阿霉素羧甲基化葡聚糖微球肝动脉化疗性栓塞治疗肝癌的实验研究与临床初步应用

本实验对国内首次合成的阿霉素羧甲基化葡聚糖微球（ＡＤＭ─ＣＭ─ＤＭＳ）进行系统的体外特性分析、人体内药代动力学特征、犬肝动脉栓塞效果的实验研究及临床初步应用。结果表明：ＡＤＭ─ＣＭ─ＤＭＳ具有使用方便、性能稳定、不聚块、不碎裂的特点；能缓慢释放ＡＤＭ而持续有效的提高靶区药物浓度，延长局部作用时间，减少全身毒副作用；追踪观察１６周犬被栓塞之肝动脉未见再通及侧枝循环形成，其栓塞作用是显著而持久的；临床初步应用治疗五例肝癌患者未发现副作用，短期追踪疗效显著。

β-葡聚糖的性质及其在化妆品中的应用

本文叙述了羧甲基化葡聚糖的化学结构、性质和作用，以及其被修饰改良后性能的提高。

一种葡聚糖芯片的再生方法、表征及其应用

表面等离子体共振(surface plasmon resonance,SPR)生物传感器,作为一种适时快捷,无需标记的生物分子相互作用研究工具,已广泛应用于生物化学分析与研究。羧甲基化葡聚糖修饰的CM5传感芯片是Biacore系列仪器应用最为普遍的核心部件,目前CM5芯片主要从法玛西亚公司购买,价格昂贵,且一旦共价交联的受体分子失活,就不能重复利用。阐述了一种简便、低成本、用于SPR生物传感器的葡聚糖修饰金膜芯片的再生方法及其表征和应用。用此方法再生的芯片能被循环伏安法和原子力显微镜很好地表征,并成功地用于抗前列腺特异性抗原(prostate-specific antigen,PSA)固定和PSA检测,同时测定了PSA与其抗体之间的动力学和亲和常数。

基于魔芋葡甘聚糖阳离子聚合物的合成及表征

首先以魔芋葡甘聚糖为原料,制备羧甲基化魔芋葡甘聚糖(CKGM),然后在水介质中,以过硫酸钾为引发剂,引发羧甲基魔芋葡甘聚糖(CKGM)与甲基丙烯酰氧乙基三甲基氯化铵(DMC)接枝共聚,制备系列含阳离子季铵盐基团的CKGM-gPDMC接枝共聚物,系统考察了反应条件对接枝共聚物接枝率(GR)和取代度(DS)的影响,与此同时,用FTIR对接枝共聚物结构进行了表征。

乳酸乳球菌的单菌包埋技术及在胃肠道环境中的性能评价

由于益生菌对消化系统的强酸和高浓度胆汁盐环境较为敏感,并且在肠道中定殖能力较低,因此开发新颖有效的益生菌包埋体系用于解决上述问题很有必要。本研究使用羧甲基化β-葡聚糖(m GN),通过金属-酚醛网络结构(Fe-TA)的桥联作用,将其黏附在乳酸乳球菌(LL)表面,构建乳酸乳球菌的包埋体系LL@Fe-TA@mGN,并评价LL@Fe-TA@mGN对胃液与胆盐的抗性及其在体内的滞留能力。结果表明:当mGN的质量浓度为0.12 mg/mL时,LL@Fe-TA@mGN体系的粒径和zeta-电位都达到峰值,表明该质量浓度为mGN包埋单个乳酸乳球菌的最佳质量浓度。在MRS液体培养基中,LL@FeTA@mGN的生长曲线与LL的生长曲线没有显著性差异,说明mGN的毒性可以忽略不计。在扫描电镜与透射电镜分析中均可清晰地看到一层“膜”完整地包覆在乳酸乳球菌表面。经2 h模拟胃液与胆盐的孵育,mGN包埋后的LL抗胃液能力与抗胆盐能力相比于未包埋的LL分别提升14.63倍与1.94倍。体内荧光成像实验证实LL@Fe-TA@mGN具有更强的肠道滞留能力。综上,本研究开发的乳酸乳球菌单菌包埋技术能够显著提升乳酸乳球菌的胃肠道抗性与体内滞留能力。研究结果可为益生菌包埋系统的开发与利用提供新的思路和策略。

两种磁性纳米颗粒介导人sFIt-1基因片段转染的比较

目的：比较羧甲基化葡聚糖（carboxymethylated dextran，CMD）与聚乙烯亚胺（polyethyleneimine，PEI）纳米磁颗粒作为基因载体对可溶性血管内皮生长因子受体-1（soluble fms-like tyrosine kinase-1，sFIt-1）胞外第2—3区sFIt-1（2-3）基因片段转染的差异。方法：通过磁颗粒载体将构建的真核表达质粒pcDNA3.1／sFIt-1（2—3）的基因片段转染入人脐静脉血管内皮细胞（HUVEC）中，检测各组的转染效率和对细胞增殖能力及凋亡的影响。实验分为CMD磁颗粒（CMD—MAG）组、PEI磁颗粒（PEI—MAG）组、单纯PEI组和未转染对照组，用第3～5代处于对数生长期的HUVEC为转染对象。在相同外界磁场条件下分别以N／P（聚合物中的氨基基团与DNA中磷酸基团的摩尔比）为10，15，20，25，30的PEI／DNA／CMD—MAG复合物、PEI／DNA／PEI—MAG复合物转染HUVEC，并以不加磁场下单纯PEI／DNA复合物转染的和未经转染的HUVEC作为对照。24h后倒置相差荧光显微镜、流式细胞仪检测以上述不同方法转染了增强型绿色荧光蛋白质粒（pcDNA3．1－EGFP）的细胞绿色荧光表达百分率以反映目的基因片段sFIt－1（2—3）的转染率；RT—PCR法和Western blot法检测转染pcDNA3．1／sFIt－1（2—3）后sFIt－1（2-3）mRNA和蛋白的表达。通过MTT法观测各组细胞的生长情况，计算各组细胞的相对增殖百分率；通过Ho—echst染色法观察各组细胞的凋亡百分率，以此对比不同磁颗粒载体转染后对细朐的影响。结果：在N／P为20时，各组GFP的转染率最高，且CMD磁颗粒组各N／P时转染率均高于其他组；转染pcDNA3．1／sFIt-1（2-3）后24h，CMD—MAG组sFIt-1（2-3）的mRNA和蛋白的表达均明显高于其他组；CMD磁颗粒转染组细胞增殖能力与对照组无明显差异，而PEI磁颗粒组、PEI组转染组细胞增殖能力均明显降低；CMD磁颗粒转染组约有5％细胞发生凋亡，PEI磁颗粒组凋亡细胞百分数约为20％～30％，PEI组约为50％。结论：CMD纳米磁颗粒可作为载体实现目的基因片段的高效率转染；在转染率和细胞毒性等方面CMD纳米磁颗粒均优于PEI纳米磁颗粒，可作为sFIt—1基因片段转染和眼底新生血管性疾病基因治疗的载体。