1,25-二羟基维生素D3在临床医学领域中的研究进展

维生D具有调节钙、磷代谢,影响细胞分化等生理功能。越来越多的研究表明维生素D缺乏与多种疾病的发生与发展相关,例如骨质疏松症、免疫性疾病、帕金森病、动脉粥样硬化、肿瘤等。本文主要就维生素D在临床医学治疗领域的研究进展作一综述。

中枢性性早熟儿童25-羟基维生素D3、神经肽吻素与血清P1NP和N-MID OC的相关性

目的分析25-羟基维生素D3[25-(OH)D3]水平、神经肽吻素(Kisspeptin)在中枢性性早熟(CPP)儿童中的表达,及其与血清Ⅰ型前胶原氨基端延长肽(P1NP)、N端中段骨钙素(N-MID OC)的相关性。方法86例CPP患儿作为CPP组,同时选取50例单纯性乳房早发育(PT)及50例体检正常的健康儿童,分别作为PT组和健康组。对比各组血清25-(OH)D3、Kisspeptin、P1NP及N-MID OC水平,采用Pearson相关性分析血清25-(OH)D3、Kisspeptin与P1NP和N-MID OC的相关性。结果CPP组25-(OH)D3水平低于PT组和健康组,PT组25-(OH)D3水平低于健康组(P<0.05);CPP组Kisspeptin、P1NP及N-MID OC水平高于PT组和健康组,PT组Kisspeptin、P1NP及N-MID OC水平高于健康组(P<0.05)。25-(OH)D3与血清P1NP及N-MID OC呈负相关(r=-0.259、-0.323,P<0.05)。Kisspeptin与血清P1NP及N-MID OC呈正相关(r=0.426、0.610,P<0.05)。结论CPP患儿表现为25-(OH)D3低水平和Kisspeptin高水平,且患儿25-(OH)D3和Kisspeptin水平与骨代谢标志物P1NP及N-MID OC呈显著相关性,可作为评估CPP患儿骨代谢情况的参考指标。

2型糖尿病周围神经病变与血清25-羟基维生素D3的关系及其影响因素分析

目的分析血清25-羟基维生素D_(3)[25-(OH)D_(3)]与2型糖尿病周围神经病变之间的关系。方法选取2022年1月至2023年12月赣南医科大学附属兴国医院收治的104例2型糖尿病患者作为研究对象,其中52例单纯2型糖尿病患者作为对照组,52例2型糖尿病周围神经病变患者作为观察组。收集两组患者一般资料,并取两组患者静脉空腹血送检,在实验室环境下检测各项生化指标。通过多因素二分类logistic回归模型分析2型糖尿病周围神经病变的影响因素。结果观察组血清25-(OH)D_(3)缺乏率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);观察组糖尿病病程长于对照组,合并高血压比例、空腹血糖、糖化血红蛋白、总胆固醇水平均高于对照组,且观察组高密度脂蛋白胆固醇、血清25-(OH)D_(3)水平均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);多因素二分类logistic回归模型分析结果显示,糖化血红蛋白(β=1.106,OR=2.082,95%CI:1.086~4.021)、糖尿病病程(β=0.821,OR=1.145,95%CI:1.021~1.346)是2型糖尿病周围神经病变发生的独立危险因素,血清25-(OH)D_(3)是2型糖尿病周围神经病变的独立保护因素(β=-0.127,OR=0.875,95%CI:0.856~0.952)。结论2型糖尿病周围神经病变患者中血清25-(OH)D_(3)水平较低,建议2型糖尿病患者在日常生活中及时补足血清25-(OH)D_(3)的摄入量,减少2型糖尿病周围神经病变发生率。

初诊2型糖尿病患者血清25-羟基维生素D3与颈动脉内膜中层厚度及粥样硬化斑块相关性研究

目的:研讨初诊2型糖尿病(T2DM)患者25-羟基维生素D3[25-(OH)D3]水平和颈动脉内膜中层厚度(IMT)、动脉粥样硬化斑块的关系。方法:检测206例初诊T2DM患者空腹血糖(FBG)、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、25-(OH)D3浓度等指标,完善血管彩超检测IMT及颈动脉粥样硬化斑块情况。结果:斑块组患者年龄、高血压病史、LDL-C、HbA1c、IMT均高于无斑块组(P<0.05),而25-(OH)D3浓度低于无斑块组(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,颈动脉IMT与吸烟史(rs=0124,P=0.038)、高血压病史(rs=0.175,P=0.001)正相关。Pearson相关性分析,颈动脉IMT与年龄、HbA1c、LDL-C呈正相关(P均<0.05),与25-(OH)D3、血钙水平呈负相关(P均<0.05)。Logistic回归分析,年龄、HbA1c、LDLC、高血压病史是产生颈动脉粥样硬化斑块的危险要素,而25-(OH)D3水平可直接影响颈动脉粥样硬化斑块形成。结论:初诊T2DM患者25-(OH)D3水平与颈动脉IMT呈负相关联,低25-(OH)D3水平可能为颈动脉粥样硬化形成的一个危险信号。

血清内脏脂肪素和25-羟基维生素D3与冠状动脉慢性完全闭塞病变侧支循环的相关性

目的探讨冠状动脉慢性完全闭塞病变(CTO)患者血清内脏脂肪素水平、25-羟基维生素D3[25-(OH)D3]与冠状动脉侧支循环(CCC)的关系。方法共纳入189例经冠状动脉造影证实为CTO的患者;根据Rentrop Cohen分级将189例患者分为CCC建立不良组(n=82,Rentrop 0,1级)和CCC建立良好组(n=107,Rentrop 2,3级)。ELISA法检测血清内脏脂肪素和25-(OH)D3水平。结果CCC建立不良组内脏脂肪素水平明显高于CCC建立良好组(P<0.001),25-(OH)D3水平明显低于CCC建立良好组(P<0.001)。Spearman相关性分析显示,Rentrop分级与内脏脂肪素水平呈负相关(r=-0.692,P<0.001),与25-(OH)D3水平呈正相关(r=0.689,P<0.001)。Logistic回归分析显示内脏脂肪素、25-(OH)D3水平、LDL-C与糖尿病是CCC建立不良的独立危险因素。结论血清内脏脂肪素、25-(OH)D3、LDL-C水平与糖尿病对CCC建立情况影响较大,对评估CCC建立情况具有重要的临床价值。

慢性肾脏病非透析患者25-羟基维生素D3水平变化及其影响因素分析

目的 探讨慢性肾脏病（CKD）非透析患者血清25-羟基维生素D3［25-（OH）D3］水平变化及其影响因素。方法 选取2015年1—12月于中国医科大学附属盛京医院肾内科住院的213例CKD非透析患者为研究对象，将患者按照CKD分期分为CKD1期组（55例）、CKD2期组（33例）、CKD3期组（37例）、CKD4期组（37例）和CKD5期组（51例），检测患者血清25-（OH）D3水平，分析25-（OH）D3水平与各临床指标之间的关系。结果 213例CKD非透析患者血清25-（OH）D3平均水平是（9±7）μg/L，其中25-（OH）D3缺乏者占90.1%（192/213），不足者占9.4%（20/213）。CKD4期组25-（OH）D3水平明显低于CKD1期组［（8±7）μg/L比（11±6）μg/L］，CKD5期组25-（OH）D3水平明显低于CKD1、2、3期组［（7±5）μg/L比（11±6）、（11±8）、（9±7）μg/L］，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。相关性分析显示，25-（OH）D3水平与血清肌酐、血磷、甲状旁腺激素、碱性磷酸酶、24 h尿蛋白及C反应蛋白呈负相关（r=-0.201、-0.186、-0.134、-0.166、-0.404、-0.169，均P＜0.05），与估算肾小球滤过率（eGFR）、血红蛋白、血清白蛋白、血钙和测定时间（月份）呈正相关（r=0.258、0.123、0.496、0.425、0.180，均P＜0.05）。多元逐步回归分析显示，eGFR、白蛋白水平和测定时间是25-（OH）D3的独立影响因素（均P＜0.05）。结论 在CKD患者中25-（OH）D3不足和缺乏普遍存在。eGFR、血清白蛋白水平及测定时间是CKD患者25-（OH）D3水平的独立影响因素。建议在CKD人群中早期开始检测25-（OH）D3水平。

1,25二羟基维生素D3与冠状动脉钙化积分的相关性及临床诊断价值研究

目的探讨1,25二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]与冠状动脉钙化积分的关系及其临床诊断价值。方法采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测健康人和冠状动脉不同钙化积分冠心病患者血清中1,25(OH)2D3水平,并进行统计分析,绘制ROC曲线分析其诊断性能。结果 1,25(OH)2D3在对照组与不同钙化积分疾病组之间、以及对照组与疾病组之间其血清水平浓度差异显著,疾病组血清中1,25(OH)2D3含量明显下降;钙化积分与1,25(OH)2D3呈负相关(P<0.05);ROC曲线显示1,25(OH)2D3曲线下面积为0.616,诊断阈值为70.77pg/mL,诊断灵敏度为48.50%,特异性为95.80%,约登指数为0.43。结论1,25(OH)2D3在对照组和疾病组中表达不同,与钙化积分呈负相关,对冠心病诊断价值明显,可以为动脉粥样硬化的预防和治疗提供一种新的策略。

25羟基维生素D3的生理功能及其在动物生产中的应用

25羟基维生素D3即25羟基胆钙化醇,是维生素D3经肝脏羟化的代谢产物。25羟基维生素D3是维生素D在血液循环中存在的重要形式,其主要作用是调节钙、磷的吸收代谢,在家畜骨骼健康和繁殖性能等方面的价值尤为突出。本文综述了25羟基维生素D3的合成代谢途径、吸收优势和生理功能及其在动物生产中的应用,并提出值得继续研究的方向和内容。

葛根素抑制1，25-二羟基维生素D3促破骨细胞骨吸收功能的最佳剂量

背景:近年来国内外学者对葛根素的骨形成研究较多,但对于葛根素抑制1,25-(OH)2D3促破骨细胞骨吸收功能尚未见报道。目的:观察不同浓度葛根素在体外对1,25-(OH)2D3促破骨细胞骨吸收功能的抑制作用。方法:收集3周龄小鼠骨髓细胞并接种到24孔培养板中。实验组培养液为1,25-(OH)2D3+α-MEM完全培养基+不同质量浓度的葛根素,对照组不加葛根素。结果与结论:不同浓度组葛根素处理的培养体系均诱导出破骨样细胞且形态差异不明显;除100μg/L葛根素组在第3天时碱性磷酸酶表达显著增高外,各组之间培养液上清中碱性磷酸酶水平无显著性差异(P>0.05);10μg/L葛根素组培养液上清Ca2+水平在第3,5,12天时较对照组显著降低(P<0.05～0.01),50μg/L葛根素组培养液上清Ca2+水平在第12天时较对照组显著降低(P<0.01),100μg/L葛根素组培养液上清Ca2+水平在所有检测点较10μg/L葛根素组显著上升(P<0.05)。提示葛根素最佳抑制剂量在10～50μg/L之间。

2型糖尿病患者并发周围血管病变与血清25-羟基维生素D3水平的相关性

目的 探讨2型糖尿病患者并发周围血管病变与血清25-羟基维生素D3水平的相关性。方法 选择2014年10月至2016年10月在西安市中心医院内分泌科住院的2型糖尿病患者186例作为糖尿病组，并分为单纯2型糖尿病组（单纯组，100例）和2型糖尿病并发周围血管病变组（并发组，86例）。选择同期本院体检健康受试者80例作为正常组。依据血清25-羟基维生素D3水平的不同，将186例患者分为A组（4.0～12.0 μg/L）、B组（12.1～18.0 μg/L）和C组（18.1～24.0 μg/L），各62例。比较2型糖尿病患者和健康受试者临床资料、单纯组和并发组临床资料，采用多因素Logistic回归分析法分析2型糖尿病患者并发周围血管病变的影响因素，采用Pearson相关性分析法分析不同血清25-羟基维生素D3水平与2型糖尿病患者并发周围血管病变发生率的关系。结果 糖尿病组年龄、腰臀比、收缩压、舒张压、总胆固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、糖化血红蛋白（HbA1c）水平和吸烟史比例高于，而高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）、25-羟基维生素D3水平低于正常组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。糖尿病组男性、饮酒史比例和体重指数水平与正常组比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。并发组年龄、体重指数、收缩压、舒张压、总胆固醇、LDL-C、HbA1c水平和吸烟史比例高于、而病程和25-羟基维生素D3水平短于（低于）单纯组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。并发组男性、饮酒史比例和腰臀比、三酰甘油、HDL-C水平与单纯组比较，差异均无统计学意义（均P＞0.05）。多因素Logistic回归分析法提示，2型糖尿病患者并发周围血管病变的危险因素有年龄、病程、吸烟史、收缩压、LDL-C和HbA1c；保护因素有25-羟基维生素D3（P＜0.05）。Pearson相关性分析法显示，血清25-羟基维生素D3水平与2型糖尿病患者并发周围血管病变发生率呈负相关，提示血清25-羟基维生素D3水平越低，2型糖尿病患者并发周围血管病变发生率越高（A组：比值比=1.447，95%置信区间：1.022～2.225，P=0.009；B组：比值比=1.215，95%置信区间：1.085～1.852，P=0.024；C组：比值比=1.112，95%置信区间：1.103~1.675，P=0.039）。结论 血清25-羟基维生素D3水平与2型糖尿病患者并发周围血管病变发生呈负相关，血清25-羟基维生素D3水平是2型糖尿病患者并发周围血管病变的保护因素。

不同剂量1,25二羟基维生素D3预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制探讨

目的探讨不同剂量1,25二羟基维生素D3预处理对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用及机制。方法将60只SD雄性大鼠随机分为假手术组、局灶性脑缺血再灌注损伤模型组,并用高、中、低不同剂量1,25二羟基维生素D3对大鼠进行预处理,比较各组氧化/抗氧化指标、微血管密度(MVD)和微血管面积密度(MVA)、血管内皮生长因子(VEGF)和核因子-κB(NF-κB)结果。结果随着剂量增加,各组神经行为学评分和脑梗死面积逐渐降低,高剂量组与中、低剂量组差异具有统计学意义(P<0.05);不同1,25二羟基维生素D3剂量大鼠超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)明显升高,脂质过氧化物(LPO)和晚期蛋白质氧化产物(AOPP)明显下降,LPO和CAT三个剂量组间两两比较差异具有统计学意义(P<0.05),高剂量组SOD、AOPP与中、低剂量组差异有统计学意义(P<0.05),但中、低剂量组差异无统计学意义(P>0.05);MVD、MVA和VEGF均有增加趋势,且各组间差异具有统计学意义(P<0.05);随着剂量增加,各组NF-κB均呈现下降趋势,且随着反应时间延长,高剂量组干预效果更为明显(P<0.05),中、低剂量组差异逐渐减少(P>0.05)。结论 1,25二羟基维生素D3对局灶性脑缺血再灌注损伤的保护作用具有剂量依赖性,其机制可能与抑制NF-κB炎性信号通路、减少氧自由基损伤和促进微血管再生有关。

1α,25-二羟基维生素D3通过表皮生长因子受体和细胞周期调节卵巢癌细胞的生长

目的:研究1α,25-二羟基维生素D3(1,25VD3)通过对表皮生长因子受体和细胞周期的调控调节人卵巢癌细胞的生长。方法:用1,25VD3处理人卵巢癌细胞株OVCAR3后,MTT法测定细胞生长情况,流式细胞仪分析细胞周期,Western blot检测EGFR表达。用pcDNA3-EGFRvIII质粒转染OVCAR3细胞,筛选出稳定过表达EGFR的克隆株EGFR-OVCAR3。用1,25VD3及EGFR抑制剂分别处理OVCAR3和EGFR-OVCAR3细胞,Western blot检测p27、Cyclin E和GADD45蛋白表达。结果:1,25VD3下调OVCAR3细胞EG-FR蛋白表达,对细胞生长有明显抑制作用,使其G0/G1和G2/M期增多,S期明显减少,而对EGFR-OVCAR3细胞无明显作用。Western blot显示,1,25VD3上调OVCAR3细胞p27和GADD45蛋白表达,下调Cyclin E蛋白表达,而对EGFR-OVCAR3细胞三种蛋白表达无调节作用,用EGFR抑制剂处理EGFR-OVCAR3细胞后,又能调节p27和cyclin E蛋白的表达。结论:1,25VD3可以调节EGFR蛋白表达,并进而调节下游分子,包括p27和GADD45,最后调控细胞周期,抑制细胞G1/S期转换和G2/M期转换,从而抑制卵巢癌细胞的生长。

用液相色谱串联质谱法检测脐带血血清25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3浓度

目的建立一种测定脐带血25-羟基维生素D2[25（OH）D2]和25-羟基维生素D3[25（OH）D3]浓度的方法。方法脐带血血清样本前处理采用饱和硫酸锌和乙腈的蛋白沉淀法。采用液相色谱串联质谱法（LC．MS／MS）测定25（OH）D2和25（OH）D3浓度。固定相为Poroshell@120EC-C18正向柱；电喷雾离子源（ESI）；多反应监测模式（MRM）；喷雾电压35．0psi；喷雾温度180℃；鞘气温度350℃；鞘气流速11．0L／min。以甲醇（80％）、超纯水（20％）为流动相进行梯度洗脱，流速为0．5mL／min，柱温为50℃；质谱采用高温ESI，以选择反应监测模式进行定量分析。结果25（OH）D2和25（OH）D3在3．125～100μg/L范围内呈良好的线性关系（R^2=0．9987、0．9991）。血样冻融3次进行检测，日内、日间相对标准偏差（RSD）均〈15％。对血清25．（OH）D2和25（OH）D3质控品进行检测，结果均符合要求。结论LC—MS／MS敏感性高，分析时间短，适用于脐带血1．25（OH）D2和25（OH）D3浓度检测。

1,25二羟基维生素D3与其受体在类风湿关节炎中的作用研究进展

维生素D（vitamin D,Vit D）为固醇类衍生物,通过与维生素D受体（vitamin D receptor,VDR）结合,调节骨和钙磷代谢,防治骨质疏松,并影响多种细胞的增殖和分化,调节免疫系统。

25羟基维生素D3水平与类风湿关节炎的相关性分析

目的探讨类风湿关节炎(RA)患者25羟基维生素D3[25-(OH)D3]水平的变化。方法收集该院2016年1-8月的66例RA患者作为RA组,选择同期147例体检健康者作为对照组,检测两组研究对象25-(OH)D3水平;同时检测其超敏C反应蛋白(hs-CRP)、血细胞沉降率、抗环瓜氨酸肽抗体(抗CCP)抗体、类风湿因子,并用Pearson分析25-(OH)D3与这些指标的关系。结果 RA组患者血清中25-(OH)D3水平明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);RA组患者中25-(OH)D3水平与hs-CRP水平存在正相关(P<0.05),与抗CCP抗体存在明显正相关(P<0.01)。结论类风湿性关节炎患者25-(OH)D3水平明显降低,对疾病的预防、评估有一定的作用。

2153例儿童血清25-羟基维生素D3水平分析

临床工作中经常遇到存在佝偻病症状的患儿，而患儿家属对何时开始补充维生素D，以及维生素D缺乏对健康的影响却知之甚少。国内外已明确，血清25-羟基维生素D3125（OH）D3]水平，可作为维生素D营养状况的客观指标。本研究调查了本地区部分儿童血清25（OH）D3水平及营养状况，现报道如下。

1,25-二羟基维生素D3对致死剂量脂多糖攻击的大鼠CD_4^+CD_(25)^+Treg细胞的调节作用

目的:观察不同剂量1,25-二羟基维生素D3(1,25-(OH)2D3)短期应用对大鼠受致死剂量脂多糖(LPS)攻击后的保护作用,并探讨此保护作用是否与1,25-(OH)2D3对CD4+CD25+Treg细胞的调节作用有关。方法:将大鼠分成3个剂量组,每组20只。分别给予1,25-(OH)2D3 0.125μg/只、0.25μg/只、1μg/只灌胃,3次/周,共2周。另设对照组给予赋形剂。给药后第15天腹腔注射致死剂量LPS(10mg/kg),每组10只用于观察96 h内的死亡率;其余10只大鼠注射LPS 6 h后抽取外周血并留取脾脏标本。流式细胞仪检测大鼠外周血及脾脏CD4+CD25+Treg细胞数量,实时定量PCR检测脾脏Foxp3mRNA水平,ELISA检测外周血IL-10和TGF-β水平。结果:用1,25-(OH)2D3预处理的各组大鼠死亡率均显著低于对照组,用药各组外周血及脾脏CD4+CD25+Treg细胞数量、脾脏Foxp3mRNA表达水平、外周血IL-10及TGF-β水平也显著高于对照组。结论:1,25-(OH)2D3能够有效保护大鼠抵抗致死剂量LPS的攻击,这种保护作用可能与1,25-(OH)2D3上调CD4+CD25+Treg细胞的数量和功能有关。

孕晚期血清25羟基维生素D3水平及环境因素对早期婴儿湿疹的预测作用

目的探讨孕晚期血清25羟维生素D3[25(OH)D3]及环境因素对早期婴儿湿疹的预测作用。方法选择2016年1~12月在新疆维吾尔自治区人民医院产科门诊定期产检并住院分娩的528名孕妇为研究对象,建立队列,检测血清25(OH)D3水平,并对母婴进行6个月随访,观察婴儿湿疹的发生情况,分析孕晚期血清25(OH)D3水平对早期婴儿湿疹的预测作用。结果最终有505对母婴完成随访,有243例(48.1%)婴儿被诊断湿疹,其中56.4%(137/243)的婴儿湿疹集中发生在出生后2~3个月。根据湿疹的发生情况将婴儿分为湿疹组(n=243)和对照组(n=262),湿疹组母血25(OH)D3水平低于对照组(P<0.05)。ROC分析结果显示:曲线下面积为0.584,灵敏度为90.70%,特异度为14.17%,阳性预测值为50.18%,阴性预测值为61.52%,孕晚期母血25(OH)D3对婴儿湿疹的诊断价值较低。logistic回归分析结果显示:母亲过敏史阳性(OR=8.308,95%CI:5.131~13.45)、剖宫产分娩(OR=1.494,95%CI:0.977~2.286)、孕期经常被动吸烟(OR=1.386,95%CI:0.680~4.826)是婴儿湿疹的危险因素(P<0.05);而与孕晚期维生素D水平缺乏比较,孕晚期维生素D水平相对不足(OR=0.233,95%CI:0.138~0.392)和充足(OR=0.459,95%CI:0.270~0.779)均是婴儿湿疹的保护因素(P<0.05)。结论孕晚期血清中25(OH)D3对婴儿湿疹的预测价值较低。

1α,25-二羟基维生素D3抑制人结肠癌细胞系SW480中β-catenin转录活性

目的探讨1α,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对人结肠癌细胞系SW480中β-catenin转录活性的影响及作用机制。方法1,25(OH)2D3(100 nmol/L)干预和溶剂对照处理SW480细胞48 h;用双荧光素酶报告系统检测β-catenin的转录活性;Western blot检测1,25(OH)2D3干预后β-catenin在细胞核/质内的定位变化;用RT-qPCR和Western blot检测β-catenin和FOXM1 mRNA及蛋白水平。采用siRNA敲降SW480细胞中FOXM1后,检测1,25(OH)2D3干预后β-catenin转录活性的变化。结果1)在SW480细胞中,1,25(OH)2D3能显著降低β-catenin的转录活性(P<0.05),但不影响β-catenin mRNA和蛋白表达水平;2)1,25(OH)2D3上调SW480细胞中FOXM1蛋白水平的表达(P<0.05);3)敲降SW480细胞中FOXM1降低1,25(OH)2D3对β-catenin转录活性的抑制作用(P<0.05)。结论1,25(OH)2D3通过上调FOXM1的表达,发挥抑制β-catenin转录活性的作用。

1,25二羟基维生素D3对毛囊外毛根鞘无色素黑素细胞激活的实验研究

目的研究1,25二羟基维生素D3(1,25-Dihydroxyvitamin D3,VID)对毛囊外毛根鞘无色素黑素细胞(amelanotic melanocytes,AMMC)的激活作用。方法以高、中、低3种不同浓度的1,25(OH)2D3作用于培养的人毛囊外毛根鞘AMMC,倒置显微镜观察细胞形态的变化,然后收集细胞,测定细胞酪氨酸酶活性和黑素含量,透射电镜观察药物作用前后AMMC内黑素小体的变化,最后通过Western blot方法半定量分析药物作用前后AMMC内酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)、酪氨酸酶相关蛋白1(tyrosinase related protein-1,TRP-1)和酪氨酸酶相关蛋白2(tyrosinase relatedprotein-2,TRP-2)表达的变化。结果 VID能增加AMMC内酪氨酸酶活性,促进AMMC生成黑素,电镜结果显示药物作用后的AMMC内出现大量Ⅲ、Ⅳ期黑素小体。Western blot结果显示VID可以促进AMMC中TYR和TRP-1的表达,但对TRP-2的表达无明显影响。结论 VID通过促进黑素生成相关酶TYR和TRP-1的表达激活了AMMC。