敲低乙酰辅酶A羧化酶1对食管鳞状细胞癌KYSE450细胞迁移的影响及机制

目的探讨敲低乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)对食管鳞状细胞癌KYSE450细胞迁移能力的影响及机制。方法将对数生长期食管鳞状细胞癌KYSE450细胞随机分为shNC组、shACC1组、shNC+AEB071组及shACC1+AEB071组,shNC组KYSE450细胞转染空白质粒载体,shACC1组KYSE450细胞转染慢病毒质粒载体,shNC+AEB071组KYSE450细胞转染空白质粒载体后加入5μL浓度为2 mmoL·L^(-1)的蛋白激酶C抑制剂AEB071(终浓度为5μmoL·L^(-1)),shACC1+AEB071组KYSE450细胞转染慢病毒质粒载体后加入5μL浓度为2 mmoL·L^(-1)的蛋白激酶C抑制剂AEB071(终浓度为5μmoL·L^(-1))。Transwell法检测各组KYSE450细胞迁移能力;显微镜下观察各组KYSE450细胞形态学变化;Western blot检测4组KYSE450细胞中乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、组蛋白H3(H3)、乙酰化的组蛋白H3第9赖氨酸(H3K9Ac)及上皮-间质转化(EMT)标志物β-连环蛋白(β-catenin)、波形蛋白(Vimentin)以及锌指转录因子(Snail)等的表达。结果shACC1组KYSE450细胞迁移数显著高于shNC组(P<0.05);shNC+AEB071组与shNC组KYSE450细胞迁移数比较差异无统计学意义(P>0.05);shACC1+AEB071组KYSE450细胞迁移数显著低于shACC1组(P<0.05)。shNC组KYSE450细胞呈椭圆形上皮样细胞形态,shACC1组KYSE450细胞呈类似于梭形的间质样细胞形态,shNC+AEB071组和shACC1+AEB071组KYSE450细胞呈椭圆形上皮样细胞形态。shACC1组KYSE450细胞中ACC1相对表达量显著低于shNC组(P<0.05),β-catenin、Vimentin、Snail的相对表达量及H3K9Ac/H3比值显著高于shNC组(P<0.05);shNC+AEB071组与shNC组KYSE450细胞中ACC1、β-catenin、Vimentin、Snail相对表达量及H3K9Ac/H3比值比较差异无统计学意义(P>0.05);shACC1+AEB071组KYSE450细胞中β-catenin、Vimentin、Snail的相对表达量及H3K9Ac/H3比值显著低于shACC1组(P<0.05);shACC1+AEB071组与shACC1组KYSE450细胞中ACC1相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论敲低ACC1可促进食管鳞状细胞癌KYSE450细胞的迁移,从而促进肿瘤的进展,其机制可能是通过蛋白激酶C相关信号通路介导的。

乙酰辅酶A羧化酶1对胶质瘤细胞系U87细胞增殖、迁移和侵袭的影响

目的探讨乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)对人胶质瘤细胞系U87细胞增殖、迁移及侵袭的作用。方法Western blotting检测人胶质瘤细胞系U87、U251及U373中ACC1的表达;构建ACC1过表达质粒载体,将过表达ACC1质粒载体瞬时转染至U87细胞中;Western blotting检测转染后U87细胞中ACC1表达情况;MTT实验检测过表达ACC1对U87细胞增殖的影响;Transwell迁移和侵袭实验分别检测过表达ACC1对U87细胞迁移和侵袭的影响;划痕实验检测过表达ACC1对U87细胞划痕愈合能力的影响;Western blotting检测相关蛋白表达变化。结果与人胶质瘤细胞系U251和U373相比,U87细胞中ACC1表达较低;ACC1过表达抑制U87细胞增殖(P<0.01);ACC1过表达抑制U87细胞迁移、侵袭和划痕愈合能力(P<0.01);ACC1过表达迁移和侵袭相关蛋白波形蛋白(vimentin)、纤维连接蛋白(fibronectin)和尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)表达下调(P<0.01),凋亡抑制蛋白Bcl-2和细胞周期蛋白(cyclin)B、cyclin D表达下调(P<0.01),p-STAT3蛋白表达下调(P<0.01),细胞周期蛋白P21表达上调(P<0.01)。结论过表达ACC1可能通过抑制STAT3活性,抑制人胶质瘤细胞的增殖、迁移和侵袭。

乙酰辅酶A羧化酶1通过调控CyclinD1/CDK4影响肾透明细胞癌细胞增殖

乙酰辅酶A羧化酶1(acetyl-CoA carboxylase1,ACC1)是脂肪酸合成途径的限速酶。ACC1与多种代谢性疾病和癌症密切相关。然而,ACC1在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中的作用及机制却未见报道。本研究以肾透明细胞癌786-O和Caki-1细胞为对象,探讨ACC1异常表达对肾透明细胞癌增殖的影响及其作用机制。首先通过红油-O-染色发现,相比HK2(human kidney-2)细胞,786-O和Caki-1细胞中的脂肪含量明显增加。检索TCGA数据库分析发现,ACC1的蛋白质水平在肾透明细胞癌组织中的表达显著高于正常肾组织(P<0.001)。由分期分级分析发现,临床TNM各期的ACC1蛋白表达均显著高于正常组织。且ACC1表达水平越高,病理分级越高。而ACC1的mRNA水平高表达与肾透明细胞癌病人的不良预后呈正相关。Western印迹结果显示,与对照组HK2细胞相比,在786-O和Caki-1细胞中,ACC1的表达明显增加。通过慢病毒载体构建ACC1敲低的稳转细胞株,由红油-O-染色结果显示,ACC1敲低可显著降低786-O和Caki-1细胞的脂肪含量。CCK-8和平板克隆结果显示,ACC1低表达可显著降低786-O和Caki-1细胞的增殖和克隆形成能力。流式细胞周期结果显示,ACC1敲低可使细胞周期G0/G1期阻滞,并且抑制细胞周期蛋白D1(cyclinD1)和CDK4表达。以上结果表明,ACC1在肾透明细胞癌中异常高表达,并通过上调细胞周期蛋白D1和CDK4表达调控细胞周期进程,促进肿瘤增殖,提示不良预后,ACC1有望成为ccRCC干预治疗的潜在新靶点。

低氧通过上调乙酰辅酶A羧化酶1促进肺腺癌A549细胞迁移

目的探讨低氧通过乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)促进人肺腺癌A549细胞迁移的机制。方法低氧(5%O2)处理肺腺癌A549细胞,应用Transwell迁移实验检测细胞迁移能力,Western blotting检测ACC1表达及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的表达水平。结果与常氧(对照组)相比,低氧处理促进了A549细胞的迁移(P<0.01),低氧处理后ACC1表达上调(P<0.01),同时波形蛋白(vimentin)表达增加(P<0.05),E-钙黏蛋白(Ecadherin)表达下降(P<0.01);敲除ACC1后与对照组相比,A549细胞的迁移能力减弱(P<0.05),vimentin表达下降(P<0.05),E-cadherin表达增加(P<0.01);敲除ACC1后A549细胞在常氧和5%O2条件下迁移数目及vimentin、E-cadherin表达变化无统计学意义(P>0.05);补充亚油酸(LA)恢复低氧对A549细胞的促迁移作用(P<0.05)。结论低氧通过上调ACC1的表达促进肺腺癌A549细胞迁移及EMT转化。

乙酰辅酶A羧化酶1通过代谢调控影响Th17细胞分化参与肥胖型哮喘的发病

代谢是生物体内所发生的用于维持生命的一系列有序的化学反应的总称,这些反应进程使得生物体能够生长和繁殖,保持它们的结构以及对外界环境做出反应。免疫系统是防卫病原体入侵最有效的武器,它能发现并清除异物、外来病原微生物等引起内环境波动的因素。随着对免疫应答过程中细胞内适应性代谢越来越深刻的理解,以及对肥胖型哮喘表型的逐渐认识,脂肪酸代谢途径中的关键酶-乙酰辅酶A羧化酶1对Th17细胞分化的影响成为了近年研究的热点,现就细胞代谢与免疫应答的关系、乙酰辅酶A羧化酶1在Th17细胞分化中作用以及肥胖与哮喘之间的联系进行综述。

敲低乙酰辅酶A羧化酶1通过上调热休克蛋白27促进食管鳞状细胞癌迁移

目的探讨敲低乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)对食管鳞状细胞癌(以下简称食管鳞癌)KYSE-450细胞迁移的影响及分子机制。方法慢病毒转染法建立对照组细胞系sh-NC和敲低ACC1的细胞系sh-ACC1,脂质体法转染人热休克蛋白27(HSP27)siRNA建立对照及敲低HSP27的细胞系si-NC和si-HSP27,选择性乙酰基转移酶p300/CBP抑制剂C646抑制组蛋白乙酰化并设置对照组DMSO。Transwell法检测细胞迁移能力,实时荧光定量聚合酶链反应检测HSP27 mRNA的表达,Western blot检测ACC1、H3K9ac、HSP27和上皮-间充质转化相关蛋白E-cadherin和Vimentin的表达。结果sh-NC组细胞中ACC1的表达水平高于sh-ACC1组(P<0.01)。sh-NC组细胞迁移数[(159.00±24.38)个]低于sh-ACC1组[(361.80±26.81)个,P<0.01],sh-NC组细胞中E-cadherin蛋白表达水平高于sh-ACC1组,Vimentin蛋白表达水平低于sh-ACC1组(均P<0.05)。sh-NC+si-NC组细胞迁移数[(189.20±16.02)个]低于sh-ACC1+si-NC组[(371.60±38.40)个,P<0.01],sh-NC+si-NC组细胞迁移数高于sh-NC+si-HSP27组[(83.80±24.38)个,P<0.01],sh-ACC1+si-NC组迁移细胞数高于sh-ACC1+si-HSP27组[(152.40±24.30)个,P<0.01]。sh-NC+si-NC组细胞中E-cadherin蛋白表达水平低于sh-NC+si-HSP27组,高于sh-ACC1+si-NC组,Vimentin蛋白表达水平高于sh-NC+si-HSP27组,低于sh-ACC1+si-NC组(均P<0.05);sh-ACC1+si-NC组细胞中E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平与sh-ACC1+si-HSP27组比较,差异有统计学意义均(均P<0.01)。C64620μmmo/L处理细胞24 h后,sh-NC+DMSO组细胞迁移数[(190.80±11.95)个]低于sh-ACC1+DMSO组[(395.00±17.10)个,P<0.01],sh-NC+DMSO组细胞迁移数低于sh-NC+C646组[(256.20±23.32)个,P<0.01],sh-ACC1+DMSO组细胞迁移数高于sh-ACC1+C646组[(87.80±11.23)个,P<0.01]。sh-NC+DMSO组细胞中H3K9ac、HSP27、E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平与sh-ACC1+DMSO组和sh-NC+C646组比较,差异均有统计学意义(均P<0.01),sh-ACC1+DMSO组细胞中H3K9ac、HSP27、E-cadherin、Vimentin蛋白表达水平与sh-ACC1+C646组比较,差异有统计学意义均(均P<0.01)。结论敲低ACC1通过增加组蛋白乙酰化上调HSP27促进食管鳞癌KYSE-450细胞迁移。

乙酰辅酶A羧化酶调控肝癌细胞增殖的效应与机制

为了探究巨噬细胞如何促进肝癌细胞的脂滴囤积,并深入研究脂滴的关键代谢酶在肝癌细胞恶性生物学中的作用,利用肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)上清液诱导Hepa1-6脂滴(lipid droplets,LDs)生成,发现TAMs中的白细胞介素10(interleukin-10,IL-10)能够促进脂滴的积累。乙酰辅酶A羧化酶(acetyl-CoA carboxylase alpha,ACC1)是脂肪酸合成的关键酶之一,影响着肝癌的发生发展。本研究发现,ACC1在LDhigh Hepa1-6中高表达,之后通过ACC1的小分子抑制剂、siRNA干扰和CRISPR-cas9敲除等手段阻断ACC1的活性,发现Hepa1-6脂滴积累降低,同时减少了Hepa1-6增殖的恶性生物学行为,促进了Hepa1-6发生凋亡事件。综上所述,TAMs释放的IL-10促进了肝癌细胞的脂滴形成,导致肝癌细胞的恶性增殖与凋亡。ACC1在TAMs促进肝癌细胞脂滴积累过程中发挥关键作用,并且可能受TAMs释放的IL-10的调控,这些发现可为肝癌治疗提供新的靶点。

乙酰辅酶A羧化酶-1和肿瘤相关性研究进展

肿瘤的发生和发展需要磷脂作为基本原料合成生物细胞膜才能进一步完成生长、增殖、侵袭和迁移等过程。因此脂肪酸和脂质的合成对肿瘤细胞的发生和发展起到重要促进作用。乙酰辅酶A羧化酶-1(acetyl-CoA carboxylase-1,ACC1)是脂肪酸合成过程中第1步反应的限速酶,即催化乙酰辅酶A合成丙二酰辅酶A,后者在脂肪酸碳链延长酶体系作用下合成长链脂肪酸,对肿瘤的发生和发展具有重要作用。根据最新研究报道,ACC1在多种肿瘤组织中的表达均高于正常细胞,且和患者生存相关,因此,ACC1可能成为未来肿瘤治疗的新靶点。本文就ACC1和肿瘤相关性及发生机制作一综述。

中、高海拔雄性小鼠肝脏ACC1、CPT1A的变化及其对糖脂代谢的影响

目的探讨中、高海拔雄性小鼠肝脏ACC1、CPT1A的变化及其对糖脂代谢的影响。方法将雄性小鼠随机分为中海拔组(M组)和高海拔组(H组),再根据饲养天数分别分为第3d组、第7d组、第30d组,每组10只。分别在第3 d、第7 d、第30 d脱颈处死小鼠取血清测定胰岛素,并取适量肝脏组织用PCR、WB法测定CPT1A信使核糖核酸及蛋白水平、ACC1信使核糖核酸及蛋白水平。结果1)M组空腹血糖及空腹胰岛素水平在一定时间范围内随着时间延长逐渐升高,但H组空腹血糖及空腹胰岛素水平逐渐降低,且低于同时期的M组水平(P<0.05)。2)M组CPT1A信使核糖核酸水平随时间延长而逐渐降低,但H组随着时间延长无明显变化,且低于同时期的M组水平(P<0.05),第30d M组与第30d H组无差异;ACC1信使核糖核酸在M组随着时间延长逐渐升高、在H组随着时间延长逐渐降低,第3d M组明显低于H组。CPT1A蛋白水平在M组随着时间延长逐渐降低,在H组随着时间延长逐渐降低,且低于同时期的M组(P<0.05);ACC1蛋白水平在M组随着时间延长逐渐升高、在H组随时间延长逐渐降低(P<0.05)。3)CPT1A信使核糖核酸及蛋白水平与空腹胰岛素水平、胰岛素抵抗水平、胰岛素分泌指数水平正相关(P<0.05);ACC1信使核糖核酸水平与空腹胰岛素水平、胰岛素抵抗水平、胰岛素分泌指数水平负相关(P<0.05),ACC1蛋白水平与空腹血糖水平正相关、与胰岛素分泌指数水平负相关(P<0.05)。结论1)中海拔可降低雄性小鼠肝脏ACC1信使核糖核酸及蛋白水平,可升高CPT1A信使核糖核酸及蛋白水平;高海拔可增加雄性小鼠肝脏ACC1信使核糖核酸及蛋白水平、降低CPT1A信使核糖核酸及蛋白水平。2)雄性小鼠在高海拔急性低氧环境下的糖代谢和肝脏脂肪酸合成代谢增加;随低氧时间延长,糖代谢逐渐转换为脂肪酸合成代谢,表现为血糖降低、肝脏脂肪酸降低,分解代谢增强。

运动对RBP4诱导的脂代谢异常鼠肝脏ACC1表达和脂肪合成的影响

目的:研究运动对RBP4诱导的脂代谢异常鼠肝脏ACC1表达和脂肪合成的影响。方法:重组人RBP4注射建立脂代谢异常鼠模型。设一次性运动组(RBP4 One-time exercise group,ROE组)、8周有氧运动组(RBP4aerobic exercise group,RAE组)和安静对照组(RBP4control group,RC组)。结果:ROE组血清RBP4水平与RC组相比显著降低(P<0.05),血清TG和肝脏TG含量无显著改变(P>0.05)。RAE组血清RBP4、TG和肝脏TG含量与RC组和ROE组相比均显著降低(P<0.01)。与RC组相比,ROE组和RAE组肝脏ACC1mRNA表达均显著降低(P<0.01)。与RC组相比,ROE组ACC1蛋白表达无显著改变(P>0.05)。与RC组和ROE组相比,RAE组ACC1蛋白表达均显著降低(P<0.01)。结论:高RBP4显著增加小鼠肝脏ACC1基因和蛋白表达增加,促进肝脏脂肪合成。8周有氧运动抑制了RBP4在肝脏的脂肪合成促进作用,改善脂代谢,机制涉及降低RBP4水平、减少肝脏ACC1基因和蛋白表达以及TG的合成。

雷公山山区放牧山羊ACC1 mRNA的组织分布

为了揭示雷公山山区放牧山羊乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)mRNA表达的组织分布规律,使用Taq Man实时荧光定量技术对黔东南小香羊、贵州白山羊、贵州黑山羊、黔北麻羊和南江黄羊的肝、肾、心、肺、背最长肌、半膜肌以及皮下脂肪组织中ACC1基因的mRNA表达水平进行测定。结果表明,黔东南小香羊、黔北麻羊、南江黄羊ACC1 mRNA均主要在皮下脂肪中表达,其水平分别为3 919.545 6、900.556 8、1 550.559 2;贵州黑山羊ACC1 mRNA主要在肝脏内表达,其水平为2 367.425 8;贵州白山羊ACC1 mRNA主要在肌肉组织和肝脏中表达,其水平分别为背最长肌420.110 9,心351.436 1,半膜肌268.031 1,肝200.414 1。在皮下脂肪和肝脏,贵州白山羊ACC1 mRNA的表达水平都明显低于其他品种。由此可见,雷公山山区放牧山羊ACC1 mRNA主要在皮下脂肪和肝脏中表达。

线粒体靶向小分子IR-61改善小鼠非酒精性脂肪肝

目的探讨线粒体靶向七甲川花菁类荧光小分子IR-61对小鼠非酒精性脂肪肝(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)模型的治疗效果。方法通过喂养高脂饲料建立NAFLD小鼠模型,腹腔注射磷酸缓冲盐溶液(phosphate buffer saline,PBS)或IR-61,治疗18周后,取肝脏组织切片HE常规染色,显微镜下观察,采用酶比色法检测肝脏和血清甘油三酯(triglyceride,TG)含量,Real-time PCR和Western blot法检测固醇调节元件结合蛋白1c(sterol regulatory element binding protein 1c,SREBP-1c)、乙酰辅酶A羧化酶1(acetyl-Co A carboxylase-1,ACC1)、过氧化物酶体增殖物激活受体α(peroxisome proliferator-activated receptor-α,PPARα)和肉毒碱棕榈酰转移酶-1(carnitine palmitoyltransferase-1,CPT1)的mRNA及蛋白表达水平。结果 IR-61可降低高脂诱导的小鼠肝脏TG含量增加,抑制SREBP-1c、ACC1过度表达;同时增加肝脏PPARα、CPT1的表达(P<0.05);IR-61可明显改善小鼠肝脏的脂肪沉积。结论 IR-61通过抑制高脂诱导的脂肪合成代谢过度增强,促进肝脏脂肪酸氧化,减少肝脏甘油三酯沉积,从而改善非酒精性脂肪肝。

石榴皮多酚乳膏对金黄地鼠皮脂腺斑组织中AMPK/ACC-1信号通路的影响

目的通过观察石榴皮多酚乳膏对金黄地鼠皮脂腺斑腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、乙酰辅酶A羧化酶-1(acetyl-COA carboxylase-1,ACC-1)的影响,研究外用石榴皮多酚乳膏治疗痤疮的作用机制。方法将24只雄性金黄地鼠随机分成4组,分别是空白组、基质组、石榴皮多酚乳膏组、阳性对照组,每组6只,分别于双侧皮脂腺斑处涂抹蒸馏水、基质、石榴皮多酚乳膏、0.025%维A酸乳膏,连续给药4周,2次/d。观察各组金黄地鼠皮脂腺斑面积变化,并取材观察组织病理学变化,免疫组化法检测各组AMPK、ACC-1的表达水平。结果与空白组和基质组相比,各治疗组皮脂腺体积变小,数量减少,排列疏松;AMPK水平均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);ACC-1水平明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。与阳性对照组相比,石榴皮多酚乳膏组ACC-1水平降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论石榴皮多酚乳膏治疗痤疮的作用机制可能与激活AMPK/ACC-1信号通路表达,从而改善皮脂稳态失衡有关。

低氧促进肺腺癌A549细胞迁移的机制

目的:探讨低氧促进肺腺癌A549细胞迁移的机制。方法:培养肺腺癌A549细胞,转染慢病毒获得稳定敲低ACC1的A549细胞株,转染si-RNA获得敲低SREBP-1的A549细胞。分别以低氧(5%O_(2))联合低氧诱导因子1α(HIF-1α)抑制剂PX-478(25μmol)处理A549细胞,低氧联合亚油酸(LA)(20μmol)处理敲低ACC1的A549细胞,低氧处理敲低胆固醇调节原件结合蛋白1(SREBP-1)的A549细胞。Transwell实验检测细胞迁移,蛋白质印迹法检测HIF-1α、ACC1及上皮-间质转化(EMT)相关波形蛋白(Vimentin)及E-钙黏蛋白(E-Cadherin)的表达与SREBP-1的表达,实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测低氧联合HIF-1α抑制剂PX-478(25μmol)处理A549细胞后ACC1及SREBP-1 mRNA水平变化。每项实验重复三次。结果:与常氧组相比,低氧组A549细胞迁移数增加,ACC1与HIF-1α表达上调(P均<0.01),SREBP-1表达上调(P<0.05);与低氧对照组相比,PX-478(25μmol)抑制A549细胞迁移,SREBP-1表达下调(P<0.05);低氧处理A549细胞后ACC1 mRNA上升(P<0.05),SREBP-1 mRNA水平上升(P<0.01);低氧并使用PX-478(25μmol)处理A549细胞24 h,ACC1 mRNA水平下降(P<0.05),SREBP-1 mRNA水平下降(P<0.01);转染si-RNA获得敲低SREBP-1的A549细胞,Transwell实验显示si-SREBP-1组细胞迁移数较常氧对照组减少(P<0.01);低氧处理si-SREBP-1组与si-NC组,与对照组相比si-SREBP-1组细胞迁移数减少(P<0.01)但与常氧组相比差异无统计学意义(P>0.05);Western blot检测到si-SREBP-1组ACC1表达较对照组下降(P<0.01);低氧处理si-SREBP-1组,ACC1表达较对照组下降(P<0.01);敲低ACC1抑制A549细胞迁移(P<0.05),敲低ACC1后A549细胞在常氧和5%O 2条件下细胞迁移数目差异无统计学意义(P>0.05);低氧处理敲低ACC1的A549细胞并给予LA(25μmol)促进A549细胞迁移(P<0.05)。结论:低氧通过HIF-1α/SREBP-1/ACC1途径调节脂肪酸代谢进而促进肺腺癌A549细胞迁移。

脂肪酸合成相关酶与乳腺癌的研究进展

乳腺癌是女性最常见的恶性肿瘤,随着肿瘤代谢研究的深入,脂代谢在乳腺癌发生发展中的作用越来越受到重视。内源性脂肪酸合成是肿瘤细胞脂肪酸的主要来源,也是肿瘤细胞的一个重要特征,靶向内源性脂肪酸合成治疗乳腺癌已经成为了一个研究热点。脂肪酸合成途径的相关酶包括ATP-柠檬酸裂解酶(adenosine triphosphate-citrate lyase,ACL)、乙酰辅酶A羧化酶1(acetyl-CoA carboxylase 1,ACC1)、脂肪酸合酶(fatty acid synthase,FASN)和硬脂酰辅酶A去饱和酶1(stearoyl-CoA desaturase-1,SCD1)在乳腺癌发生发展中发挥重要的作用,成为了乳腺癌治疗的新靶点。本文综述了ACL、ACC1、FASN和SCD1与乳腺癌的临床相关性及意义,在乳腺癌发生发展中的作用和分子机制及其抑制剂治疗乳腺癌的研究进展。

SCAP-SREBP-1c-ACC1在内质网应激状态下肝细胞脂肪变性中的作用

目的探讨SCAP-SREBP-1c-ACC1信号通路在内质网应激状态下肝细胞脂肪变性中的作用。方法以人肝细胞L02及人肝肿瘤细胞HepG2为研究对象,利用1μmol/L毒胡萝卜素(Thapsigargin)诱导肝细胞建立内质网应激模型,设未处理细胞作为对照;采用酶比色法检测细胞内甘油三酯含量,Real-time PCR法检测固醇调节元件结合蛋白-1c裂解激活蛋白[sterol regulatory element binding protein-1c(SREBP-1c)cleavage-activating protein,SCAP]基因mRNA水平,Western blot法检测葡萄糖调节蛋白-78(glucose-regulated protein-78,GRP-78)、SCAP、SREBP-1c、乙酰辅酶A羧化酶1(acetyl-CoA carboxylase 1,ACC1)蛋白的表达水平。结果在内质网应激状态下,实验组两种细胞中甘油三酯水平、SCAP基因mRNA水平以及GRP-78、SCAP、SREBP-1c、ACC1蛋白的表达水平较对照组均明显增加(P均<0.01)。结论已成功建立内质网应激脂肪变性细胞模型。SCAP-SREBP-1c-ACC1信号通路可能介导内质网应激状态下肝细胞脂肪变性。

萆薢总皂苷调控AMPK/SREBP-1c/ACC信号通路改善小鼠非酒精性脂肪性肝炎

目的:研究萆薢总皂苷(TSD)改善小鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的作用及机制。方法:将48只C57BL/6J小鼠随机分为正常组和造模组,采用高脂高胆固醇饲料+20%果糖水喂养16周,将造模组小鼠随机分为模型组、阿托伐他汀组(4 mg·kg^(-1)·d^(-1))、TSD高、中、低剂量组(200、60、20 mg·kg^(-1)·d^(-1)),灌胃给药,连续8周。测定小鼠活动度、肝脏系数、肝脏总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、游离脂肪酸(FFA)及血清TC、TG、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、γ-谷氨酰转移酶(GGT)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;苏木素-伊红(HE)染色、Masson染色、油红O染色和透射电子显微镜观察肝组织和肝细胞病理变化、脂质蓄积情况和肝脏超微结构形态学变化;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测肝脏组织AMP活化蛋白激酶(AMPK)、固醇调节元件结合蛋白-1c(SREBP-1c)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)及其磷酸化形式的蛋白表达。结果:与正常组比较,模型组小鼠活动度明显降低(P<0.05,P<0.01),小鼠肝脏TC、TG、FFA和血清TC、TG、ALT、AST、GGT、IL-1β、TNF-α水平、肝脏系数、肝脏病理评分均明显升高,肝脏组织p-AMPK/AMPK、p-ACC蛋白表达明显降低,SREBP-1c、ACC蛋白表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。与模型组比较,阿托伐他汀组小鼠活动度明显增加(P<0.05),TSD各剂量组小鼠活动度无明显改变;TSD及阿托伐他汀组小鼠肝脏TC、TG、FFA和血清TC、TG、ALT、AST、GGT、IL-1β、TNF-α水平、肝脏系数、肝脏病理评分均明显降低,肝脏组织p-AMPK/AMPK、p-ACC蛋白表达明显升高,SREBP-1c、ACC蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:TSD可能通过调控AMPK/SREBP-1c/ACC信号通路减少脂质合成,从而改善小鼠NASH。

生物素对2型糖尿病大鼠血糖的影响

目的探讨生物素对2型糖尿病大鼠血糖以及糖代谢关键限速酶葡萄糖激酶(GCK)和磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶1(PCK1)基因表达的影响。方法 90只健康Wistar大鼠根据血糖随机分为5组(正常对照组,模型组,生物素低、中、高剂量组)。正常对照组给予普通维持饲料,蒸馏水灌胃;模型组给予高脂高糖饲料,蒸馏水灌胃;生物素各剂量组给予高脂高糖饲料同时分别给予生物素0.6、3.0和6.0 mg/kg BW灌胃。在高脂高糖饲料喂养2月后,应用小剂量链脲佐菌素腹腔注射的方法建立2型糖尿病大鼠模型。于造模第10周进行OGTT实验后,处死大鼠。检测血糖、血清胰岛素、肝糖原、肌糖原等指标,用RT-PCR方法检测糖代谢关键限速酶GCK、PCK1基因的表达。结果与模型组相比,生物素各剂量组对空腹血糖、血清胰岛素没有影响,但生物素高剂量组血糖曲线下面积明显下降(P<0.05),餐后30 min血糖值也显著降低(P<0.05)。生物素中剂量组和高剂量组肌糖原含量明显下降(P<0.05)。生物素对糖代谢关键限速酶GCK、PCK1的表达有影响,分别出现了明显的基因表达上调和下调(P<0.05)。结论生物素可能通过影响糖代谢关键酶GCK和PCK1的活性,促进糖酵解和糖原合成而抑制糖异生,从而影响餐后血糖应答。

短指软珊瑚Sinularia sp.的多骨架类型萜类成分和生物活性研究

目的对采自中国南海的短指软珊瑚Sinularia sp.萜类化学成分和生物活性进行研究。方法综合利用薄层色谱、硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、半制备HPLC等分离手段进行纯化,结合NMR和MS等波谱数据分析及比对文献数据,开展化合物的结构鉴定。结果从短指软珊瑚Sinularia sp.中共分离鉴定了15个化合物,包括5个倍半萜:1β-hydroxy-4(15),5E,10(14)-germacratriene(1)、(7R^(*))-opposit-4(15)-ene-1β,7-diol(2)、15-hydroxy-α-cadinol(3)、nephalbidol(4)和isodauc-6-ene-10β,14-diol(5);1个单萜:pubinernoid A(6);8个降二萜:norcembrene 5(7)、norcembrenolide 2(8)、sinularcasbane O(9)、scabrolide D(10)、5-epi-sinuleptolide(11)、sinuleptolide(12)、ineleganolide(13)和yonarolide(14);1个二萜:dihydrosinularin(15)。结论化合物3和6为首次从软珊瑚科软珊瑚中分离得到,1、2和5为首次从短指属软珊瑚中分离得到。倍半萜1~5分别隶属于大根香叶烷、oppositane、杜松烷、愈创木烷和异胡萝卜烷共5种不同骨架类型,单萜6隶属于罕见的反Bredt规则的双环桥烯型骨架,降二萜7~14分别隶属于降西松烷、inelegane和yonarane共3种不同骨架类型,二萜15隶属于西松烷骨架。活性测试时,化合物1~6对人肺腺癌A549、人结肠癌HT-29、人肝癌SNU-398、人胰腺癌Capan-1细胞株均未表现明显的细胞毒活性,化合物7~15对乙酰辅酶A羧化酶1与ATP-柠檬酸裂解酶均未有明显的酶抑制活性。

红芪多糖对ob/ob小鼠肝脂质合成影响

目的研究红芪多糖(HPS)对ob/ob小鼠肝组织固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)和肝脂质从头合成相关蛋白的影响。方法按照体重将ob/ob雄性小鼠随机分为5组:模型组、阳性药对照组和高、中、低3个剂量实验组,每组10只;将同品系正常C57BL/6野生型雄性小鼠10只作为正常组。阳性药对照组灌胃硫辛酸30 mg·kg^-1·d^-1,高、中、低3个剂量实验组灌胃HPS 200,100,50 mg·kg^-1·d^-1,均连续灌胃8周。以酶联免疫吸附法检测各组小鼠血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)含量。用逆转录-PCR法和蛋白质印迹法分别检测肝组织中SREBP-1、乙酰辅酶A羧化酶1(ACC1)、脂肪酸合成酶(FAS)和硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)基因量(2-△△Ct值)和蛋白的表达。结果正常组、模型组、阳性药对照组和高、中、低3个剂量实验组的TC含量分别为(1.69±0.16),(3.97±0.34),(1.77±0.25),(1.86±0.63),(2.20±0.75)和(3.58±0.25)μmol·L^-1;此6组的TG含量分别为(0.65±0.03),(1.32±0.04),(0.84±0.04),(0.86±0.04),(0.97±0.05)和(1.20±0.03)μmol·L^-1;此6组的LDL含量分别为(0.55±0.13),(1.68±0.21),(0.72±0.28),(0.98±0.15),(1.25±0.23)和(1.47±0.34)μmol·L^-1;此6组的HDL含量分别为(2.05±0.02),(1.15±0.04),(2.00±0.04),(1.98±0.02),(1.63±0.04)和(1.37±0.06)μmol·L^-1;此6组SREBP-1c基因表达量分别为1.00±0.00,1.39±0.02,1.07±0.15,1.03±0.05,1.14±0.04和1.25±0.08;此6组的FAS基因表达量分别为1.00±0.00,1.45±0.10,1.04±0.11,1.07±0.05,1.18±0.05和1.27±0.06;此6组的ACC1基因表达量分别为1.00±0.00,1.27±0.05,1.02±0.12,1.03±0.06,1.11±0.03和1.21±0.04;此6组SCD基因表达量分别为1.00±0.00,1.22±0.08,1.00±0.07,1.01±0.11,1.14±0.04和1.19±0.03。上述指标:模型组与正常组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05);阳性药对照组和高、中2个剂量实验组与模型组相比,差异均有统计学意义(均P<0.05)。蛋白表达结果的趋势与基因表达基本一致。结论HPS可能通过调控SREBP-1及其下游肝脂质从头合成关键酶来改善ob/ob小鼠肝脂肪变性。