酶法水解鲜羊骨骼的研究

以新鲜羊骨骼为原料,首先对不同种类的蛋白酶对羊骨酶解的效果进行了筛选,结果表明:中性蛋白酶水解度及三氯乙酸氮溶解指数相对较高,水解效果较理想。然后采用五因子二次正交设计对中性蛋白酶酶解羊骨的条件作进一步研究,确定其作用的最佳参数值为底物质量浓度为47kg/L,酶用量230U/g骨,酶解温度50.5℃、酶解时间为6.2h、pH值为7.0实验发现底物质量浓度、酶用量、酶解温度对羊骨酶解的水解度有极显著的影响,而作用时间和pH对水解度的影响不显著。

羊骨骼肌肌钙蛋白T单克隆抗体的制备及其特性

制备抗羊骨骼肌肌钙蛋白T(skeletal muscle troponin T,sTnT)的单克隆抗体,评价单抗的特性。通过煮沸提取、切胶纯化制备sTnT,融合后获得分泌抗羊sTnT的杂交瘤细胞株,用酶联免疫吸附测定法检测单抗效价、亚型、特异性等。结果表明:筛选后获得3株单克隆抗体(2E11、3D3、4C2),其中4C2特异性好,效价达到15.12×10^5以上,为IgG1亚型,亲和常数(K_a)为1.1×10^9 L/mol;免疫印迹结果显示,该单抗能与牛、羊的骨骼肌提取物反应,与鸡、鸭的骨骼肌提取物无明显反应,表明4C2可以用于区分反刍动物和禽类的骨骼肌组织。