美洲鲎miRNA的生物信息学挖掘与分析

利用miRBase数据库中已有动物的小RNA(miRNA),通过生物信息学方法对美洲鲎(Limulus polyphemus)表达序列标签(Expressed Sequences Tag,EST)和c DNA进行序列比对,挖掘美洲鲎miRNA,得到了72个miRNA前体(pre-miRNA)、49个可编码成熟miRNA,隶属于40个miRNA家族。miRNA家族归类结果表明,无论在低等脊椎动物还是高等动物中,miRNA家族的存在都是相当保守的。以miR-10基因前体为例,分析其序列与其他物种同源序列的差异,显示miRNA序列的高度保守性。miR-10前体序列分析系统进化发现,物种聚类与传统分类亲缘关系一致。

在特拉华湾看美洲鲎

当天就是满月之夜,一月一度的大潮将至,正是鲎上岸产卵的最佳时机。可是天气预报突然有异,大家都担心会影响鲎上岸产卵。夜晚降临,最高潮将在9点半左右到来……8点的时候,天还没有完全黑下来,已经有成对的鲎陆陆续续出现在海浪中,努力地往沙滩方向游着、爬着……随着潮水不断上涨,上岸的鲎越来越多,终于在9点半左右的时候,遍布了整篇海滩。终于等来了这个壮观的时刻.

鲎的分布及生活习性

鲎是一种古老的节肢动物 ,现存的鲎分为二亚科三属四种。

历史上人们对鲎的认识、利用及其在岭南的地理分布变迁

鲎,剑尾目鲎科海生动物。目前世界上仅存四种:中国鲎、美洲鲎、巨鲎和圆尾鲎。在我国,鲎分布于长江以南海域,有中国鲎、巨鲎、圆尾鲎等三种,又名马蹄蟹,民间俗称海怪、鸳鸯鱼、三刺鲎、两公婆、夫妻鱼等。形似蟹,身体分为头胸部、腹部及剑尾三部分。

中国鲎保护相关法律制度与措施优化对策

鲎,英文别名马蹄蟹(Horseshoe crab),隶属节肢动物门、肢口纲、剑尾目、鲎科。目前全世界现存的鲎分为2亚科3属4种,美洲鲎亚科(Subfamily Limulinae)仅1属1种即美洲鲎(Limuluspoly phemus);鲎亚科(Subfamily Tachypleinae)分为蝎鲎属和鲎属,由3种亚洲鲎组成,分别为蝎鲎属的圆尾蝎鲎(Carcinoscorpius rotundicauda)和鲎属的中国鲎(Tachypleus tridentatus)与南方鲎(Tachypleus gigas)。2019年3月世界自然联盟(IUCN)正式宣布中国鲎在红色名录中的等级从原来的数据缺乏(DD)变更为濒危(EN)。

鲎成濒危物种保护迫在眉睫

鲎在地球上已存在4.85亿年之久,早于恐龙和原始鱼类,是极为珍贵的“活化石生物”。世界上现存的鲎只有4种——中国鲎、南方鲎、圆尾鲎、美洲鲎。目前在我国海域自然分布的鲎为中国鳖和圆尾鲎。鲎具有极高的经济价值和科研价值,其血液提取物制成的鲎试剂广泛应用于各个行业以检测内毒素。

鲎:为人类医学事业奉献自己的活化石

飘逸水母'哼哧哼哧'地将一块石头搬进了演播室。都这节骨眼儿了,还搬什么石头呀,赶紧来见见今天的嘉宾,来自美洲鲎家族的柯兰波女士。这不是普通石头,而是鲎化石。不是说鲎是活化石,仍保持着几亿年前的模样嘛,我就是比较一下,嘿嘿……咦,你们怎么长得不太一样呢?

基于特异性蛋白Gαa的比浊法检测β-葡聚糖

通过基因重组技术,克隆表达了β-葡聚糖特异性结合美洲鲎G因子α亚基片段a（Gαa）蛋白,并建立了β-葡聚糖比浊检测方法。克隆的Gαa基因相对分子质量为40000（1251 bp）,浓度为2 g/L,纯度达到98%以上。该蛋白能与βG特异性结合,紫外分光光度计在340 nm下检测的吸光度与βG含量呈正线性相关,线性范围3.125~200 mg/L,R2=0.997,检测限3.125 mg/L。结合力实验表明,该蛋白与βG具有良好的亲和性及特异性。该方法具有成本低、快速、专一性强等特点。

基于碳点标记的(1-3)-β-D葡聚糖的荧光检测方法

血清中(1,3)-β-D葡聚糖(βG)的含量已经成为临床上检测侵袭性真菌感染的指标,利用原核表达并纯化获得能够与βG特异性结合的美洲鲎属G因子α亚基片段a(Gαa)蛋白,将Gαa蛋白与碳点偶联获得生物荧光传感器"碳点/Gαa蛋白",建立基于碳点标记的βG荧光检测方法。经测定该传感器的最佳的激发波长为360nm,其发射波长为470nm,且荧光强度与βG浓度呈正线性相关,该检测方法线性范围是9.375~150pg/m L,最低检测限为9.375pg/m L,批间、批内精密度均不小于5%,准确度(回收率)在97%~102%之间,该方法灵敏、快速、成本低,具有广阔的应用前景。

应用LAL动态浊度法测定复方苦参注射液中细菌内毒素含量

目的:建立应用美洲鲎试剂LAL的动态浊度法定量检测复方苦参注射液中细菌内毒素试验方法。方法:采用《中国药典》2015年版(四部)中的细菌内毒素检查法。结果:复方苦参注射液用细菌内毒素定量法检测无干扰因素影响,内毒素回收率在50%~200%范围内。结论:使用LAL进行动态浊度法定量检测复方苦参注射液的细菌内毒素是可行的,可用细菌内毒素方法代替兔热原检查法,同时又避免了限量法内毒素检测时的干扰。

动态浊度法定量检测醒脑静注射液中的细菌内毒素

目的:建立动态浊度法测定醒脑静注射液中细菌内毒素含量的方法。方法:依据《中国药典》2020年版四部通则(1143细菌内毒素检查法)中的动态浊度法及其指导原则,分别应用美洲鲎试剂和安度斯鲎试剂,在Pyros Kinetix Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统上,对醒脑静注射液细菌内毒素进行方法开发。通过细菌内毒素标准曲线可靠性试验和干扰预实验确定有效稀释倍数,测定干扰试验的回收率,完成醒脑静注射液细菌内毒素的定量检测。结果:可靠性试验中,LAL标准曲线浓度线性范围为0.001~1.0 EU·mL^(-1)(r=-0.9877),标准曲线的回归方程为:lg T=-0.3123lg C+2.740。TAL标准曲线浓度线性范围为0.01~1.0 EU·mL^(-1)(r=-0.999),标准曲线的回归方程为:lg T=-0.270lg C+2.830。供试品在稀释比例1∶20及以下浓度时对鲎试剂反应无干扰作用;3批供试品的内毒素定量检测结果均低于供试品规定限值。结论:应用Pyros Kinetix Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统,动态浊度法可用于醒脑静注射液细菌内毒素含量的定量检测。

鲎:一种奇怪的生物

鲎,是一个比恐龙还要古老的活化石家族,它们的祖先曾经与三叶虫生活在一个时代。在经历过5次生物大灭绝的考验后,它们仍然穿越了四亿年的时光存活至今,并且分化成四种不同的物种,分别是生活在美国东海岸的美洲鲎(Limulus polyphemus),生活在亚洲东南岸和东岸的中国鲎(Tachypleus tridentatus)、南方鲎(Tachypleus gigas)及圆尾鲎(Carcinoscorpius rotundicauda)。

动态显色法定量检测磺达肝癸钠注射液中的细菌内毒素

目的:建立动态显色法测定磺达肝癸钠注射液中细菌内毒素含量。方法:依据2020年版《中华人民共和国药典》(通则1143细菌内毒素检查法)的要求,应用Pyros Kinetix^(■)Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统,使用动态显色法鲎试剂,建立细菌内毒素标准曲线,通过干扰预试验确定稀释倍数,测定供试品溶液中外加内毒素的回收率进行干扰试验,完成供试品中细菌内毒素含量的定量检测试验。Pyros^(■)EQS软件自动绘制并出具标准曲线,计算溶液中内毒素的绝对含量,生成报告储存在Oracle数据库中。结果:标准曲线的线性范围为0.001~0.125 EU·mL^(-1)(r=-0.9991),回归方程为lgT=-0.2658 lgC+2.818,供试品在稀释5000、10000、15000、16500倍时均对反应无干扰作用,细菌内毒素回收率在50%~200%范围内,4批供试品的内毒素定量检测结果均符合规定。结论:在Pyros Kinetix^(■)Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统平台,本法可用于磺达肝癸钠注射液中细菌内毒素含量的测定,可定量检测供试品中内毒素的含量。

动态浊度法定量检测乳糖一水合物中细菌内毒素的含量

目的:应用美洲鲎试剂(Limulus Amebocyte Lysate,LAL)的动态浊度法,定量检测乳糖一水合物中细菌内毒素。方法:依据2015年版《中华人民共和国药典》<1143细菌内毒素检查法>的要求,应用Pyros Kinetix■Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统,使用葡聚糖抑制缓冲液稀释溶解LAL,建立细菌内毒素的标准曲线并确定稀释倍数,通过测定供试品溶液中外加内毒素的回收率进行干扰试验,并定量测定样品中的细菌内毒素含量。Pyros■EQS软件自动绘制并出具标准曲线,计算溶液中内毒素的绝对含量。结果:内毒素检测标准曲线浓度线性范围为0.001~0.032 EU·mL^-1(r=-0.9854),标准曲线回归方程为logT=-0.200logC+2.943;供试品在稀释100、300、500倍时均对试验无干扰作用,细菌内毒素回收率在50%~200%之间;4批样品的内毒素定量测定结果符合规定。结论:在Pyros Kinetix?Flex(PKF)细菌内毒素定量检测系统平台,使用LAL建立的动态浊度法,可用于乳糖一水合物的细菌内毒素定量检测。LAL有更高的灵敏度,葡聚糖抑制缓冲液可有效阻止由(1→3)-β-D-葡聚糖引起的干扰,提高试验的成功率,符合数据完整性的要求。

迁徒鸟类,北极与世界的纽带

在漫长的极夜过去之后,来自全球的数亿只候鸟陆续开启北上之旅,顺着它们祖祖辈辈沿袭了上百万年的路线回到北极及附近区域,开始了它们每年一次的生育时光。短暂的夏天,这里将有一次植物,昆虫,浮游生物的爆发生长,从而吸引了占全球鸟类种数2%约200多种鸟类在此生儿育女。