美白化妆品添加剂效能的实验研究

利用体外、体内实验方法对美白添加剂及配方进行筛选和评估 ,通过观察美白添加剂对酪氨酸酶的抑制作用 ,对B16细胞活力及黑素生成的影响 ,结合临床受试者实验 ,结果表明 ,根据黑素生成理论的新的认识所复配的美白添加剂效果较为理想。

中药复方化妆品美白祛斑添加剂的质量标准研究

目的建立中药复方美白祛斑添加剂的质量标准。方法对丹参、甘草组分进行薄层色谱鉴别;采用HPLC-ESLD法对方中人参中人参皂苷Rg1进行含量测定。结果薄层图谱斑点清晰,阴性对照无干扰;人参皂苷Rg1的线性范围为0.282-1.128μg(r=0.9993);平均回收率为101.62%,RSD为2.62%。结论本方法简便、专属、准确,可作为本品的质量控制。

光甘草定微胶囊包合物制备

研究以明胶和阿拉伯胶为壁材,采用复凝聚法研究了光甘草定微胶囊的制备工艺,探讨了芯壁质量比、增溶剂使用量、乳液均质时间和搅拌速度的影响,通过正交试验确定最佳工艺条件为芯壁比为2∶1,增溶剂为0.5%,均质时间为10 min,搅拌速度为750 r/min。通过本工艺制备得到的光甘草定微胶囊包裹率可达40%,粒径分布均匀(平均粒径3.91μm),将其喷雾干燥后得到光甘草定微胶囊粉末为淡黄色,无刺激气味,可溶于丙二醇等有机溶剂。包裹后的光甘草定微胶囊,减淡了原有的棕黑颜色和刺鼻气味,可很好地用作化妆品美白添加剂。

桑叶黄酮抑制酪氨酸酶活性的动力学研究

采用超声波辅助法,以体积分数为60%的乙醇水溶液从新疆桑叶粉末中提取桑叶黄酮。以L-多巴为底物,采用酶动力学方法研究该提取物对酪氨酸酶的抑制作用。实验结果表明,桑叶黄酮提取物对酪氨酸酶有较强的抑制作用,其IC50为0.2 g·L-1。其对酪氨酸酶的抑制作用表现为可逆效应,抑制类型为混合型抑制,对游离酶的抑制常数(KI)和对酶-底物络合物的抑制常数(KIS)分别为366和873 mg·L-1。DPPH实验显示新疆桑叶黄酮提取物具有一定的抗氧化作用,对DPPH自由基氧化作用相对活性的IC50为25 mg·L-1,与VC效果相当。

薰衣草花提取物对酪氨酸酶的抑制作用研究

以薰衣草花为原料,经体积分数为70%乙醇提取,将提取物浓缩成浸膏后用水分散,再依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取。以L-DOPA为底物测定石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取部分及萃取后水相部分对酪氨酸酶的抑制作用。实验结果表明,薰衣草花水相萃取物对酪氨酸酶有较强的抑制作用,IC50为0.96 g/L,动力学研究表明,薰衣草花水相萃取物对酪氨酸酶的抑制作用是可逆的,其抑制类型为线性混合型抑制,对游离酶和酶-底物络合物的抑制常数分别为3.00和12.00 g/L。

睡莲花提取物对酪氨酸酶的抑制作用及其动力学研究

采用紫外分光光度计测定多巴醌,得到了睡莲花提取物对酪氨酸酶的抑制率;以L-酪氨酸为底物,采用酶动力学的方法研究了睡莲花提取物对酪氨酸酶单酚酶活性的抑制作用及抑制机制。结果表明,睡莲花提取物对酪氨酸酶具有明显抑制作用,其中30%乙醇洗脱部位抑制效果最好,其对酪氨酸酶单酚酶活性的抑制作用表现为可逆反竞争型抑制;50%乙醇洗脱部位对酪氨酸酶单酚酶活性的抑制作用表现为可逆性抑制,低浓度时为混合型,高浓度时为竞争型。

苯乙基间苯二酚抑制黑色素形成的机理研究

采用药物替代法,分别阻断黑色素生成过程中的酶催化和非酶催化两个阶段,探究苯乙基间苯二酚抑制黑色素形成的作用机理。在p H=6.8的磷酸盐缓冲溶液中,分别以L-酪氨酸和L-多巴为底物,37℃反应后在475 nm处测定吸光度,研究苯乙基间苯二酚对酪氨酸酶催化反应进程的影响,计算抑制动力学参数;通过分子对接技术分析苯乙基间苯二酚抑制酪氨酸酶作用的分子机制。结果表明,苯乙基间苯二酚对黑色素生成过程中的酶催化反应具有抑制作用,是酪氨酸酶抑制剂;对非酶催化过程无影响;对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的半抑制浓度IC_(50)分别为0.28和31μmol/L;对酪氨酸酶二酚酶的抑制作用表现为非竞争性抑制,抑制常数K_m=1.1;分子对接结果显示,苯乙基间苯二酚与酪氨酸酶活性中心的MET A:280形成氢键,并伴有疏水作用。

茶皂素的纯化及抑制酪氨酸酶活性的研究

研究了茶皂素的纯化及纯化产物体外对马铃薯酪氨酸酶催化L-DOPA合成多巴醌的抑制作用及其机理。结果表明质量浓度为100 g/L时,市售茶皂素、经大孔树脂纯化的茶皂素TS及2种层析分离得到的茶皂素TS1和TS2对酪氨酸酶的抑制率分别为51.29%,90.06%,94.13%和82.47%;TS和TS1对酪氨酸酶IC50分别为48和40 g/L,抑制作用表现为可逆竞争性抑制,对酪氨酸酶的抑制常数分别为137和101 g/L。

茯苓提取物对酪氨酸酶抑制动力学及刺激性研究

研究了茯苓提取物对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的影响及其抑制动力学,测试结果表明:茯苓提取物对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶的活力均有抑制作用,单酚酶和二酚酶活力下降50%的茯苓提取物质量浓度(IC_(50))分别为0.008和0.040 g/L。酪氨酸酶单酚酶的催化反应存在迟滞时间,茯苓提取物对酪氨酸酶二酚酶活力的抑制作用表现为可逆效应。Lineweaver-Burk图显示茯苓提取物对二酚酶的作用表现为非竞争性与竞争性混合的抑制类型。在此基础上采用红细胞溶血实验初步评估茯苓提取物对皮肤的刺激性,结果显示含2.000 g/L茯苓提取物的样品无刺激性,质量浓度远大于单酚酶和二酚酶活力下降50%的茯苓提取物质量浓度IC_(50),茯苓提取物在0.200~0.800 g/L的质量浓度范围内可保证其安全添加且具有美白功效。

十一碳烯酰基苯丙氨酸的合成及其抑制酪氨酸酶二酚酶活性的研究

以十一烯酸和苯丙氨酸为原料，使用氯化亚砜将十一烯酸酰氯化，采用肖顿-鲍曼法（Schotten—Baumann）缩合反应合成了十一碳烯酰基苯丙氨酸钠，再经酸化分离后得到了十一碳烯酰基苯丙氨酸。利用IR，MS和1HNMR对合成产物的结构进行了表征，同时考察了十一碳烯酰基苯丙氨酸对酪氨酸酶二酚酶活性抑制的机制。结果表明，十一碳烯酰基苯丙氨酸对酪氨酸酶二酚酶活性的抑制作用为竞争性可逆抑制，其半抑制浓度为3．711g／L，抑制常数（Ki）为3．651g／L。

海藻酸钠对酪氨酸酶的抑制作用

通过酶抑制动力学实验考察了海藻酸钠在实验体系和黑素细胞内对酪氨酸酶和黑色素生成的抑制作用,利用荧光光谱分析海藻酸钠对酪氨酸酶抑制作用机理,同时考察海藻酸钠对黑素细胞的毒性。结果表明,在64 mmol/L浓度内,细胞活性均在90%以上,显示出良好的生物相容性。海藻酸钠对酪氨酸酶活性及黑色素产量均具有一定的抑制效果,且抑制类型在20 mmol/L浓度内呈明显的浓度依赖型。海藻酸钠与酪氨酸酶相互作用后,对其内源性荧光产生了淬灭作用。酪氨酸酶的最大发射波长出现了红移,表明海藻酸钠与酪氨酸酶相互作用时,改变了其氨基酸残基的疏水性环境。