高效液相色谱法测定化妆品中14种α-羟基酸和羟基酸酯

采用高效液相色谱法(HPLC)建立同时测定化妆品中14种α-羟基酸和羟基酸酯含量的方法,并结合高效液相色谱-串联质谱联用法(HPLC-MS/MS)确证结果。采用高效液相色谱法,以0.05 mol/L的磷酸氢二铵水溶液和甲醇为流动相进行梯度洗脱,采用Waters T3-C_(18)(4.6×250 mm,5μm)色谱柱分离,采用二极管阵列检测器检测,以214 nm为检测波长,外标法定量。采用高效液相色谱-串联质谱联用法,以0.1%甲酸水溶液和含0.1%甲酸乙腈为流动相进行梯度洗脱,采用Waters T3-C_(18)(2.1×100 mm,1.8μm)色谱柱分离,电喷雾电离,正、负离子多反应监测模式定性。14种化合物在各自质量浓度范围内呈良好的线性关系,相关系数R2均大于0.999。4种基质样品,14种化合物平均加标回收率均在85%~115%范围内,相对标准偏差均小于5%,检出限为1~150μg/g,定量限为3~450μg/g。对7批含α-羟基酸和酯的样品进行液质确证,结果均为阳性。该方法操作简便、准确度好、灵敏度高,适用于化妆品中14种α-羟基酸及其酯的测定。

高效液相色谱法和质谱法检测和鉴定化妆品中5种羟基酸

建立了同时测定化妆品中乳糖酸、葡萄糖酸、甘油酸、丙酮酸、羟基丙二酸5种羟基酸含量的高效液相色谱法,并采用液相色谱-串联质谱法进行了鉴定。样品先用少量异丙醇分散,再经一级水提取后,以30 mmol/L乙酸铵水溶液(磷酸调节pH至2.9)-甲醇作为流动相,经ZORBAX SB-Aq(250 mm×4.6 mm×5μm)色谱柱分离,用二极管阵列检测器进行检测;若出现疑似阳性样品,则进一步采用液相色谱-串联质谱法进行确证,采用ESI离子源,在SRM负离子监测模式下分别确立了5种羟基酸组分的定量、定性离子以及离子对的相对丰度比。结果表明,5种羟基酸在各自浓度范围内线性关系良好,相关系数均大于0.999,检出浓度为30~100 mg/kg,定量浓度为120~300 mg/kg,平均加标回收率为91.8%~104.1%,RSD为0.1%~1.9%。该方法高效、准确、可靠,适用于化妆品中5种羟基酸组分的定性筛查及含量测定。

羟基酸与Ⅲ型胶原蛋白的护肤功效研究

旨在研究验证羟基酸和重组Ⅲ型胶原蛋白对皮肤水分及屏障的影响。招募志愿者共12人,使用多功能皮肤测试仪测量了受试者连续使用含羟基酸和Ⅲ型胶原蛋白护肤品时皮肤水分含量、经皮失水量的变化。结果表明复合酸类产品具有保湿补水、修复屏障的功效,且其补水效果与酸种类有关。证明了重组Ⅲ型胶原蛋白对于促进皮肤水含量提升及经皮失水量降低有显著效果,且当水杨酸与Ⅲ型胶原搭配时会发挥协同作用,可以进一步强韧屏障,实现皮肤水含量的大幅度提升。

乙酰羟基酸合酶在支链氨基酸生产中的研究进展

乙酰羟基酸合酶(acetohydroxyacid synthase,AHAS)是一种硫胺素二磷酸(thiamine diphosphate,ThDP)依赖性酶,是催化支链氨基酸(branched chain amino acid,BCAA),即L-缬氨酸、L-亮氨酸、L-异亮氨酸生产的第一步关键酶。AHAS容易受到末端产物BCAA的反馈抑制,从而抑制该酶的活性并影响流向支链氨基酸的碳通量。因此,AHAS成为高产支链氨基酸的重要靶点,对AHAS的改造具有重要意义。本文介绍AHAS的结构、催化机理以及该酶在BCAA合成途径中的作用,总结对该酶催化过程的研究现状以及目前对AHAS的分子改造策略,最后提出该酶未来的研究方向以及改造策略。

超高效液相色谱-三重四极杆质谱法同时测定化妆品中13种α-羟基酸的含量

提出了超高效液相色谱-三重四极杆质谱法(UHPLC-MS/MS)同时测定化妆品中13种α-羟基酸含量的方法。样品0.2g经水超声提取30min(不易分散样品经异丙醇分散均匀后用水超声提取),提取液经离心过滤后采用UHPLC-MS/MS分析,13种目标物在Agilent Zorbax RRHD SB-Aq C_(18)色谱柱上分离,以不同体积比的0.1%(体积分数)甲酸溶液和乙腈混合液为流动相进行梯度洗脱,质谱分析采用电喷雾离子源,负离子、多反应监测模式采集。结果表明:13种α-羟基酸的质量浓度在一定范围内与对应的峰面积呈线性关系,羟基辛酸、二苯乙醇酸、α-羟基癸酸的检出限(3S/N)为0.030μg·g^(-1),羟基乙酸、乳酸的检出限(3S/N)为3.0μg·g^(-1),其余8种α-羟基酸的检出限均为0.30μg·g^(-1)。按照标准加入法进行回收试验,回收率为85.1%~114%,测定值的相对标准偏差(n=6)均小于10%。方法用于分析20批样品,α-羟基酸检出总量为20~6800mg/100g,仅有1批α-羟基酸总量超标。

α-羟基酸与α-氨基酸共聚物的研究进展

聚(α-羟基酸/α-氨基酸)是一种新颖而优良的可降解生物材料,它兼具聚α-羟基酸和聚α-氨基酸的优点,近年来得到人们越来越广泛地重视和研究。综述了其各种合成方法的优劣及以它为组分之一的共聚物的合成、应用和研究进展。

5种α-羟基酸提取蓝莓中花色素的条件选择及分析

研究了5种α-羟基酸(柠檬酸、杏仁酸、甘醇酸、苹果酸、酒石酸)提取蓝莓中花色素的最佳提取条件。以酸类型、提取时间、提取温度、液料比为影响因素,以提取液中花色素含量为判定指标,采用四因素五水平正交试验优化提取工艺。试验结果表明,在4个因素中,提取温度对结果影响最大,提取时间次之,其中提取温度40℃提取效果最好,20℃和30℃之间提取效果相似,提取时间5 min和20 min之间提取效果相似,液料比10 mL/g提取效果最好。综合考虑花色素的降解和实际使用效果,结合方差分析数据,得出在1 g蓝莓中加入3 mL0.5%杏仁酸和7 mL水,在20℃温度下,提取5 min为提取花色素的最佳方案。

高效液相色谱法同步检测化妆品中的6种羟基酸

采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)同时测定化妆品中乳糖酸、乙醇酸、酒石酸、乳酸、柠檬酸和苹果酸等6种羟基酸。结果表明,在C18Hypersil ODS色谱柱上,以pH=2.70,0.085 mol/L Na2HPO4-H3PO4缓冲液为流动相,流速为0.8 mL/min,进样量10μL,柱温25℃,紫外检测波长为214 nm时,可以较好地分离和测定化妆品中的6种羟基酸。该方法检测6种羟基酸的相对标准偏差(RSD)为1.20%~4.50%,回收率92%~109%,检出限(LOD)0.004 g/L^0.037 g/L,适用于市售化妆品中羟基酸的常规分析。

羟基酸引发ε-己内酯开环聚合的研究

研究了水、醇、羧酸存在下ε 己内酯开环聚合的情况 ,发现在适当温度下 (80℃ ) ,羧基并不引发ε 己内酯的开环聚合 ,但对羟基引发ε 己内酯开环聚合起加速作用 ,而且催化能力与酸度有关 .进而又对羟基酸(乙醇酸、DL 苹果酸、柠檬酸 )引发ε 己内酯开环聚合做了研究 ,合成了一系列含不同数目遥爪羧基的α 羟基 ω 羧基 (1,2 ,3)己内酯低聚物 (HCPCL) ,并对其结构做了酸值滴定、羟值滴定、UV、FTIR与1H NMR分析 .对羧基催化羟基引发ε

拟南芥乙酰羟基酸合成酶与磺酰脲的相互作用以及CoMFA研究

在分子水平上较为详尽地研究了85个磺酰脲类化合物与植物源野生型拟南芥AHAS酶的离体相互作用,测定了这些化合物对AHAS酶的抑制常数Kiapp.采用比较分子力场方法(CoMFA)对这些化合物与AHAS酶的相互作用进行了三维构效关系研究,用此模型预测了检验组10个化合物的pKiapp值,模型的预测结果与测试结果一致.

手性气相色谱分离α-醇腈和α-羟基酸对映体

以 3-丙酰基 - 2 ,6- O-二戊基 -γ-环糊精和 3-三氟乙酰基 - 2 ,6- O-二戊基 -γ-环糊精为手性固定相 ,利用气相色谱进行了 α-醇腈化合物、α-羟基酸以及二者共存时的对映体分离。系统观察了影响对映体分离的主要因素 ,优化了十种 α-醇腈和七种α-羟基酸拆分条件 ,3-三氟乙酰基 - 2 ,6- O-二戊基 -γ-环糊精毛细管柱的分离因子达到 1 .0 5～ 3.1 2 ,对 α-醇腈的拆分效果优于对应的 α-羟基酸 。

DBU的合成及其在羟基酸和伯醇消除反应中的应用

己内酰胺与丙烯腈在乙醇中反应生成Ｎ－（２－氰乙基）己内酰胺接着用ＲａｎｅｙＮｉ－ＫＢＨ＿４在温和条件下还原得到Ｎ－（３－氨基丙基）己内酰胺 再经脱水即得ＤＢＵ３．研究了ＤＢＵ在ω－羟基（烯）酸和伯醇消除反应中的作用。

羟基酸的离子相互作用间接光度反相色谱研究

本文研究芳香族酸性、碱性、两性紫外检测试剂的羟基酸间接光度反相色谱体系;探讨试剂性质、浓度、pH值等对分离和检测灵敏度的影响及分离检测机理,提出新的高灵敏度羟基酸间接光度色谱方法。

油菜乙酰羟基酸合酶基因BnAHAS1的克隆及其重组蛋白质的原核表达

利用RT-PCR技术从甘蓝型油菜宁油16号(Brassica napus L.)中克隆到乙酰羟基酸合酶基因BnAHAS1的cDNA序列,该序列含有1个1 968 bp的开放阅读框,编码蛋白质655个氨基酸,分子量约为7.1×104,预测等电点为6.16。将该基因克隆到原核表达载体pCold II中,经酶切和测序鉴定后,将正确的重组质粒pCold IIBnAHAS1导入大肠杆菌BL21(DE3)。在15℃下以终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导12 h后,获得预期大小的重组蛋白质His-BnAHAS1,并用Western blot确定此重组蛋白质为目的蛋白质。

α-羟基酸在不同的手性配体交换色谱固定相上分离性能的考察

合成了L 羟基脯氨酸 ,L 脯氨酸 ,L 苯丙氨酸 3种硅胶键合手性配体交换色谱固定相 ,并用于α 羟基酸的直接光学分离 ,取得了较为满意的结果。对不同的手性配体交换色谱固定相的分离性能进行了比较 ,并详细考察了流动相pH值、金属离子浓度、柱温等因素对分离效果的影响 ,从而进一步优化了色谱分离条件。

新型组织工程支架材料——α-羟基酸与α-氨基酸共聚物的研究进展

本文综述了新型组织工程聚合物支架材料———α -羟基酸与α -氨基酸共聚物的合成途径及最新进展 。

以铜(Ⅱ)-L-羟基脯氨酸配合物为手性选择剂的配体交换毛细管区带电泳拆分α-羟基酸

在使用10mmol/L NH4Ac(pH 4.5),30mmol/L Cu(Ac)2和60mmol/LL-羟基脯氨酸的优化条件下,13min内拆分了3种α-羟基酸对映体(DL-苹果酸、DL-苦杏仁酸和DL-对溴苦杏仁酸),除苹果酸外均获得了满意的拆分结果;考察了电泳缓冲液组成、pH值等影响分离效果的因素。

高效液相色谱柱后化学发光检测技术对杉科植物中羟基酸的分析应用

目的:本文建立了用高效液相色谱分离柱后化学发光法测定杉科植物中羟基酸含量。方法:基于在酸性介质中高锰酸钾直接氧化酒石酸、苹果酸和莽草酸等羟基酸产生化学发光,而盐酸氨基脲能够显著增强该体系的发光强度。采用 kBPCL 超微弱发光测量仪作为检测器,Hypersil ODS(4.6mm×150mm,5μm)柱,高氯酸(pH=2.5)溶液为流动相,流速0.8mL·min^(-1)。结果:酒石酸、苹果酸和莽草酸浓度分别在8.6×10^(-7)～2.6×10^(-4)(r=0.9991),9.6×10^(-8)～3×10^(-4)(r=0.9999),2.2×10^(-7)～3.5×10^(-3)g·mL^(-1)(r=0.9998)范围内,与峰面积有良好的线性关系;检出限分别为3.54×10^(-8),2.24×10^(-9),2.02×10^(-8)g·mL^(-1)(S/N=3)。结论:该法简便、快速、有效,灵敏度高,首次用于杉科植物中羟基酸的测定,取得了很好的结果。

离子色谱法测定化妆品中的α-羟基酸

本文采用离子色谱法，选用盐酸淋洗液，氢氧化钠再生液，简便、有效地分离检测化妆品中的α－羟基酸：丙酮酸、酒石酸、柠檬酸、苹果酸、乙醇酸及乳酸。测定方法的相关性好（ｒ＞０．９９９０），线性范围广，检出浓度低，精密度高（ＲＳＤ％＜０．５），样品加标回收率９１．５－１０５．０％。同时对测定的酸度、共存非测定离子、相邻离子间等干扰因素进行研究，确保测定的准确性，结果令人满意。

HPLC法测定比格犬血浆中的辛伐他汀及辛伐他汀羟基酸

目的:建立血浆中辛伐他汀及其主要代谢活性成分辛伐他汀羟基酸的含量测定方法。方法:以洛伐他汀为内标物质,流动相采用甲醇-水-冰醋酸(74:26:0.5),检测波长为238nm,流速为1.0mL·min^(-1)。血浆样品采用乙腈沉淀蛋白处理。并测定了10只比格犬单剂量口服辛伐他汀自乳化胶囊和市售片后的血药浓度。结果:血浆中内源性物质对辛伐他汀及辛伐他汀羟基酸的测定无干扰;最低检出限辛伐他汀为0.5ng·mL^(-1),辛伐他汀羟基酸为0.75ng·mL^(-1);辛伐他汀羟基酸在2～100ng·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好,r=0.9989,辛伐他汀在1～50ng·mL^(-1)浓度范围内线性关系良好,r=0.9993;绝对回收率为79.68%～95.3%,方法回收率为89.1%～95.3%;日内精密度 RSD≤2.9%、日间精密度 RSD≤4.6%。结论:本方法处理简单,无干扰,灵敏度高,适合测定生物样本中的辛伐他汀及辛伐他汀羟基酸。