大孔树脂纯化美藤果壳酚类物质的研究

以美藤果壳为原料,用70%乙醇提取得到美藤果壳酚类粗提物,研究大孔树脂纯化美藤果壳酚类物质的工艺条件,对AB-8、HPD300、NKA-9、D101、S-8、DM130 6种型号大孔树脂进行了筛选。结果表明:NKA-9型大孔树脂为纯化美藤果壳酚类物质最佳树脂;NKA-9型大孔树脂纯化美藤果壳酚类物质的最佳工艺条件为上样液质量浓度10 mg/m L、上样速度2.0 m L/min、以70%的乙醇溶液洗脱、洗脱速度1.0 m L/min、洗脱剂体积2.5 BV。在最佳工艺条件下纯化后的美藤果壳酚类物质的总酚含量为73.8%,对比于粗提物中的总酚含量33.2%,提高了1.2倍。

UPLC-PDA-MS鉴定经大孔树脂纯化美藤果壳酚类物质

以经大孔树脂纯化的美藤果壳酚类物质为原料,用预制硅胶板薄层层析法将其粗分为4个条带,富集各个条带中的物质后使用UPLC-PDA-MS检测,确定其中的酚类物质为:1号条带中有香草酸己糖苷,1,2-芥子酰阿魏酸酰龙胆二糖(待定),矢车菊素3-(6″-阿魏酰槐糖苷)-5-葡糖苷,锦葵花色素3-葡萄糖苷,锦葵花色素3-葡萄糖苷二倍体; 2号条带中有香草酸己糖苷,香草酸己糖苷三倍体以及香草酸己糖苷二倍体; 3号条带中有对羟基苯甲酸,羟基苯甲酸己糖苷,对香豆酸己糖苷以及对香豆酸四倍体; 4号条带中有对羟基苯甲酸以及对香豆酸。

美藤果壳提取物降血压功效的研究

以血管紧张素转化酶(angiotensin converting enzyme,ACE)抑制率为指标,筛选美藤果壳提取物降血压成分的最佳提取溶剂和壳层,并结合自发性高血压大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)模型,初步评价美藤果壳提取物的降血压功效。体外和体内实验结果表明:以水作为提取溶剂,美藤果壳提取物(sacha inchi shell extract,SISE)的ACE活性抑制率最高,其活性显著高于菊花、银杏提取物等其他天然ACE抑制剂,且高剂量(400 mg/kg·BW)的SISE显著降低了SHR大鼠的血压,给药1 h后SHR大鼠收缩压由166 mmHg显著降低至135 mmHg。结果初步证实了SISE具备降血压功效。急性经口毒性试验表明SISE属于食品级无毒。通过对SISE有效降压成分进行分离,表明其有效降压成分主要集中在正丁醇萃取物中,其萃取物经硅胶柱,氯仿/甲醇梯度洗脱,氯仿/甲醇(7∶3)组分的ACE抑制效果最佳。该研究为进一步开发美藤果壳为天然降血压药物夯实基础。

美藤果壳多酚物质的提纯及其抗氧化性

以美藤果壳为主要原料,用乙醇提取法提取美藤果壳多酚,考察乙醇浓度、料液比、提取温度、提取时间对美藤果壳多酚得率的影响。在单因素试验的基础上,进行正交试验优化提取工艺参数后,通过大孔树脂纯化粗提物,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定其中主要多酚物质,并利用Fenton体系和1,1-二苯基-2-苦苯肼(DPPH·)体系测定其提取成分的抗氧化活性,并与特丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,TBHQ)、维生素C(vitamin C,VC)、丁基羟基甲苯(butylated hydroxytoluene,BHT)进行对比。结果表明:影响美藤果壳多酚得率的4个因素中,影响程度为:提取温度>乙醇浓度>料液比>提取时间。最佳工艺:提取温度90℃,乙醇浓度70%,料液比1∶55(g/mL)和提取时间2.0 h,此时的多酚得率为4.79%。美藤果壳多酚主要为没食子酸、芦丁、儿茶素、单宁和异槲皮苷,对羟自由基和DPPH自由基的清除作用均优于TBHQ、VC、BHT,半数清除浓度分别为5.86×102μg/mL和7.51μg/mL。