宝兴卫矛中三萜成分研究

从宝兴卫矛 Euonymus mupinensis L oes et Rehd中分离得到 6个化合物 ,经理化和光谱分析分别鉴定为木栓酮 (friedelin, ) ,美登木酸 (polpunonic acid, ) ,雷公藤酸 C(wilforic acid C, ) ,3-羟基 - 2 -氧代 -无羁萜烯 -2 9-酸 (3- hydroxy- 2 - oxo- 3- friedeien- 2 0α- carboxylic acid, ) ,大子五层龙酸 (salaspermic acid, ) ,直楔草酸 (or-thosphenic acid, )。 6个化合物均为首次从该植物中分到。

独子藤根皮醋酸乙酯部位的化学成分研究

目的研究独子藤Celastrusmonospermus根皮醋酸乙酯部位的化学成分。方法采用硅胶、反相硅胶和凝胶等柱色谱方法进行分离纯化,通过波谱学数据鉴定化合物的结构。结果从独子藤根皮醋酸乙酯部位中分离得到12个化合物,分别鉴定为美登木酸(1)、对羟基苯甲酸(2)、4-羟基-3-甲氧基苯甲酸(3)、大子五层龙酸(4)、3-氧代-2β-羟基木栓烷-29-酸(5)、雷公藤红素(6)、3α,22β-二羟基齐墩果烷-12-烯-29-酸(7)、直楔草酸(8)、21-氧代-2α,3α,22β-三羟基-29-降-木栓烷-24,2β-内酯(9)、2,3-二氧代-6α,10-二羟基-24-降-木栓烷-4,7-二烯-29-酸(10)、2α,3β,19α,23-四羟基-齐墩果烷-12-烯-28-酸(11)、2α,3β-二羟基-齐墩果烷-12-烯-23,28,30-三酸(12)。结论化合物1、3、7、10~12为首次从本植物中分离得到,3、11、12为首次从本属植物中分离得到。

基于定向进化的雷公藤三萜C-29位羧化酶催化机制研究

雷公藤红素和雷公藤内酯甲是中药雷公藤的主要三萜活性成分,具有抗肿瘤、抗炎及免疫抑制等药理活性,是雷公藤相关中药制剂发挥临床疗效的物质基础。通过解析活性成分生源途径,优化基因元件并利用“细胞工厂”异源获取将是未来“低成本、高效率”获得雷公藤中三萜活性成分的有效途径。CYP712Ks是参与雷公藤木栓烷型和齐墩果烷型三萜骨架修饰的第一个细胞色素P450酶,发挥C-29位羧基化功能,可催化木栓酮生成美登木酸,催化β-香树素生成3-表卡通酸。本研究以四条多功能TwCYP712K1/2/3/5为研究对象,利用酿酒酵母体内功能表征,明确其催化功能及底物选择偏好性;通过同源建模和分子对接,明确蛋白与底物结合空间结构,进而对蛋白活性口袋内差异氨基酸进行互相突变,阐明决定催化功能和底物结构选择的关键氨基酸。本研究共构建了63个突变体元件,解析了影响TwCYP712Ks羧基化功能的氨基酸位点,特别是揭示了影响TwCYP712K2对齐墩果烷型和木栓烷型三萜底物选择性的关键氨基酸,TwCYP712K2F127I与TwCYP712K2A227T突变体将导致产物比例发生逆转。本研究以同源蛋白比对及相互突变的方式对TwCYP712Ks四条蛋白进行半理性设计,阐明多个决定蛋白催化功能的氨基酸位点,获得系列活性提升或改变的突变体,为雷公藤三萜活性成分的生物合成提供丰富的催化元件,并初步解析了C-29位羧基化机制。