羟胺三氯化铁法测定人血清胆碱酯酶方法的优化

目的:鉴于羟胺三氯化铁法(WS/T66-1996)测定人血清胆碱酯酶(ChEs)时效率较低以及容易产生沉淀等缺陷,本研究旨在对该方法进行优化,以使测定更加高效。方法:首先验证羟胺三氯化铁法测定AChE及BChE的适用性。在此基础上,进一步研究微孔板羟胺三氯化铁法测定BChE的适用性。最后,以改良Ellman法为参考,对优化前后的准确性及可靠性进行验证。结果:羟胺三氯化铁法测定人血清中AChE酶活性的灵敏度较差,但是对人血清中BChE酶活性的测定结果较为理想。羟胺三氯化铁法与改良Ellman法测定BChE酶活性测定结果之间呈正相关关系(r=0.652,P<0.01);微孔板羟胺三氯化铁法与羟胺三氯化铁法测定BChE酶活性测定结果之间也呈正相关关系(r_s=0.653,P<0.01)。与羟胺三氯化铁法方法相比,微孔板羟胺三氯化铁法的准确性及可靠性略佳,主要体现在最低检测浓度及变异系数上。结论:微孔板羟胺三氯化铁法是一种通量较高、经济性较好的测定人血清BCh E酶活性的方法,有一定的推广应用前景。

葡萄糖酸钠的分光光度法测定

利用葡萄糖酸钠在强酸性条件下形成内酯，通过羟胺-三氯化铁显色法生成红棕色异羟肟酸-Fe^3＋络合物，进行分光光度检测。建立标准曲线，其线性方程为y=113.0833x＋0.1162，R2=0.9999，检测波长为500nm，在1×10^-3-9×10^-3mol·L^-1范围内具有良好的线性关系，平均加标回收率为99.79%，并且该方法能够检测Au/γ-Al2O3催化葡萄糖氧化反应液中葡萄糖酸钠的含量。