影响聚乳酸、聚羟基乙酸嵌段共聚物微球中蛋白、多肽类药物释放的因素

目的介绍蛋白质,多肽类药物聚乳酸(PLA),聚羟基乙酸嵌段共聚物(PLGA)缓释微球近年来的研究进展,特别是影响药物释放的因素。方法根据国内外文献,从4个方面综述了影响生物大分子药物释放的因素,及如何控制突释和保持连续释放方面存在的问题及一些解决的办法。结果与结论聚合物的性质、药物的稳定性、制备工艺和附加剂的存在都会显著的影响微球的释放特性。

槲皮素-PLGA嵌段共聚物纳米粒的制备及释放机制研究

目的:以聚乳酸-羟基乙酸共聚物(PLGA)为材料,制备用于抗肿瘤的槲皮素-聚乳酸-羟基乙酸QC-PLGA纳米粒,并考察QC-PLGA纳米粒的体外释放机制。方法:采用乳化溶剂挥发法制备QC-PLGA纳米粒,使用透射电镜观察纳米粒的形态特征,研究QC-PLGA纳米粒的粒径、载药量、包封率、稳定性和体外释药。结果:QC-PLGA纳米粒在透射电镜观察下的形态特征为类球形实体粒子,平均粒径为(154.2±0.91)nm,载药量为(5.75±0.19)%,包封率为(43.74±1.42)%,36h体外释放84.76%,QC-PLGA冻干粉的体外释放规律基本符合Higuchi方程的释药模型。拟合的释药动力学方程为:Q=7.923 7+0.020 1t1/2(r=0.967 7)。结论:采用乳化溶剂挥发法制备的QC-PLGA纳米粒,具有明显的缓释作用,在抗肿瘤,尤其是治疗肿瘤切除术后残留癌灶方面具有广阔的应用前景。

胰高血糖素样肽-1长效注射微球的研究

目的制备载胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的长效注射微球,并对其体外释放特性及药效学进行考察。方法采用复乳法(W/O/W)制备载GLP-1聚乳酸-羟基乙酸嵌段共聚物(PLGA)的微球;考察微球的粒径大小、外观及包封率等理化特性;以HPLC法测定微球的体外释放速率;在体动物法评价微球制备工艺和体外释放过程中GLP-1的生物学活性。在糖尿病模型小鼠体内考察了微球的降血糖作用。结果微球球形圆整,分散性好,包封率在80%以上;GLP-1微球1个月的体外累积释放可达85%,其释放行为符合近似零级释放模式;使用明胶溶液作为内水相,较好地保持了制备工艺过程中的GLP-1生物学活性,在体外释放过程中GLP-1的生物学活性略有下降;GLP-1微球可显著降低糖尿病模型小鼠的血糖水平,降糖作用可维持1个月。结论用可生物降解的聚合物PLGA作为载体材料,可以将GLP-1制备成缓释1个月的注射微球。

胸腺肽α_1缓释注射微球的研究

制备胸腺肽α1(Tα1)的长效注射微球,并对微球的体外释放特性、体外活性及药效学进行考察。采用复乳法(W/O/W)制备了载Tα1聚乳酸-羟基乙酸嵌段共聚物(PLGA)的微球;考察微球的粒径大小、外观及包封率等理化特性;以HPLC法测定微球的体外释放速率;采用CCK-8法评价微球制备工艺和体外释放过程中Tα1的生物学活性;体内药效学研究中采用流式细胞仪检测免疫抑制模型大鼠给予Tα1微球后所产生的CD4+,CD8+因子的量,根据CD4+/CD8+的比值变化评价体内药效。微球球形圆整,分散性好,两个优选处方(外水相中加入5%氯化钠和10%葡萄糖)的微球包封率分别为87.8%和90.2%;Tα1微球1个月的体外累积释放可达90%以上。使用含10%葡萄糖的PVA溶液作为外水相,较好地保持了制备工艺过程中的Tα1生物学活性,在体外释放过程中Tα1的生物学活性略有下降;Tα1微球可显著提高免疫抑制模型小鼠的免疫力。用可生物降解的聚合物PLGA作为载体材料,可以将Tα1制备成缓释1个月的注射微球。

高分子聚合物PLGE超声微泡的制备与体外显影研究

目的:应用新型高分子聚合材料聚乳酸/羟基乙酸/聚乙二醇嵌段共聚物(PLGE)制备超声微泡并观察其体外显影效果。方法:采用复乳法(W/O/W)制备超声微泡,使用光镜和扫描电镜观察形态、测定微泡的粒径分布,通过体外溶液超声显影实验观察显影效果。结果:采用该法制备的超声微泡呈球形,粒径分布均匀,平均粒径1.75μm,体外显影效果好。结论:以PLGE为外壳材料,采用复乳法制备的微泡可以作为超声造影剂,为下一步载药研究提供基础。

PELGE-克班宁纳米粒在大鼠体内的组织分布及药动学研究

目的研究聚乙二醇-(聚乳酸-羟基乙酸)-聚乙二醇三嵌段共聚物-克班宁纳米粒(PELGE-Cre-NPs)在大鼠体内的组织分布及组织药动学特征。方法将SD大鼠分为9组(每个时间点为1组),每组6只,雌雄各半。尾静脉注射PELGE-Cre-NPs(5 mg/kg)后,分别于5、15、30、60、90、120、180、240、300 min时取各组大鼠心、肝、脾、肺、肾、脑组织适量,以盐酸维拉帕米为内标,采用高效液相色谱法测定各组织中克班宁(Cre)的含量,并计算药-时曲线下面积(AUC_(0-t))、平均滞留时间(MRT_(0-t))等主要药动学参数。结果给药后5~90 min,Cre在大鼠各组织样品中的含量由高到低依次为肺、肾、脾、肝、脑、心;给药后120~300 min,Cre在大鼠各组织样品中的含量由高到低则变为肺、脾、肾、肝、脑、心。Cre在心、肝、脾、肺、肾、脑组织中的AUC_(0-t)分别为(18.86±1.66)、(43.36±4.99)、(51.36±5.34)、(81.86±12.34)、(53.31±3.19)、(27.73±4.76)mg·h/L,MRT_(0-t)分别为(1.94±0.12)、(1.97±1.02)、(1.98±1.23)、(1.89±0.21)、(1.88±0.06)、(1.85±0.19)h。结论PELGE-Cre-NPs在大鼠体内的组织分布以肺组织为主、心组织较少,在心、肺、肝组织中的消除较慢。

PELGE-克班宁纳米粒在家兔体内的药动学研究

目的:研究聚乙二醇-(聚乳酸-羟基乙酸)-聚乙二醇三嵌段共聚物(PELGE)-克班宁纳米粒(PELGE-Cre-NPs)在家兔体内的药动学。方法:取6只家兔,耳缘静脉注射PELGE-Cre-NPs(3.5 mg/kg),分别于给药后5、15、30、60、90、120、150、180、240、300min时,于其耳缘静脉采血1 m L。分离血浆,用乙酸乙酯萃取Cre,并采用高效液相色谱法,以盐酸维拉帕米为内标,测定Cre的血药浓度,然后采用DAS 2.0软件绘制血药浓度-时间曲线并计算药动学参数。色谱条件采用色谱柱为Agilent ZORBAX ExtendC18,流动相为甲醇-0.01%三乙胺溶液(75∶25,V/V),流速为1 m L/min,检测波长为280 nm,柱温为30℃,进样量为20μL。结果:Cre检测血药浓度的线性范围为45.0~3 600μg/L(R^2=0.999 9),日内、日间精密度试验和稳定性试验的RSD均小于5%(n=6或n=12),准确度为(97.44±2.41)%^(98.45±3.87)%(n=6)。PELGE-Cre-NPs在家兔体内分布符合二室模型;主要药动学参数t1/2为(109.357±33.917)min,CL为(0.016±0.001)L/(min·kg),MRT为(76.733±7.502)min,cmax为(3 699.458±287.713)μg/L。结论:PELGE-Cre-NPs在家兔体内的半衰期较Cre注射剂长,滞留时间延长,有缓释效果。

多西他赛PELGE纳米粒的处方优化、表征及其体外释放和抗肿瘤活性的初步评价

目的:优化多西他赛(DTX)-聚乙二醇-(聚乳酸-羟基乙酸)-聚乙二醇三嵌段共聚物(PELGE)-纳米粒(NPs)的处方,对其进行表征,并评价其体外释放特性及抗肿瘤活性。方法:采用开环共聚法合成PELGE,采用乳化溶剂挥发法制备DTX-PELGENPs;采用高效液相色谱法测定DTX-PELGE-NPs中DTX的含量;以DTX用量、PELGE用量、泊洛沙姆188浓度为自变量,包封率为因变量,采用Box-Behnken设计-响应面法优化处方;采用激光粒度仪和透射电镜测定DTX-PELGE-NPs的粒度和Zeta电位;以DTX注射液为参照,采用离心超滤法测定体外释放率;以DTX注射液不含DTX的PELGE-NPs为参照,采用噻唑蓝法考察体外细胞毒性。结果:最优处方为DTX用量2.80 mg,PELGE用量20.60 mg,泊洛沙姆188浓度6%。优化所得DTX-PELGE-NPs的包封率为(86.79±1.32)%,载药量为(10.21±0.78)%,平均粒度为(78.4±2.9)nm,多分散性指数(PDI)为(0.187±0.018),Zeta电位为(-20.6±1.5)mV;电镜下DTX-PELGE-NPs呈类球形,分布均匀。相较于DTX注射液(4 h时的累积释放率约为92.3%),DTXPELGE-NPs有明显的缓释效果(36 h时的累积释放率约为78.6%)。0.1~50μg/mL的PELGE-NPs对人乳腺癌细胞MCF-7无明显细胞毒性(P>0.05),而0.5~10μg/mL的DTX-PELGE-NPs能够显著抑制人乳腺癌细胞MCF-7的生长,且作用(DTX-PELGE-NPs 10μg/mL组除外)显著强于同浓度DTX注射液(P<0.05)。结论:优化所得处方工艺稳定、可行;所得DTX-PELGE-NPs粒度均匀,包封率较高,缓释效果明显,体外抗肿瘤活性强于DTX注射液。

乳化溶剂挥发法制备重组人血管内皮抑制素缓释微球

目的:制备重组人血管内皮抑制素(恩度)缓释微球,并对微球理化性质及体外释放行为进行初步考察。方法:采用乳化溶剂挥发法(W/O/O)制备恩度载药微球;对微球载药量、粒径、突释、体外释放速率及降解行为进行考察,同时利用凝胶电泳初步评价体外释放过程中恩度的完整性。结果:增加聚乳酸-羟基乙酸嵌段共聚物(PLGA)中羟基乙酸的比例、提高PLGA浓度、降低内水相体积、提高理论载药量均增加微球载药能力;降低内水相体积、提高分散速度均减小突释。增加PLGA中羟基乙酸的比例,30 d时累积释放可增加到65%。降解实验说明释放初期微球主要以扩散方式释放恩度,释放后期主要表现为微球的降解。凝胶电泳结果表明微球制备过程对蛋白质聚集性的影响不大。结论:用PLGA作为载体材料制备微球,可以延缓恩度的释放。

PLGA-PEG多孔载药微球的制备及超声波对其释药行为的影响研究

目的:以伊文思蓝为被包封物制备聚乳酸(LA)-羟基乙酸(GA)-聚乙二醇(PEG)嵌段共聚物(PLGA-PEG,PLGE)多孔载药微球,并研究超声波对药物体外释放的影响。方法:以LA-GA-PEG(63.00∶27.50∶9.50,m/m/m)为原料制备PLGE;以二氯甲烷为有机相,采用复乳法制备PLGE包封的伊文思蓝多孔载药微球。采用扫描电子显微镜对载药微球的形态进行观察;采用紫外分光光度法测定伊文思蓝的载药量和包封率;考察低频率(20 k Hz,40 W)超声波对其药物累积释放度的影响。结果:所制备的多孔载药微球成球规整,彼此不粘连,表面孔隙均匀,载药量为0.38%,包封率为89.92%;15 min时的累积释放度在超声和未超声条件下分别为2.76、0.91μg/mg。结论:PLGE可用作微球药物的载体,低频率超声波可促进微球内药物的释放。