温敏性羟丁基壳聚糖防治脑脊液漏的实验研究

目的探讨温敏性羟丁基壳聚糖对脊柱外科术中损伤硬脊膜后并发脑脊液漏的早期防治作用。方法实验家犬12只,随机分为两组:A组实验组,B组对照组,每组6只。两组家犬均行腰2、3及腰5、6椎板切除,暴露出硬脊膜后,于腰6椎体水平向头侧插入硬膜下导管,而于腰3椎体水平纵形切开硬脊膜。脑脊液漏模型造模完成后,A组用羟丁基壳聚糖封闭硬脊膜裂口,B组不用任何材料封闭,而后,自腰6椎体导管注入美兰溶液,观察腰3硬脊膜裂口处渗漏情况,记录注入美兰溶液的量,并进行统计分析。然后,两组分别随机选取1只家犬,用上述方法处理后,关闭切口,于导管内注入泛影葡胺并行腰椎管造影、拍摄X线片,对比观察结果。结果两组家犬脑脊液漏模型均造模成功,观察到腰3硬脊膜裂口处美蓝溶液迅速溢出时,A组注入美蓝溶液为0.36±0.06毫升,而B组为0.62±0.06毫升,两者差异具有显著性(P﹤0.01)。而注入76%泛影葡胺0.5毫升后,A组家犬的X线片上未见造影剂自硬脊膜裂口内漏出,而B组家犬的X线片上可见造影剂自硬脊膜裂口内漏出。结论温敏性羟丁基壳聚糖对家犬椎板切除术中损伤硬脊膜后并发脑脊液漏具有早期防治作用。

4-氨基-1-羟丁基-1,1-二膦酸单钠盐的合成与表征

报道了骨质疏松症防治药物４－氨基－１－羟丁基－１，１－二膦酸单钠盐（Ａｌｄｒｏｎａｔｅ）的合成。通过元素分析、质谱、红外光谱和核磁共振氢谱。

羟丁基乙烯基醚的合成

以乙炔和 1 ,4-丁二醇作为原料 ,在常温常压下合成了羟丁基乙烯基醚 ,并进行了分离与提纯。同时对产物用红外光谱 ,紫外光谱与元素分析进行了表征。讨论了引发剂、氧气、精制前预处理。

羟丁基壳聚糖的生物相容性研究

目的研究新型温敏性生物材料羟丁基壳聚糖的生物安全性,初步探讨该材料植入体内有无毒副作用。方法将壳聚糖进行羟丁基化制备出温敏性水凝胶,选用小鼠成纤维细胞L929细胞,通过MTS法、倒置显微镜观察等方法进行体外细胞毒性试验。通过SD大鼠尾缘静脉浸提液注射,进行急性毒性试验,通过新西兰兔耳缘静脉浸提液注射及皮内浸提液注射,进行致热原反应试验及皮内刺激试验。结果羟丁基壳聚糖无细胞毒性,不引起试验动物体温升高,无皮肤刺激反应,急性毒性试验不引起试验动物死亡或者其它不适。结论羟丁基壳聚糖材料生物相容性好,是一种安全的生物材料,有望作为新型药物载体应用于临床。

羟丁基壳聚糖的制备及其与鼠胚胎成纤维细胞的生物相容性研究

目的制备温敏型壳聚糖衍生物羟丁基壳聚糖(Hydroxybutyl chitosan,HBC),研究鼠胚胎成纤维细胞(Mouseembryonic fibroblasts,MEF)与HBC的相容性,探讨羟丁基壳聚糖作为组织工程材料的可行性。方法对壳聚糖化学改性制备HBC,研究其最佳制备条件。使用不同溶剂对HBC进行溶解实验;利用红外光谱、扫描电镜对产物结构进行观察。从小鼠胚胎中分离培养MEF;MTT法测定HBC对MEF活性的影响。结果制备的4种HBC均能溶于水,55℃反应14 h的HBC 4水溶性较好。HBC溶液在37℃具有明显的溶胶-凝胶的转变,通过物理交联形成凝胶并可逆。不同反应条件下制得的4种HBC浸提液对MEF细胞的毒性均在0级或1级,表现出良好的生物相容性。结论成功制备羟HBC,HBC具有良好的温度敏感性及体温(37℃)下凝胶的特性,与MEF生物相容性良好,是一种具有应用前景的新型组织工程材料。

4-羟丁基缩水甘油醚的合成

以1,4-丁二醇(BDO)和环氧氯丙烷(ECH)为原料,经一步法合成了丙烯酸羟丁基缩水甘油醚中间体4-羟丁基缩水甘油醚(4-HBGE),其结构经~1H NMR和MS(ESI)确证。对反应条件进行了优化,最佳反应条件为:BDO 0.1 mol,四丁基溴化铵(5 wt%)为催化剂,n(ECH)∶n(BDO)为1∶2,n(NaOH)∶n(BDO)=1∶1.5,甲苯/水(V/V=1/1)为溶剂,于40℃反应6 h,经二级萃取法提纯,4-HBGE收率和纯度分别为69.5%和97.6%。

羟丁基几丁糖膜修复兔硬脑膜缺损的实验研究

目的研究羟丁基几丁糖膜修复兔硬脑膜缺损的效果。方法取健康成年新西兰兔15只,颅中线两侧对称造成0.8 cm×0.8 cm硬脑膜缺损,左侧(实验组)使用羟丁基几丁糖膜覆盖硬脑膜缺损,右侧(对照组)使用生物膜(牛肌腱I型胶原)覆盖缺损,术后30、90、180 d分别处死5只实验动物,观察手术区域的大体情况及切取手术区域组织行HE染色,行成纤维细胞计数。结果实验组术后30、90、180 d,均可见羟丁基几丁糖膜下半透明新生膜形成,与周围组织无粘连;术后180 d,新生膜中成纤维细胞计数与正常兔硬脑膜比较差异无统计学意义(P>0.05),大体观察及HE染色下结构与正常兔硬脑膜相似性高。对照组术后90 d生物膜被吸收,手术区域形成一较厚不透明结缔组织覆盖脑表面;术后180 d,新生结缔组织成纤维细胞计数与正常兔硬脑膜比较差异有统计学意义(P<0.05),大体观察及HE染色观察较正常兔硬脑膜相似性低。结论羟丁基几丁糖膜修复兔硬脑膜缺损,膜下有新生膜形成,新生膜与兔正常硬脑膜相似性高,可以达到修复硬脑膜缺损的要求。

壳聚糖羟丁基衍生物的制备及性质

以1,2-环氧丁烷在碱性条件下的开环产物为醚化剂,对壳聚糖(CS)分子进行改性,制备了水溶性羟丁基壳聚糖(HBCS),并采用红外光谱、固体13C核磁共振对产物的分子结构进行表征.结果表明:羟丁基成功连接到壳聚糖分子链上;元素分析法测定产物取代度为1.2;羟丁基壳聚糖可溶于水并可在较广的pH值范围内溶解;由于改性反应破坏了壳聚糖的结晶区结构,因此羟丁基壳聚糖的热稳定性比原料壳聚糖差.对壳聚糖和羟丁基壳聚糖的抑菌性研究结果表明:羟丁基壳聚糖能够抑制大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长,并随着质量分数的增加抑菌效果明显增强;相同质量分数条件下羟丁基壳聚糖的抑菌活性比壳聚糖弱.

羟丁基壳聚糖联合生物矿化硅复合水凝胶修复小鼠皮肤创伤实验研究

背景外伤或疾病导致的皮肤创伤可引发多种并发症甚至死亡。如何构建能有效促进止血、愈合和修复的创面敷料,是亟待解决的关键问题。目的观察羟丁基壳聚糖(hydroxybutyl chitosan,HBC)联合生物矿化硅(biosilica,BS)复合水凝胶敷料对小鼠皮肤全层创伤的修复效果。方法在20只9周龄雄性C57BL/6J小鼠背部的左右两侧分别制作直径6 mm的全层皮肤创伤模型,利用硅胶固定板固定,防止创面收缩。小鼠随机分为A、B两组。A组小鼠右侧创面为HBC/BS组,即实验组;A组小鼠左侧创面为空白对照组;B组小鼠右侧创面为羧甲基纤维素钠(carboxymethylcellulose sodium,CMC-Na)/丙二醇(propylene glycol,PG)组;B组小鼠左侧创面为HBC组。小鼠单笼饲养,所有创面均每3 d给予1次常规消毒处理并更换固定板。每次消毒后,空白对照创面直接覆盖透气透明膜,其余各组创面均给予对应的水凝胶药物200 mg,均匀涂布后覆盖透气透明膜。持续观察创面出血及愈合情况,在15 d和21 d时分别对各组半数小鼠创面组织取样,进行HE染色、Masson染色和BrdU免疫荧光染色,并检测创面组织中的羟脯氨酸含量。结果实验组在建模后3 d、6 d、9 d、12 d、15 d时的创面愈合率均显著高于空白对照组(P<0.01),在3 d、6 d、9 d时的愈合率显著高于CMC-Na/PG组(P<0.01),实验组创面愈合率在各时间点均与HBC组无统计学差异(P>0.05)。病理学观察提示,在建模后15 d和21 d时,实验组与HBC组的创面更接近正常皮肤的层次和结构,上皮组织被覆完整且结构致密,胶原纤维分布均匀、排列整齐有序,实验组的皮肤附属器分布密度和结构完整性优于其他各组。建模后15 d,实验组创面组织羟脯氨酸的含量高于空白对照组和CMC-Na/PG组(P<0.05),与HBC组差异无统计学意义(P>0.05);建模后21 d,各组差异无统计学意义(P>0.05)。结论HBC/BS水凝胶和HBC水凝胶相较于已应用于临床的CMC-Na/PG水凝胶,均有更好的促进创面愈合的效果,添加了BS的复合水凝胶可有效促进皮肤附属器的修复再生,相较于HBC水凝胶有更为全面的促修复愈合能力。

新型手性N, N, N', N'', N''', N'''-六-[2-(1-羟丁基)]三乙四胺六乙酰胺的合成及其在 不对称氢硅化反应中的应用

在N2保护下,三乙四胺六乙酸分别与(R)- 或(S)-2-氨基-1-丁醇在145℃下反应16 h,合成了新的手性化合物(R)-(+)-或(S)-(-)-N, N, N', N'', N''', N'''-六-[2-(1-羟丁基)]三乙四胺六乙酰胺,产率分别为69.5%和71.3%。运用上述手性化合物与[Rh(COD)Cl]2作手性催化剂,探讨了其在苯乙酮的不对称氢硅化反应中的催化活性,结果显示其具有较明显的催化活性,但反应的对映选择性较低(仅为37%ee)。

温敏性羟丁基几丁糖水凝胶预防新西兰大白兔宫腔粘连实验研究

目的·观察温敏性羟丁基几丁糖(hydroxybutyl chitosan,HBC)水凝胶预防新西兰大白兔宫腔粘连的效果。方法·将18只雌性新西兰大白兔随机分为3组,即正常对照组、模型组、HBC组,每组6只。正常对照组行假手术;模型组、HBC组采用机械和感染双重损伤法构建宫腔粘连动物模型;HBC组建模后立即向宫腔内注射2 mL 1.5%的温敏性HBC水凝胶。每组分别于术后1、2、4周各取2只新西兰大白兔,收集双侧子宫组织,苏木精-伊红染色观察子宫内膜形态及腺体数量;Masson染色检测子宫内膜纤维化程度。结果·与正常对照组相比,模型组与HBC组术后1周子宫内膜柱状上皮逐渐消失,纤维化面积比明显增加,腺体数量减少。2周后,模型组低倍镜下可见宫腔内粘连形成,纤维化面积比进一步增加,腺体数量进一步减少;而HBC组宫腔内未见水凝胶残余,纤维化面积比下降,腺体数量增加。4周后,HBC组子宫内膜柱状上皮恢复,纤维面积比与腺体数量均恢复至正常水平。结论·温敏性HBC水凝胶可以有效预防新西兰大白兔宫腔粘连形成。

温敏型羟丁基壳聚糖对感染性创面的疗效研究

目的研究温敏型羟丁基壳聚糖治疗感染性创面的疗效。方法60例感染性创面患者,根据随机数字表法分为实验组及对照组,每组30例。两组患者均进行感染性创面常规治疗,实验组换药时加用温敏型羟丁基壳聚糖。比较两组患者住院时长、创面愈合时间、住院期间换药次数,治疗前后视觉模拟评分法(VAS)评分、C反应蛋白(CRP)、白细胞计数(WBC)、血沉(ESR)及治疗后12个月患者与观察者瘢痕评估量表(POSAS)评分。结果实验组患者住院时长(14.83±2.76)d、创面愈合时间(13.83±2.76)d短于对照组的(18.93±4.51)、(17.93±4.51)d,住院期间换药次数(5.14±2.02)次少于对照组的(9.75±2.69)次,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后第1、3、7天,两组VAS评分均低于治疗前,差异具有统计学意义(P<0.05);治疗后第1天,两组VAS评分比较差异无统计学意义(P>0.05);治疗后第3、7天,实验组VAS评分低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗后第3、7天,两组患者CRP、WBC、ESR水平均低于治疗前,且实验组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组观察者评分(20.27±6.15)分、患者评分(22.03±6.67)分均低于对照组的(30.80±6.72)、(34.03±8.24)分,差异有统计学意义(P<0.05)。结论温敏型羟丁基壳聚糖在治疗感染性创面方面具有较好的疗效,可以有效减少患者的住院时间,缩短创面愈合时间,减少换药次数,减轻疼痛,有效抑制炎症水平。

羟丁基壳聚糖携载CD133抗体温敏膜对内皮祖细胞的影响

目的研究羟丁基壳聚糖携载CD133抗体温敏膜对外周血内皮祖细胞(endothelial progenitor cells,EPCs)生长、黏附、迁移及分化的影响。方法(1)用密度梯度离心法取人外周血单个核细胞,培养7 d后收集贴壁细胞进行Dil-乙酰化低密度脂蛋白(acetylated low-density lipoprotein,ac-LDL)和FITC-荆豆凝集素I(UEA-I)双荧光染色鉴定;(2)鉴定后的细胞分3组,分别接种到铺有裸钴铬合金片膜、雷帕霉素药物涂层钴铬合金片膜、复合羟丁基壳聚糖携载CD133抗体温敏膜钴铬合金片膜的培养板中培养,分别记为裸金属组、雷帕霉素组及抗体温敏膜组;(3)取培养7 d的3组细胞计数并采用黏附能力测定实验、transwell小室法分别测定3组细胞的黏附和迁移能力的差异;(4)取培养14 d的3组细胞用实时聚合酶链反应(real-time polymerase chain reaction,RT-PCR)法测定细胞内内皮型一氧化氮合成酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)基因含量的表达差异。结果(1)培养7 d的贴壁细胞CD133表达率为(20.65±2.70)%,CD34表达率为(33.90±3.31)%,KDR表达率为(62.98±3.18)%,细胞摄取ac-LDL显红色荧光,与UEA-Ⅰ结合显绿色荧光,双阳性细胞为EPCs,显黄色。(2)EPCs在抗体温敏膜上生长良好,形态正常。与裸金属组、雷帕霉素组相比,抗体温敏膜组EPCs的细胞个数、黏附数量、迁移细胞数量增高,差异有统计学意义(P<0.01)。(3)RT-PCR示抗体温敏膜上的EPCs eNOS mRNA表达水平增高,差异有统计学意义(P<0.01),是裸金属组基因含量的2.43倍,是雷帕霉素组基因含量的5.90倍。结论羟丁基壳聚糖携载CD133抗体温敏膜能促进EPCs生长、黏附、迁移及分化,为理想的生物学材料,促进了药物洗脱支架的进展。

温敏性羟丁基几丁糖凝胶防治猕猴脑脊液漏

背景:前期研究表明羟丁基几丁糖具有良好的生物相容性及极低的细胞毒性,同时具有良好的生物降解性。目的:探讨羟丁基几丁糖凝胶防止术后脑脊液漏的可行性。方法:首先利用流变仪和动态力学实验仪检测1.5%,2.0%,3.0%温敏性羟丁基几丁糖凝胶的力学强度及耐疲劳性质,同时测定各浓度温敏性羟丁基几丁糖的凝胶时间。将10只猕猴随机分为实验组与对照组,均制作脑脊液渗漏模型,实验组采用1.5%温敏性羟丁基几丁糖凝胶封堵,对照组未采用任何材料封堵。结果与结论:1.5%温敏性羟丁基几丁糖的凝胶时间为(70±4)s,承受的最大压力为50.3-60.1kPa,并且在疲劳实验和频率扫描实验中呈现出良好的稳定性;2.0%温敏性羟丁基几丁糖凝胶的凝胶时间为(45±3)s,承受的最大压力为70.6-122.5kPa,在频率扫描中呈现了较好的稳定性;3.0%温敏性羟丁基几丁糖凝胶的凝胶时间为(26±2)s,承受的最大压力为77.8-104.7kPa,频率扫描呈现了较好的稳定性。但后两者的疲劳实验未达实验要求。脑脊液渗漏封堵实验中,实验组封堵率为100%,对照组无封堵效果,表明1.5%温敏性羟丁基几丁糖凝胶可防止猕猴脑脊液漏。

羟丁基壳聚糖护创敷料无菌检查方法的建立

目的建立羟丁基壳聚糖护创敷料的无菌检查方法,为该类产品的无菌检查提供参考依据。方法根据《中国药典》2015年版无菌检查法(四部通则1101)相关要求,采用薄膜过滤法进行方法适用性检查,以2~8℃的0.1%蛋白胨水作为稀释液和冲洗液,将样品溶解并将供试液全部过滤后,用2~8℃的0.1%蛋白胨水冲洗滤膜,冲洗量为500 mL(每膜每次冲洗量不超过100 mL),培养基用量为100 mL。结果与对照组相比,实验组中药典规定的6种阳性菌株均生长良好,说明该测试品的该检验量在该检验条件下抑菌性已被有效消除。结论所建立的方法能用于羟丁基壳聚糖护创敷料的无菌检查。

关节腔注射负载Dickkopf-3的温敏羟丁基壳聚糖水凝胶对大鼠骨关节炎的影响

背景 Dickkopf相关蛋白3(Dickkopf-3,DKK3)具有治疗骨关节炎(osteoarthritis,OA)的潜力,羟丁基壳聚糖(hydroxybutyl chitosan,HBC)温敏水凝胶是一种新型药物载体。目的 探讨负载DKK3的HBC(DKK3-loaded HBC)水凝胶对OA大鼠的影响。方法 制备DKK3-loaded HBC,通过恒温水浴测定凝胶时间,酶联免疫吸附实验计算体外释放曲线,细胞毒性实验验证安全性。将24只大鼠随机均匀分为假手术组、OA模型组、OA+DKK3组、OA+DKK3-loaded HBC组,每组6只。使用前交叉韧带离断法造模后,不同组别大鼠分别关节腔注射磷酸盐缓冲溶液、DKK3或DKK3-loaded HBC干预。步态分析后分离大鼠膝关节,进行显微计算机断层扫描评估骨质改变,苏木精和伊红染色以及免疫组化染色评估软骨改变。结果 DKK3-loaded HBC溶液在37℃条件下10 s内形成水凝胶,DKK3在24 h内迅速释放并持续超过168 h。DKK3和HBC浸取液对软骨细胞活力没有显著影响。与OA模型组相比,OA+DKK3-loaded HBC组大鼠的步速、步幅、后爪与地面接触时间提高(P均<0.05),骨和软骨的完整性提高,软骨基质的损失和软骨基质酶的表达减少(P均<0.05)。结论 HBC具有良好的药物缓释能力,关节腔注射DKK3-loaded HBC可能通过降低软骨基质酶的表达延缓大鼠OA的进展,改善疼痛和运动能力。

温敏性羟丁基壳聚糖的制备及性能

以1,2-环氧丁烷为醚化剂,在碱性条件下对壳聚糖进行改性,改善其水溶性和形成温敏水凝胶性能,并采用红外、差热对产物结构和热性能进行表征.结果表明,采用壳聚糖预碱化,以异丙醇-水为分散介质,反应温度为55℃可以得到改性产物,且产物在5%～7%浓度范围内可以形成温敏水凝胶.由于改性反应破坏了壳聚糖的结晶区结构,因此羟丁基壳聚糖的稳定性比原料壳聚糖热稳定性差,水溶性增加.

羟丁基乙烯基醚工艺开发成功

由重庆市化工研究院研发完成的环保型单体一羟丁基乙烯基醚高新科技产品，最近荣获2004年度重庆市科技进步奖。重庆化研院开发的羟丁基乙烯基醚生产工艺，拥有完全自主知识产权。该工艺选用独创的钛硅高合氧化物作催化剂，

羟丁基乙烯基醚新工艺

重庆化工研究院研究开发的羟丁基乙烯基醚生产工艺，拥有完全自主知识产权。该工艺选用独创的钛硅高合氧化物作催化剂，并加入纳米级金属氧化物助催化剂，活性高，选择性好，易再生，反应压力和温度降低，缩短反应时间。大大提高了转化率。该工艺独特的精制方法，提高了产品的纯度和收率。羟丁基乙烯基醚是重要的有机合成中间体和多功能高聚物环保型单体，主要用于生产新材料氟树脂、氟涂料，