the effects of drying process on water content, yield and nitrogen soluble index of plasma powder from blood of Tibetan sheep were investigated. The results showed that the optimum separation parameters were a centrifugal speed at 6 000 r/min, centrifugal time of 20 min, a mass fraction of dry matter of 20%, an inlet air temperature at 180 ℃ and a feed rate at 400 ml/h, under which the plasma protein was a pale yellow powdery solid, indicating a good separation effect.

影响肝素钠效价测定因素的探讨

报道采用羊血浆法测定肝素钠效价的几种影响因素。

低分子肝素软膏剂的制备与质量控制

本研究制备了低分子肝素(LMWH)软膏剂并建立了制剂质量控制方法。按照不同处方和制备工艺制得软膏剂基质,通过软膏剂综合评分法对所制得基质进行评价。将LMWH原料药溶解,合并入基质水相组分,按照所确定的软膏剂最佳处方和最优工艺,制备LMWH软膏剂。用羊血浆法分别测定原料药和制剂中LMWH的效价。结果表明,按照处方1制备工艺3所制得的软膏剂基质综合评价得分最高。测得的软膏剂中LMWH含量为147.03 U/g,为标示量的91.89%。因此,本研究中LMWH软膏剂的制备方法可行,制剂质量控制方法简单快速,适合少量制备LMWH外用剂型。

藻酸双酯钠(PSS)生物效价测定方法的研究

目的考察以肝素作为标准品，通过《中国药典》的兔血浆法、《欧洲药典》的活化部分凝血酶时间法和《美国药典》的羊血浆法测定藻酸双酯钠（PSS）生物效价的可行性。方法《中国药典》2010年版兔血浆法、《欧洲药典》6．0版羊血浆活化部分凝血酶时间法、《美国药典》XXXII版羊血浆法测定PSS的抗凝效价。结果肝素做标准品，《中国药典》兔血浆法及《欧洲药典》的羊血浆活化部分凝血酶时间法测定结果均未通过可靠性检验；采用《美国药典》羊血浆法测得不同批号的PSS生物效价在6～13U·mg^-1。结论由于抗凝机制的差异，当采用《中国药典》的兔血浆法、《欧洲药典》的活化部分凝血酶时间法和《美国药典》的羊血浆法进行PSS的效价测定时，肝素不合适作为标准品，应考虑建立能反映其自身凝血特性的标准品。