基于D-(-)-/L-(+)-对羟基苯甘氨酸的两对手性钴配合物的合成、晶体结构和电化学识别

采用常温溶液挥发法,以D-(-)-/L-(+)-对羟基苯甘氨酸(D-/L-Hhpg)为主配体,2种含氮吡啶配体4,4'-联吡啶(4,4'-bipy)和5,5'-二甲基-2,2'-联吡啶(5,5'-BM-2,2'-bipy)为辅助配体,与Co Cl_(2)·6H_(2)O反应合成了2对手性配合物{[Co(D-hpg)(4,4'-bipy)(H_(2)O)]Cl·H_(2)O}_(n )(1-D)、{[Co(L-hpg)(4,4'-bipy)(H_(2)O)]Cl·H_(2)O}_(n )(1-L)、[Co(D-hpg)_(2)(5,5'-BM-2,2'-bipy)]Cl·5.5H_(2)O (2-D)、[Co(L-hpg)_(2)(5,5'-BM-2,2'-bipy)]Cl·5.5H_(2)O (2-L)。通过单晶X射线衍射、元素分析、红外光谱、粉末X射线衍射等多种测试方法对其结构进行分析和表征。配合物的单晶X射线衍射数据表明,配合物1-D和1-L属于单斜晶系,P2_(1)手性空间群,分别呈现1D左手螺旋链和右手螺旋链,通过4,4'-bipy分子扩展为2D网状矩形格子结构。配合物2-D属于单斜晶系,P2_(1)手性空间群,为0D小分子,在氢键的作用下形成1D超分子双链,并以ABAB形式在a轴方向堆积排布。这些配合物的结构差异归因于辅助配体和Hhpg配位模式的影响。此外,还研究了配合物的电化学性质。配合物1-D表现出电化学可逆的氧化还原行为,并可作为电化学传感器用于有效地检测组氨酸对映体和定量测定组氨酸混合物中的对映体过量。

对羟基苯甘氨酸母液中一种杂质的分离与结构确证

经萃取、解离、析晶、过滤等操作,提取对羟基苯甘氨酸母液中的一种杂质双(4-羟基苯基)乙酸。考察了萃取剂及萃取条件、析晶时间等参数对杂质提取效果的影响。优化条件下,杂质纯度达99.1%(HPLC)。杂质结构经MS、^(1)HNMR、^(13)CNMR、2DNMR等表征确证。

高效液相色谱测定D,L-对羟基苯甘氨酸

建立了乙醛酸为原料合成D,L-对羟基苯甘氨酸反应体系的分析方法,采用高效液相色谱法(HPLC)测定,以ZORBA Eclipse Plus C_(18)色谱柱(4.6×250 mm,5μm)为色谱柱,水/甲醇为流动相梯度洗脱,探讨了各种色谱条件对分离度的影响,在优化后的色谱条件下(流速为0.8 mL·min^(-1),柱温为25℃,检测波长为254 nm),D,L-对羟基苯甘氨酸与杂质A分离度大于1.5,D,L-对羟基苯甘氨酸的线性方程为y=7 602.4x+254.55,线性相关系数0.999 6,检出限(S/N=3)为0.05 mg·kg^(-1),测定下限(S/N=10)为0.18 mg·kg^(-1)。加标回收率为93.4%~101.0%,相对标准偏差(n=6)为0.7%~2.0%。该方法与薄层色谱(TLC)测定结果基本一致,但更为简单,且灵敏度高。

结晶母液回收D-对羟基苯甘氨酸的工艺优化研究

D-对羟基苯甘氨酸(D-HPG)是合成甜味剂、药物的重要中间体,为降低工艺成本,提高产品质量,提出了一种结晶母液回收D-HPG的连续色谱新工艺。优选纳滤膜进行前处理,增浓结晶母液,筛选Applexion NF200纳滤膜增浓D-HPG效果较好。通过单柱实验筛选连续色谱系统填料树脂,其中Applexion XA945树脂对D-HPG和硫酸铵分离度可达16。进一步对色谱系统的分离效果进行研究,结果表明,经连续色谱分离后,进料液中D-HPG平均纯度由42.2%提高至96.3%,平均收率达91%。利用连续色谱系统从结晶母液中回收D-HPG,是较有前途的工艺。与传统工艺相比,新工艺既保证了D-HPG总收率,又降低其工艺成本,提高了产品质量。

脂肪酶催化外消旋对羟基苯甘氨酸甲酯水解制备对映体纯D-对羟基苯甘氨酸的新方法

基于在反应体系中添加碳酸氢铵可有效地促进酶促外消旋对羟基苯甘氨酸甲酯不对称水解这一有趣现象的发现 ,探讨了利用有机介质中酶促外消旋对羟基苯甘氨酸甲酯不对称水解制备对映体纯 D 对羟基苯甘氨酸及其衍生物的可能性 ,研究了不同来源的酶、摇床转速、水含量、对羟基苯甘氨酸甲酯浓度、反应介质及温度等因素对该反应的影响 .结果表明 ,在所研究的 11种酶中脂肪酶Novozym 4 35对该反应的催化活性和对映体选择性较高 ,叔丁醇为最合适的反应介质 ,最适水含量为0 4 % (V/V) ,对羟基苯甘氨酸甲酯的适宜浓度为 2 0mmol/L ,最适摇床转速和反应温度分别为 130r/min和 30℃ .在此优化条件下反应 2 6h后 ,底物转化率和产物ee分别为 39 8%和 95 2 % .

高效液相色谱法测定D-对羟基苯甘氨酸

建立了反应体系中 D-对羟基苯甘氨酸、N-氨甲酰 - D-对羟基苯甘氨酸、DL-对羟基苯海因 3者含量的测定方法。采用高效液相色谱法测定 ,以 Kromasil- C18为固定相 ,φ(乙腈 )∶ φ(水 )∶ φ(磷酸 (85 % ) ) =10∶ 90∶0 .0 1为流动相 ,紫外检测波长为 2 10 nm。3者回收率分别为 99.5 % ,98.6 %及 99.6 % ,RSD为 0 .11% ,0 .13%和0 .2 1%。实验结果表明该法简便、快速。

DL-对羟基苯甘氨酸的不对称转化研究

实验表明L-对羟基苯甘氨酸在水杨醛的催化下,其消旋速率随羧酸溶剂的酸度降低而增加。在此基础上研究了DL-对羟基苯甘氨酸的不对称转化:以(+)-苯基乙磺酸为拆分试剂,水杨醛为催化剂,在正丁酸溶剂中进行不对称转化,获得D-对羟基苯甘氨酸收率95.1%,旋光纯度98.3%。

双酶法合成中D-对羟基苯甘氨酸及其中间体的测定

建立了双酶法合成中D 对羟基苯甘氨酸及其中间体N 氨甲酰基 D 对羟基苯甘氨酸的定量检测方法 :前者通过测反应混合物中NH4+ 的增加来定量 ,后者则以PDAB显色定量。此法对NH4+ 和N 氨甲酰基 D 对羟基苯甘氨酸的回收率分别为 97.7%～ 10 2 .5 %和 98.4 %～ 10 1.7%。

添加剂对酶促外消旋对羟基苯甘氨酸甲酯不对称水解反应的影响

系统探讨了通过添加剂(β-环糊精、牛黄胆酸钠、6种表面活性剂、Ca2+、Mn2+)来调控Novozym435催化外消旋对羟基苯甘氨酸甲酯水解反应的酶活性和对映体选择性。结果表明在所研究的10种添加剂中,Mn2+(浓度大于3mg/ml)和表面活性剂CTAB可提高该酶促反应速度却降低对映体选择性,牛黄胆酸钠与Ca2+(浓度大于2mg/ml)对该反应有负面影响,其余6种添加剂(β-环糊精、吐温40、吐温80、司盘60、司盘80、十二烷基磺酸钠)则无任何影响。

对羟基苯甘氨酸乙二醇酯盐酸盐的合成研究

合成对羟基苯甘氨酸乙二醇酯盐酸盐时,对羟基苯甘氨酸∶乙二醇∶氯化亚砜=1∶1.5∶1.5,在-10℃～0℃下酰化8 h,pH=6,将20 mL CH2Cl2直接加入作溶剂,20 mL CH2Cl2与氯化亚砜混合后滴加,滴加时间为2 h～3 h,反应总收率为96%.

有机介质中酶促对羟基苯甘氨酸酯不对称水解的研究

为了进一步探讨利用有机介质中酶促外消旋对羟基苯甘氨酸酯不对称水解反应制备对映体纯对羟基苯甘氨酸的可能,优化反应条件,研究了不同来源的酶、有机介质及底物结构等因素对该反应的影响。结果表明,脂肪酶Novozym 435为最适催化剂;在所研究的四种有机溶剂中叔丁醇为最适有机介质;最适底物为对羟基苯甘氨酸甲酯。同时在该反应体系中,脂肪酶Novozym 435表现出较好的热稳定性和操作稳定性。

制备D-对羟基苯甘氨酸新工艺

以D-3-溴代樟脑-8-磺酸铵(简称D-ABCS)为拆分剂,冰醋酸为溶剂,加少量浓硫酸,以水杨醛为催化剂,使目标对映体的拆分及非目标对映体的外消旋化同时进行,获得高收率、高纯度的D-对羟基苯甘氨酸。

D-对羟基苯甘氨酸生产过程的高效毛细管电泳法分析

建立了高效毛细管电泳法测定酶法反应体系中D-对羟基苯甘氨酸、DL-对羟基苯海因、N-氨甲酰基-D-对羟基苯甘氨酸的含量。采用未涂层石英毛细管柱,运行缓冲液为20mmol/L硼砂缓冲液(pH9.0),检测波长230nm。分离电压30kV,进样压力0.5psi,进样时间5s,采用苯酚为内标。三成分均在0.01%～0.1%范围内线性关系良好。

D-对羟基苯甘氨酸的酶法生产工艺研究

利用自行从土壤中分离的假单胞菌 sp.2 2 6 2产生的酶 ,在诱导剂的作用下 ,建立了以 DL-对羟基苯海因为底物制备 D-对羟基苯甘氨酸的方法 ,确定了发酵及酶转化的最佳工艺条件。

双酶法合成D-(-)-对羟基苯甘氨酸

目的 研究用土壤杆菌CPU12 95完整细胞双酶转化法生产D ( ) 对羟基苯甘氨酸。方法 通过测定D 海因酶及D 氨甲酰酶的比活力来选择发酵和转化反应条件。结果 经优化 ,两酶化活力分别达到 1.3u/ml发酵液和 0 .46u/ml发酵液 ,终产物经鉴定为D ( ) 对羟基苯甘氨酸。结论 本法是一种有发展前途的生产工艺。

对羟基苯甘氨酸在水-丙酮-硫酸混合溶剂中的溶解度及介稳区

分别采用恒温溶解法和变温溶解法测定了对羟基苯甘氨酸在水-丙酮-硫酸混合溶剂中的溶解度曲线和超溶解度曲线,利用激光监视装置检测测定系统中晶体的消失和产生,实验温度范围约为303～323K.随着混合溶剂中水的增加,溶解度略有增加;酸度增加,溶解度有较大幅度的增加.用经验方程二次多项式关联溶解度与温度的关系,计算的溶解度和实验值符合良好.测得的超溶解度曲线与溶懈度曲线基本平行,介稳区宽度以最大过冷度表示约为1.5～2.4K,温度升高时介稳区宽度略有减少.溶剂中水含量或硫酸含量增加将使介稳区宽度变小;降低搅拌速度使介稳区明显变宽.实验结果可应用于优先结晶法拆分对羟基苯甘氨酸.

化学酶法合成D-对羟基苯甘氨酸

采用乙二醛、苯酚和尿素为原料化学合成底物ＤＬ－对羟基苯乙内酰脲。以沟槽假单孢菌ＣＰＵ１６２８或放线形土壤杆菌ＣＰＵ１２１１为酶源，将ＤＬ－对羟基苯乙内酰脲生物转化为Ｄ－对羟基苯甘氨酸，产率分别为８６％和８０％。

树脂吸附法处理D-对羟基苯甘氨酸生产中含酚废水的研究

用XH - 30 3大孔吸附树脂处理D 对羟基苯甘氨酸生产中产生的含酚废水 ,除酚率99 9% ,最大单程处理量为树脂体积的 2 5倍 ,脱附液经酸化处理后可直接用于DL 对羟基苯甘氨酸的合成 ,不产生二次污染 ,并可使合成收率提高 5 %～ 10 %。

用sp.2262菌制备D-对羟基苯甘氨酸反应动力学

研究了以DL -对羟基苯海因为原料 ,用sp 2 2 62恶臭假单胞菌 (Pseudomonasputida)直接酶催化生产D -对羟基苯甘氨酸的反应动力学 .考察了DL -对羟基苯海因溶解过程和海因酶、氨甲酰水解酶酶解反应的动力学特性 .建立了全过程的动力学模型并进行了计算 ,求解了过程的参数值 ,讨论了 pH值对各参数的影响 ,确定了反应的优化操作条件 .

D-对羟基苯甘氨酸的合成

以水为溶剂 ,取代芳磺酸为拆分剂 ,用诱导结晶法 ,经成盐、拆分、水解过程 ,将DL-对羟基苯甘氨酸拆分成 D-对羟基苯甘氨酸。考察了 DL-对羟基苯甘氨酸与取代芳磺酸的质量比对成盐反应的影响、取代芳磺酸的质量分数对诱导结晶温度的影响及养晶时间对拆分收率和纯度的影响 ,优化了其工艺条件。结果表明 :DL-对羟基苯甘氨酸与取代芳磺酸的质量比为 2 5 ,取代芳磺酸的质量分数为 2 7.5 % ,养晶时间控制在 8～ 1 0 min,产品收率最高 ,为 93%。同时 ,采用 IR、13C- NMR及 1H-