羧甲基壳聚糖-油酸聚合物的载药性能及抗肿瘤活性研究

以自制的羧甲基壳聚糖-油酸聚合物(CMCS-OA)为载体,采用透析法对盐酸阿霉素(DOX)进行包载,载药聚合物(DOX-CMCS-OA)的载药量和包封率分别达到30.28%和65.83%。体外释药实验表明,DOX-CMCS-OA在pH值为5.0和7.4下1660 min时累积释药率分别为262.29%和232.64%,偏酸性环境下释药效果更好,具有一定的pH值敏感性。细胞毒性实验表明,DOX-CMCS-OA对SGC-7901胃癌细胞和SK-MES-1肺癌细胞均具有较好的抑制作用且比DOX的毒性更低。细胞摄取实验表明,DOX-CMCS-OA具有较好的药物控释性能。CMCS-OA对DOX的包载能力较好,具有一定的缓释、长效的抗肿瘤作用。

载紫杉醇的羧甲基壳聚糖-大黄酸聚合物胶束制备工艺

目的优化载紫杉醇(PTX)的羧甲基壳聚糖-大黄酸聚合物胶束制备工艺。方法以载药量、包封率、粒径为考察指标,对载药和透析方法进行单因素考察,确定PTX/CR聚合物胶束的最佳制备工艺。结果最佳载药方法为透析法,最佳载药工艺以乙醇(30 mg/m L)作为PTX溶剂,载体CR浓度为7 mg/m L,药载比1∶1.4。结论 CR聚合物通过物理包载PTX形成载药量和包封率较好、粒径小的载药聚合物胶束。

载紫杉醇的大黄酸偶联物胶束对MCF-7细胞的毒性与细胞摄取研究

通过MTT法评估了羧甲基壳聚糖-大黄酸偶联物(CR偶联物)和载紫杉醇(PTX)的CR偶联物胶束(PTX/CR偶联物胶束)对MCF-7细胞的细胞毒性,结果显示,CR偶联物具有良好的安全性;PTX/CR偶联物胶束24 h内表现出优于Taxol?的抗肿瘤活性。通过包载环境响应型荧光探针P4,考察了共载P4和PTX的CR偶联物胶束[(P4+PTX)/CR偶联物胶束]在MCF-7细胞中的摄取情况,结果显示,MCF-7细胞对其具有较好的摄取效果,(P4+PTX)/CR偶联物胶束组与其加维拉帕米组摄取量无显著性差异,提示CR偶联物胶束可以保护其所载荧光探针和/或药物不被P-gp外排到细胞外。该研究结果为CR偶联物及PTX/CR偶联物胶束的进一步体内研究奠定了基础。

载紫杉醇的大黄酸偶联物纳米胶束的制备及初步评价

目的制备载紫杉醇的D-α-生育酚聚乙二醇1000琥珀酸酯(D-α-tocopheryl polyethylene glycol 1000 succinate,TPGS)修饰的羧甲基壳聚糖-大黄酸偶联物(PTX/TPGS-CR)纳米胶束,并对其进行初步评价。方法采用透析法,以载药量、包封率及粒径为指标,通过单因素考察优化PTX/TPGS-CR纳米胶束的制备工艺并进行验证。以溶血实验及血管刺激性实验初步考察PTX/TPGS-CR纳米胶束的安全性。四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)法考察PTX/TPGS-CR纳米胶束对Hela细胞的毒性。通过激光扫描共聚焦显微镜定性和流式细胞仪定量考察Hela细胞对PTX/TPGS-CR纳米胶束的摄取情况。结果制备工艺优化后制得的PTX/TPGS-CR纳米胶束粒径为(197.3±4.4)nm,PDI为(0.131±0.021),电位为(-31.8±0.5)mV,载药量为(48.20±3.03)%,包封率为(87.26±4.91)%。溶血实验结果表明,其溶血率低于1.71%;血管静脉注射无明显刺激性。其对Hela细胞的杀伤作用具有浓度和时间依赖性,能被Hela细胞高效摄取。结论PTX/TPGS-CR纳米胶束载药量和包封率高,安全性好,其体外抗肿瘤活性稍优于Taxol?。

载阿霉素的大黄酸偶联物胶束的制备及其细胞毒性评价

目的制备载阿霉素(doxorubicin, DOX)的TPGS修饰的羧甲基壳聚糖-大黄酸(TPGS-CR)偶联物胶束(DOX/TPGS-CR胶束),考察其体外对人乳腺癌MCF-7细胞的毒性。方法以TPGS-CR偶联物为载体材料,利用透析法制备DOX/TPGS-CR胶束,使用动态激光粒径测定仪测定其粒径,紫外分光光度法测定载药量和包封率;在pH 7.4的PBS中进行了体外释放研究,计算了DOX的累计释放率,绘制了累计释放曲线;MTT法检测其对人乳腺癌MCF-7细胞毒作用,计算细胞的存活率。结果 DOX/TPGS-CR胶束的平均粒径为(151.3±1.8)nm,PDI为0.129±0.020,电位为(–26.9±0.8)mV,载药量为(23.16±0.01)%,包封率为(55.00±0.04)%。DOX/TPGS-CR胶束在pH 7.4的PBS中,24 h时累计释放DOX仅有(35.73±2.21)%,而游离DOX·HCl在6h时累计释放达到了(90.25±6.20)%;DOX/TPGS-CR胶束浓度在5~20μg·mL–1内,尤其在48h时,对MCF-7细胞杀伤能力强于DOX·HCl。结论 DOX/TPGS-CR胶束载药量良好,粒径小,分布均匀,具有缓释特征;载体材料TPGS-CR偶联物毒性小,安全性高,DOX/TPGS-CR胶束对MCF-7细胞有较强的杀伤作用。

载紫杉醇的PEG修饰的大黄酸偶联物胶束的细胞摄取及活体成像研究

目的探究载紫杉醇(paclitaxel,PTX)的聚乙二醇(polyethylene glycol,PEG)修饰的大黄酸偶联物胶束的细胞摄取及活体成像情况。方法将环境响应型荧光探针P4/P2与药物PTX共载于mPEG-羧甲基壳聚糖-大黄酸(CRmP)偶联物胶束中,制备(P4+PTX)/CRmP胶束。以MCF-7细胞为细胞模型,利用激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分析该胶束被MCF-7细胞摄取的情况;以H22皮下移植瘤小鼠为模型,在体和离体成像分析该胶束在体内的分布情况。结果(P4+PTX)/CRmP胶束以完整的胶束形式被MCF-7细胞内吞摄入,分布于细胞质。(P2+PTX)/CRmP胶束在荷瘤小鼠的肝脏和肿瘤部位较多聚集,并于实验时间内在肿瘤部位不断累积。结论该胶束以完整的胶束形式被肿瘤细胞摄取,在体内有一定的肝靶向性和肿瘤靶向性。