17β-羟甾类固醇脱氢酶Ⅱ在异位子宫内膜的表达缺陷及其意义

目的研究子宫内膜异位症的异位内膜、在位内膜17β-羟甾类固醇脱氢酶Ⅱ(17β-HSDⅡ)的表达,探讨其在子宫内膜异位症发病中的意义。方法采用RT-PCR检测67例子宫内膜异位症患者的异位子宫内膜、32例在位内膜组织17β-HSDⅡmRNA的表达,并与35例对照组正常子宫内膜比较。结果(1)正常子宫内膜自增生晚期始有17β-HSDⅡmRNA微量表达,分泌期逐渐增高并于分泌晚期达到高峰;在位内膜的表达趋势与正常子宫内膜一致,但强度低于正常内膜(P<0.01);(2)异位内膜未检出17β-HSDⅡmRNA。结论子宫内膜异位症存在17β-HSDⅡmRNA表达缺陷,导致异位内膜局部雌激素代谢障碍,持续的雌激素微环境改变,促进异位内膜生长。

调神益肾针法对更年期大鼠卵巢、肾上腺皮质中3β-羟类固醇脱氢酶的影响

目的:研究调神益肾针法对更年期大鼠卵巢、肾上腺中3β-羟类固醇脱氢酶(3β-HSDH)的影响。方法:建立自然的更年期大鼠模型,实验动物包括青年组、更年组、针刺组,采用细胞酶化学技术,辅以计算机图像分析,观测卵巢、肾上腺中阳性物质总面积、积分光度值。结果:更年组大鼠卵巢窦状卵泡及成熟黄体细胞中3β-HSDH含量或活性明显降低,间质腺及肾上腺皮质束状带、网状带细胞中该酶的含量或活性仍维持正常。经针刺干预后,上述部位该酶的含量或活性均有显著提高。结论调神益肾针法能增加卵巢、肾上腺中雌激素合成关键酶的含量或活性,这可能是针刺提升体内雌激素水平的物质基础之一。

TNF-α介导的11-β羟类固醇脱氢酶1表达和活性变化对3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性的影响

目的:观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)介导的11-β羟类固醇脱氢酶1(11-βHSD-1)表达和活性变化对3T3-L1脂肪细胞胰岛素敏感性的影响。方法:以TNF-α以及TNF-α分别与阿司匹林、2’-hydroxy-flavanone和RU486联合作用3T3-L1脂肪细胞,然后检测细胞11-βHSD-1mRNA表达和活性以及胰岛素刺激的葡萄糖摄取能力。结果:TNF-α增加3T3-L1脂肪细胞11-βHSD-1 mRNA表达和活性,同时降低细胞胰岛素刺激的葡萄糖摄取。阿司匹林减轻了TNF-α对11-βHSD-1 mRNA表达和活性的上调作用,并减轻TNF-α对胰岛素刺激的葡萄糖摄取的抑制作用;11-βHSD-1活性特异抑制剂2’-hydroxy flavanone和皮质醇受体拮抗剂RU486也可减轻TNF-α对胰岛素刺激的葡萄糖摄取的抑制作用。结论:TNF-α可通过提高3T3-L1脂肪细胞11-βHSD-1的表达和活性而降低细胞对胰岛素的敏感性。

乳腺癌与其周围正常组织17β羟类固醇脱氢酶活性的比较

测定了１６例乳腺癌及癌旁正常组织标本的１７β羟类固醇脱氢酶（１７β－ＨＳＤ）活性和Ｅ２水平。结果显示，癌组织１７β－ＨＳＤ活性较正常组织明显下降，而Ｅ２水平升高。提示该酶活性及Ｅ２水平的改变与乳腺癌有关，但二者的变化无明显相关性（ｒ＝－０．３５４，Ｐ＞０．１）

17β-羟基类固醇脱氢酶13在酒精性肝病中的作用机制及临床应用

17β-羟基类固醇脱氢酶13(HSD17B13)是一种新型肝细胞特异性脂滴相关蛋白,参与肝细胞脂质合成。最近的研究发现,HSD17B13基因的插入缺失变体与慢性肝脏疾病风险降低相关。然而HSD17B13具体的生物学功能和参与肝脏疾病的发病机制尚不明确。阐述了HSD17B13的生物学功能及其在酒精性肝病中的作用机制及临床应用研究进展。

膜联蛋白5对大鼠睾丸间质细胞中类固醇急性调节蛋白和睾酮合成相关酶表达的影响

目的:研究膜联蛋白5(annexin 5)对大鼠睾丸间质细胞(Leydig细胞)睾酮合成相关蛋白和酶表达的影响。方法:原代培养大鼠睾丸间质细胞24 h后,用10-9mol/L的annexin 5处理间质细胞12 h和24 h,分别提取细胞总RNA和总蛋白;反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测类固醇急性调节蛋白(steroidogenic acute regulatory,StAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroid dehydrogenase,3β-HSD)、17α-羟化酶(17α-hydroxylase,CYP17A)、17β-羟基类固醇脱氢酶Ⅹ型(17β-HSD10)mRNA表达的改变,并用蛋白免疫印迹方法(Western blotting)检测蛋白表达水平的变化。结果:与对照组相比,在mRNA水平上,annexin 5处理细胞12 h后,只有17β-HSD10的表达升高了26%(P<0.05),其他差异均无统计学意义,而处理24 h后,StAR、P450scc和3β-HSD的表达分别升高55%、69%和59%(P<0.05),17β-HSD10升高了104%(P<0.01),17α-hydroxylase表达则无显著差异;在蛋白水平上,annexin 5处理细胞12 h后,17β-HSD的表达升高了39%(P<0.05),而处理24 h后发现,除StAR表达无显著变化外,P450scc、3β-HSD和17β-HSD的表达分别升高了35%、88%(P<0.05)和47%(P<0.01)。结论:Annexin 5对睾酮合成具有调节作用,这种作用是通过在基因水平和蛋白水平上影响P450scc、3β-HSD和17β-HSD的表达而实现的。

迟发型21羟化酶缺陷症的临床特点

本文对8例迟发型和42例非失盐性经典型21-羟化酶缺陷症(21 H D)患者的临床表现进行了比较。两组患者全部为女性。结果发现:(1)迟发型患者女性特征有较好发育,8例中6例月经已来潮,4例基本正常,5例有不同程度乳房发育;经典型全部为原发性闭经,仅1例乳房为Ⅱ期,余全部为Ⅰ期;(2)迟发型患者男性化程度轻,虽全部有轻度阴蒂肥大,但均无明显大阴唇融合;经典型阴蒂肥大重,且42例中有20例大阴唇融合显著。迟发型8例中有4例仅有多毛及月经紊乱或不育,无明显男性体型、喉结增大、嗓音增粗及胡须;经典型10岁以上的25例男性化程度严重。

11β-羟基类固醇脱氢酶1与2型糖尿病

2型糖尿病是一种慢性代谢性疾病，可以引起许多并发症，其死亡率位于心血管疾病和肿瘤之后，居第三位。当前在全世界范围内糖尿病呈现出大流行的趋势。作为一个重大的公共卫生问题，糖尿病越来越受到人们的广泛关注。

雷公藤内酯醇药物血清对体外培养的大鼠肾上腺皮质细胞分泌功能的影响

目的:研究雷公藤内酯醇药物血清对体外培养的大鼠肾上腺皮质细胞分泌功能的影响。方法:将SD大鼠30只随机分成对照组、泼尼松组和低、中、高剂量雷公藤内酯醇组,相应药物灌胃7d制备药物血清。分离正常大鼠肾上腺皮质细胞,分别加入药物血清常规培养48h后,采用免疫组织化学法观察增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达,并计算PCNA阳性细胞数;透射电子显微镜观察肾上腺皮质细胞的超微结构;酶联免疫吸附测定法检测细胞培养上清液中皮质酮水平;实时荧光定量聚合酶链式反应法检测肾上腺皮质细胞3β-羟基类固醇脱氢酶(3β-hydroxysteroi ddehydrogenase,3β-HSD)mRNA表达水平。结果:各个浓度雷公藤内酯醇药物血清组肾上腺皮质细胞培养上清液中皮质酮水平及细胞中3β-HSDmRNA表达水平较对照组明显升高;中、高剂量雷公藤内酯醇组PCNA阳性细胞比率高于对照组(P<0.05),泼尼松组上清液中皮质酮水平、细胞中3β-HSDmRNA表达水平和PCNA阳性细胞比率均低于对照组(P<0.05)。结论:雷公藤内酯醇对体外培养的大鼠肾上腺皮质细胞有刺激作用,可以促使肾上腺皮质细胞分泌皮质酮。

血浆总胆汁酸与原发性高血压的关系

目的 探讨血浆总胆汁酸水平在高血压发病中的作用。 方法 采用酶法检测 10 3例高血压患者的血浆总胆汁酸水平 ,并与 45例肝胆疾病患者及 5 0例健康对照组进行比较。 结果 原发性高血压患者血浆总胆汁酸水平明显高于继发性高血压患者及对照组 ;肝胆疾病组血浆总胆汁酸水平显著高于其他组但血压并不增高。结论 胆汁酸作为 11-β-羟类固醇脱氢酶的内源性抑制剂 ,与原发性高血压的发生存在一定的关系。

17β-HSD3抑制剂抗前列腺癌活性及急性毒性的研究

目的探讨17β-羟基类固醇脱氢酶3(17β-HSD3)抑制剂的抗前列腺癌活性、药代动力学及其急性毒性。方法取对数生长期人雄激素依赖性前列腺癌LNCaP细胞,设置空白对照组(Con组)、姜黄素组(Cur组,Cur 150µmol/L)、雄激素受体(AR)抑制剂组(AR inhibitor组,AR抑制剂5µmol/L)和姜黄素类似物H7组(H7组,H7150µmol/L),分组处理后采用xCELLience RTCA DP细胞分析仪检测各组细胞活性、流式细胞术检测细胞凋亡率、Western blot法检测细胞中Caspase-3、AR蛋白表达。C57小鼠32只,采用随机数字表法分成4组(n=8),分别为空白对照组和姜黄素类似物H7高、中、低剂量组。用1%羧甲基纤维素钠(CMC-Na)溶解H7(100、50、25 mg/kg),每天灌胃1次,空白对照组小鼠灌胃1%CMC-Na,观察小鼠有无死亡及异常现象,14 d后取材,苏木素-伊红(HE)染色,观察肝脏和肾脏的病理形态学变化。SD大鼠10只,用1%CMC-Na溶解H7(5 mg/kg)灌胃后,高效液相色谱仪(HPLC)检测血药浓度,分析药代动力学参数。另取SD雄性大鼠10只,H7(5 mg/kg)灌胃30 min后,HPLC检测大鼠脑、肝、脾、肺、小肠、胃、肾、心和睾丸中药物浓度,考察药物组织分布。结果与Con组比较,Cur组、AR inhibitor组和H7组LNCaP细胞的细胞指数(CI值)显著下降,凋亡率明显升高,Caspase-3蛋白表达水平明显升高,而AR蛋白表达水平降低(P<0.05);H7组凋亡率较Cur组和AR inhibitor组明显升高(P<0.05)。连续灌胃H714 d,小鼠未出现活动增加、流涎、抽搐、昏迷等异常现象。与Con组相比,小鼠肝脏和肾脏未见明显的病理形态学变化。药代动力学参数结果显示,测出血药浓度-时间曲线下面积(AUC)为(557.31±36.12)mg/(L·h);峰浓度(Cmax)为(36.92±1.29)mg/L;最高峰时间(t_(max))为2 h;消除半衰期(t_(1/2))为(22.13±1.74)h。H7在小肠中的浓度约是脑组织中的5000倍。结论H7作为17β-HSD3抑制剂,具有明显抗激素依赖性前列腺癌的活性和良好的药代动力学参数,无明显的急性毒性作用,以胃肠吸收为主,具有进一步研究开发前景。

低氧对雄性大鼠睾酮分泌及其合成相关蛋白和酶表达的影响

目的研究低氧对雄性大鼠睾酮分泌及其合成相关蛋白和酶表达的影响。方法36只雄性Wistar大鼠随机分为常氧、低氧5 d、低氧15 d和低氧30 d组。运用放射免疫测定法和反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)方法,研究了模拟海拔5000 m高度低氧5 d、15 d、30 d对雄性Wistar大鼠血中睾酮浓度的影响,以及对睾丸组织中睾酮合成相关的类固醇急性调节蛋白(STAR)、胆固醇侧链裂解酶(P450scc)以及3β-羟甾脱氢酶(3β-HSD)mRNA表达的影响。结果模拟海拔5000 m高度低氧15 d,大鼠血中睾酮浓度显著高于常氧组(P＜0．05),低氧30 d,大鼠血中睾酮浓度显著低于对照组(P＜0．05);低氧不引起雄性大鼠睾丸组织StAR mRNA表达改变;低氧15 d、30 d,大鼠睾丸组织P450scc mRNA和3β-HSD mRNA表达分别显著低于常氧组(P＜0．05)。结论慢性低氧抑制了睾酮的分泌,并抑制了睾丸组织睾酮合成相关酶P450scc mRNA和3β-HSD mRNA的表达。低氧15 d大鼠血中睾酮浓度升高的机制需进一步研究。

甘草甜素对大鼠血压的影响及其机制

目的探讨甘草甜素通过抑制１１β羟化固醇脱氢酶２型催化活性导致血压升高及其机制。方法对９只及６只Ｗｉｓｔａｒ大鼠给予外源性甘草甜素５周及３个月后观察血压变化，光镜检查心脏及主动脉的滋养动脉的病理改变，观察肠系膜动脉对去甲肾上腺素加压反应，并通过肠系膜血管网的离体灌注，检测灌注液中皮质醇及醛固酮的含量，通过ＲＴＰＣＲ观察甘草甜素处理大鼠主动脉１１β羟化固醇脱氢酶２型及醛固酮合成酶ｍＲＮＡ表达的变化。结果甘草甜素使大鼠血压升高，心脏及主动脉的滋养动脉出现平滑肌细胞增生和肥大，血管壁增厚及玻璃样变性，肠系膜动脉对去甲肾上腺素的加压反应增高，肠系膜血管网灌注液中皮质醇含量增高及醛固酮含量减低，主动脉１１β羟化固醇脱氢酶２型及醛固酮合成酶ｍＲＮＡ的表达受抑。结论提示甘草甜素通过抑制１１β羟化固醇脱氢酶２型及醛固酮合成酶ｍＲＮＡ的表达，导致局部组织皮质醇水平增高、醛固酮降低，增加血管平滑肌对去甲肾上腺素的反应性引起血压升高。