不同强度运动干预2型糖尿病大鼠骨骼肌羧酸酯酶1及炎症因子的变化

背景:羧酸酯酶1及炎症因子在调节脂质代谢以及葡萄糖稳态方面起着至关重要的作用,然而有关不同强度运动干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌羧酸酯酶1及炎症因子的影响尚待揭示。目的:探究不同强度运动干预对2型糖尿病大鼠骨骼肌羧酸酯酶1及炎症因子的影响。方法:取32只8周龄雄性SD大鼠,适应性喂养1周后随机分为正常对照组(n=12)和造模组(n=20),造模组大鼠利用高脂膳食和一次性注射链脲佐菌素制备2型糖尿病模型,建模成功后随机分为糖尿病对照组(n=6)、中等强度运动组(n=6)和高强度间歇运动组(n=6),后2组适应性跑台运动5 d后分别进行对应强度的跑台运动,每天1次,每次50 min,每周训练5 d。连续运动6周后,检测大鼠血糖与血脂相关指标,苏木精-伊红染色观察骨骼肌组织形态学变化,qRT-PCR检测骨骼肌羧酸酯酶1与炎症因子的mRNA表达,Western-blotting及免疫荧光染色检测骨骼肌中羧酸酯酶1与炎症因子的蛋白表达。结果与结论:①与正常对照组相比,糖尿病对照组大鼠空腹血糖、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素抵抗指数均升高(P<0.05),胰岛素活性降低(P<0.05),骨骼肌中的羧酸酯酶1、NEK7、白细胞介素18的mRNA与蛋白表达均升高(P<0.05)。②与糖尿病对照组相比,中等强度运动组和高强度间歇运动组大鼠空腹血糖、三酰甘油、低密度脂蛋白胆固醇、胰岛素抵抗指数均降低(P<0.05),胰岛素活性升高(P<0.05);中等强度运动组大鼠骨骼肌中的NEK7 mRNA表达降低(P<0.01),羧酸酯酶1、NEK7、白细胞介素18蛋白表达降低(P<0.05);高强度间歇运动组大鼠骨骼肌中的羧酸酯酶1、NEK7、NLRP3、白细胞介素18 mRNA表达降低(P<0.05),羧酸酯酶1、白细胞介素18蛋白表达降低(P<0.05)。③苏木精-伊红染色显示,相较于糖尿病对照组,中等强度运动组大鼠肌纤维间隙变小,内部空洞减少,细胞结构趋于完整;高强度间歇运动组大鼠肌细胞排列松散,组织形态不规则,肌纤维内部空洞较多。④结果表明,中等强度运动和高强度间歇运动均可降低2型糖尿病大鼠的血糖、血脂、胰岛素抵抗与骨骼肌羧酸酯酶1水平,中等强度运动可明显降低骨骼肌NEK7表达,高强度间歇运动可降低骨骼肌白细胞介素18表达,并且羧酸酯酶1与NEK7、白细胞介素18关系密切。

高浓度CO2气调对药材甲羧酸酯酶活性的影响

用高浓度CO2气体胁迫处理药材甲Stegobium paniceum(L.)成虫及离体羧酸酯酶,通过终点法测定酶活性及其动力学参数变化,分析气调胁迫对羧酸酯酶性质的影响.结果显示,处理6,9,12 h,羧酸酯酶比活力分别为0.412 mmol/(mg.min)、0.439 mmol/(mg.min)、0.418 mmol/(mg.min),与对照0.358 mmol/(mg.min)相比,分别升高了14.96%,22.58%,16.69%,差异均达到显著水平.处理时间延长至15 h,比活力降低了2.73%.羧酸酯酶酶液经持续通入高浓度CO2于37℃水液中离体处理10 min,比活力显著降低.离体处理亦导致羧酸酯酶动力学参数发生相应变化.

8种五味子木脂素类化合物对羧酸酯酶2的抑制作用

目的考察8种五味子木脂素类化合物体外对羧酸酯酶2(CES2)活性的抑制作用,并对CES2强抑制剂进行草药-药物相互作用(HDI)风险预估。方法采用荧光素二乙酸酯(FD)作为CES2的特异性荧光探针底物,加入人肝微粒体(HLM),将8种五味子来源的化合物单体五味子甲素、五味子酚、五味子酯戊、五味子醇甲、五味子醇乙、戈米辛J、戈米辛G和戈米辛O,分别与FD在37℃条件下共同孵育10 min,以DMSO作为对照,荧光酶标仪测定孵育液中FD代谢产物荧光素的生成量,计算残余活性及半数抑制浓度(IC_(50)),进一步进行体内的HDI风险预估。结果五味子甲素和五味子酚在100μmol·L^(-1)浓度下可使CES2残余活性分别降至DMSO对照组的14.5%和15.3%(P<0.01),其IC_(50)为8.06和8.91μmol·L^(-1),其余6种木脂素对CES2抑制作用较弱;HDI风险预测结果表明,五味子甲素或五味子酚与CES2底物共用时,引起药物暴露水平分别增加11.24倍和0.40倍。结论五味子甲素和五味子酚对CES2具有强抑制作用,联合使用五味子相关中药制剂时,需要警惕HDI风险的发生,防止出现血药浓度大幅增加而诱发药物不良反应。

人结肠癌Caco-2细胞羧酸酯酶的表达及代谢活性

目的:评价Caco-2细胞对酯类药物的水解活性及羧酸酯酶(CES)表达的影响.方法:采用人类CES1(hCE-1)和CES2(hCE-2)特异性底物咪达普利和伊立替康(CPT-11)与Caco-2细胞S9组分共同孵育,HPLC法测定原药及代谢产物浓度,评价Caco-2细胞的药物水解活性,并通过RT-PCR法测定细胞内hCE-1和hCE-2表达.结果:Caco-2细胞与正常小肠微粒体酶相比,更倾向于代谢咪达普利,而几乎不水解CPT-11.RT-PCR结果发现,Caco-2细胞CES表达与正常肠道上皮组织不同,表现为hCE-1高表达,而几乎不表达hCE-2.结论:Caco-2细胞CES表达与正常肠道上皮组织存在较大差异,因此在使用Caco-2细胞评价酯类药物口服吸收时应十分谨慎.

羧酸酯酶-2和拓扑异构酶1的表达对伊立替康联合铂类治疗小细胞肺癌的预测意义初探

目的:探讨小细胞肺癌组织中羧酸酯酶-2(CES-2)和拓扑异构酶1(topo1)的表达对伊立替康(CPT-11)联合铂类化疗预后的临床意义。方法:分别应用免疫组化方法和酶联免疫吸附方法检测接受CPT-11联合铂类治疗的48例小细胞肺癌患者组织CES-2表达和topo1活性,并与患者化疗的临床预后如无疾病进展期(PFS)和总生存期(OS)进行比较。结果:48例小细胞肺癌标本中,CES-2阳性比为72.9%,topo1活性为(22 459±5 422)U·mg-1protein,CES-2表达及topo1活性在不同分期小细胞肺癌患者中差异均无统计学意义(P>0.05)。不同分期小细胞肺癌患者CES-2是否表达与其中位PFS及OS差异亦均无统计学意义(P>0.05)。31例局限期小细胞肺癌患者中,CES-2表达阳性的中位PFS及OS分别是12.3,18个月;CES-2表达阴性的中位PFS及OS分别是10.9,17.6个月。17例广泛期小细胞肺癌患者中,CES-2表达阳性的中位PFS及OS分别是10.5,14.1个月;CES-2表达阴性的中位PFS及OS分别是10.2,13.8个月。结论:CES-2表达和topo1活性尚不足以预测CPT-11联合铂类治疗小细胞肺癌的预后,有待扩大样本量进一步从疗效、毒性及预后方面同时考察。

羧酸酯酶A2在大肠杆菌中的表达及特征分析

本研究采用RT-PCR法从抗性蚊虫(Culex quinquefasciatus)中克隆了羧酸酯酶A2的全长cDNA,对其进行了序列测定,并构建了融合表达质粒pET-ESTA2。转化大肠杆菌BL21后,在异丙基硫代牛乳糖苷(IPTG)的诱导下,使羧酸酯酶A2在大肠杆菌内得到表达。表达产物经亲和层析纯化获得了1条带的重组蛋白。与报道的从蚊虫体内纯化的羧酸酯酶相比,从表达产物中纯化的羧酸酯酶Km与其一致,但从表达产物纯化的羧酸酯酶的Vm比蚊虫中纯化的羧酸酯酶的Vm高。表明用亲和层析纯化的羧酸酯酶A2比从蚊虫中提取的纯度高。羧酸酯酶A2表达纯化及特征分析为其应用奠定了基础。

脂多糖促进H_2O_2降低羧酸酯酶1/2活性抑制肝癌HepG2细胞存活

目的阐明LPS对肝癌HepG2细胞增殖和凋亡的作用及其潜在机理。研究脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)对人肝癌HepG2细胞中羧酸酯酶1(Human carboxylesterase 1,CES1)、羧酸酯酶2(Human carboxylesterase 2,CES2)活性和表达的影响。方法 MTT检测不同剂量LPS(0mg/L,1.0mg/L,3.0mg/L,5.0mg/L,10.0mg/L)与H_2O_2(0.5mm)分别处理或共孵育12h,24h,48h对细胞增殖的影响。采用Tunel技术检测LPS对细胞凋亡的影响。酶学测定LPS对HepG2细胞中HCEs酶活性的影响。采用Real-time PCR和Western blot检测HepG2细胞中CES1、CES2在mRNA水平和蛋白水平变化。结果 LPS和H_2O_2(0.5mm)单独处理对HepG2细胞增殖和凋亡无显著影响。LPS与H_2O_2(0.5mm)共孵育剂量依赖性的降低HepG2细胞增殖,促进HepG2细胞凋亡,降低HCEs酶活性。此外,LPS和H_2O_2(0.5mm)共孵育可明显降低肝癌HepG2细胞中CES1和CES2的mRNA和蛋白水平的表达,降低趋势呈现剂量-效应关系。结论我们发现LPS和H_2O_2(0.5mm)共孵育能够显著降低细胞增殖,促进细胞凋亡。此机制可能与LPS明显降低肝癌HepG2细胞中CES1和CES2的表达和活性有关。提示肝肿瘤细胞在炎症状态下,羧酸酯酶对药物代谢的能力下降。本研究为临床肝癌治疗提供新的理论依据和治疗靶点。

紫草素体外对细胞色素P4501A2和羧酸酯酶2介导氟他胺代谢的抑制作用

目的考察紫草素体外对氟他胺(Flu)经细胞色素P4501A2(CYP1A2)酶的羟化反应及羧酸酯酶2(CES2)介导的水解反应的抑制作用,并对其体内抑制强度进行定量预测。方法在确定Flu水解反应动力学的前提下,分别以Flu和7-乙氧基试卤灵为CES2和CYP1A2的底物,采用人肝微粒体(HLM)的体外孵育体系,通过高效液相色谱仪及荧光酶标仪测定产物的生成量,计算残余活性、半数抑制浓度(IC_(50))及抑制动力学常数(K_i),同时对抑制类型进行分析,并进一步进行体内抑制强度的定量预测。结果紫草素对CES2活性具有较强抑制作用,IC_(50)和K_i值分别为7.01μmol·L^(-1)和7.88μmol·L^(-1),抑制类型为非竞争型抑制;而对CYP1A2无显著抑制作用(IC_(50)>100μmol·L^(-1))。体内抑制效应的预测结果表明,紫草素与Flu联用时,可能引起Flu在体内暴露水平的增加,增幅可达6%～43%。结论紫草素对Flu产生潜在肝毒性产物的水解代谢通路存在较强抑制作用,而对生成药效活性产物的羟化代谢通路影响较小。

基于过表达羧酸酯酶的人骨髓间充质干细胞联合LY2334737对膀胱癌的抑制作用研究

目的:探讨过表达羧酸酯酶(carboxylesterases,CES)的人骨髓间充质干细胞(human bone mesenchymal stromal cells,hBMSCs)联合LY2334737对裸鼠膀胱癌治疗的影响。方法:将腺病毒介导过表达的人CES2转染hBMSCs,分为空白组(不作任何处理)、空载体组(转染空载体)和转染组(转染过表达CES2腺病毒),流式细胞仪检测转染效率,荧光显微镜观察CES2的表达,Western blot及RT-PCR方法检测转染hBMSCs的效果。hBMSCs转染48 h后,用LY2334737(1μmol/L)处理72 h。将处理的细胞分为空白组(hBMSCs)、对照组(Ad-hBMSCs+LY2334737)、试验组(CES2-hBMSCs+LY2334737),采用CCK-8法及流式细胞仪检测hBMSCs的细胞增殖、凋亡情况。采用Transwell小室将人膀胱癌细胞TCCSUP与hBMSCs共培养,将其分为5组:空白组、空载体组、转染组、Ad-hBMSCs+LY2334737组、CES2-hBMSCs+LY2334737组,CCK-8法及流式细胞仪检测TCCSUP细胞的增殖、凋亡情况。将60只雌性裸鼠随机分为6组:空白组(仅注射TCCSUP细胞)、对照组(注射TCCSUP细胞和Ad-hBMSCs)、试验组(注射TCCSUP细胞和CES2-hBMSCs)、LY2334737组(注射TCCSUP细胞+口服LY2334737)、Ad-hBMSCs+LY2334737组(注射TCCSUP细胞和Ad-hBMSCs+口服LY2334737)、CES2-hBMSCs+LY2334737组(注射TCCSUP细胞和CES2-hBMSCs+口服LY2334737),裸鼠麻醉后,于背中线皮下注射TCCSUP细胞。分别在注射TCCSUP细胞1周及2周后,在肿瘤周围注射Ad-hBMSCs或CES2-hBMSCs。在第一次注射BMSCs 1 h后,LY2334737口服给药14天,每天1次。LY2334737末次治疗结束1天后处死动物称瘤重量,测量瘤体积,对肿瘤组织进行HE染色。结果:流式细胞术检测过表达CES2腺病毒转染组的转染率为99.56%;RT-PCR结果表明,与空白组和空载体组相比,转染组CES2的mRNA表达量增加,差异具有统计学意义(t=27.642,P<0.0001;t=30.300,P<0.0001);Western blot结果发现,与空白组和空载体组相比,过表达CES2转染组的CES2蛋白量表达升高(t=9.678,P=0.0006;t=9.516,P=0.0007),说明腺病毒过表达CES2能成功转染hBMSCs。通过CCK-8法和流式细胞仪检测LY2334737对hBMSCs是否具有细胞毒性,空白组、对照组和试验组3组之间进行两两对比后发现,LY2334737对hBMSCs的细胞毒性作用差异均无统计学意义(F=1.631,P=0.2363),说明LY2334737对hBMSCs没有细胞毒性。与空载体组相比,Ad-hBMSCs+LY2334737组能抑制TCCSUP细胞的增殖(t=5.421,P=0.0006),与转染组相比,CES2-hBMSCs+LY2334737组能抑制TCCSUP细胞的生长(t=7.044,P=0.0001),说明CES2-hBMSCs联合LY2334737可促进TCCSUP细胞的凋亡。在动物实验中,依次将其余5组的结果分别与空白组进行两两比较,发现CES2-hBMSCs联合LY2334737更能抑制膀胱癌裸鼠的肿瘤增长(t=29.360,P<0.0001)。结论:CES2-BMSCs联合LY2334737的治疗方案对膀胱肿瘤起到了一定的抑制作用,这为膀胱癌的治疗方案提供了一定的参考依据。

石杉碱甲中间体2-甲氧基-6-羟基-7,8-二氢-5-喹啉羧酸甲酯合成研究进展

石杉碱甲是第二代高效乙酰胆碱酯酶抑制剂,是治疗早老性痴呆症的有效药物,其独特的药理特征和低毒性引起了人们的广泛关注。2-甲氧基-6-羟基-7,8-二氢-5-喹啉羧酸甲酯是合成石杉碱甲的关键中间体,笔者从不同的起始原料、构建方法,综述了该中间体的合成方法研究进展。

三种植物次生物质对B型烟粉虱羧酸酯酶活性及其对药剂敏感度的影响

采用人工饲料添加法，研究了不同浓度的槲皮素、2-十三烷酮和葫芦素B3种植物次生物质对B型烟粉虱Bemisiatabaci羧酸酯酶（Care）活性的影响，同时比较研究了用3种植物次生物质处理后敌敌畏、脱叶磷、灭多威、乐果和氧乐果5种药剂对CarE的抑制中浓度（Ⅰ50）的变化。结果表明：0．01—1．0mg／mL的槲皮素对B型烟粉虱成虫CarE活性均具有明显的诱导增加作用，最高为对照的4．32倍；0．1和0．5mg／mL的2-十三炕酮处理使CarE活性比对照分别下降了22％和58％；0．75～30．0mg／L的葫芦素B对烟粉虱CarE活性均表现为抑制作用；用1．0mg／mL的槲皮素处理24h后，敌敌畏和脱叶磷对烟粉虱CarE的Ⅰ50轴值分别增加为对照的20．05和3．16倍；3．75mg／L的葫芦素B处理后，敌敌畏和灭多威对CarE的Ⅰ50值分剐增加为对照的25．94、2．45倍；1．0mg／mL的2-十三烷酮处理后敌敌畏、脱叶磷和乐果对CarE的Ⅰ50值分别降低了89％、83％和90％。

羧酸酯酶2对多发性骨髓瘤的临床意义探讨

目的:探讨羧酸酯酶2(carboxylesterase 2,CES2)在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)中的临床意义。方法:对2020至2021年确诊为MM患者69例,采用酶联免疫吸附试验测定检测治疗前及化疗后2周后血清CES2含量,与60例正常体检人群进行比较。同时比较不同分期、分型患者血清CES2差异。通过医院信息系统、实验室信息系统、输血信息管理系统收集患者基本资料、主要实验室检查结果及成分输血情况,分析CES2与MM疾病进程的相关性。结果:69例MM患者治疗前血清CES2平均含量为(24.35±5.98)ng/mL,明显高于正常对照的(5.69±1.62)ng/mL(P<0.05),治疗后为(15.68±3.83)ng/mL,较治疗前明显下降(P<0.05)。Ⅲ期患者CES2明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者(P<0.05),不同分型间差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前血清CES2含量与患者血清肌酐、β-2微球蛋白及乳酸脱氢酶呈正相关(P<0.05),治疗前血清CES2含量与患者血红蛋白、白蛋白呈负相关(P<0.05),病程中输注红细胞患者的治疗前血清CES2含量明显高于未输注红细胞患者(P<0.05)。结论:CES2对MM的疾病进程预测具有临床价值。

烟草甲两个羧酸酯酶基因的克隆及表达模式

为了深入了解羧酸酯酶(Carboxylesterase,Car E)基因在烟草甲Lasioderma serricorne生长发育及响应CO_2气调胁迫方面的作用,在转录组测序基础上,利用RT-PCR技术克隆了烟草甲2个Car E基因c DNA全序列,对其分子特性和系统发育进行分析,并利用实时定量PCR技术检测其在不同发育阶段及不同φ(CO_2)气调胁迫条件下的表达模式。获得了烟草甲2个Car E基因完整的开放阅读框,其长度为1 698 bp和1 695 bp,编码565和564个氨基酸。氨基酸同源性和系统进化树分析表明,它们均具有羧酸酯酶典型的保守结构域,且属于β家族,分别命名为Ls Car EB1和Ls Car EB2(Gen Bank登录号:MG189601和MG189602)。Ls Car EB1和Ls Car EB2在烟草甲的各发育阶段均有所表达,其中在高龄幼虫期的表达量较高,显著高于低龄幼虫、蛹和成虫期的表达水平。LC10、LC30和LC503种φ(CO_2)处理6 h后,Ls Car EB1和Ls Car EB2的mRNA表达量随胁迫φ(CO_2)升高而上调且显著高于对照组。推测Ls Car EB1和Ls Car EB2不仅对烟草甲的生长发育具有重要作用,而且是其响应CO_2气调胁迫的重要机制之一。

羧酸酯酶单核苷酸多态性与个体化药物治疗的研究进展

人类羧酸酯酶(carboxylesterases,CESs)属于丝氨酸酯酶超家族,在人体中主要包含羧酸酯酶1(CES1)和2(CES2)2种亚型。CES负责多种药物的代谢,如部分血小板凝集抑制剂、精神兴奋剂、抗肿瘤药等,由于CES的单核苷酸多态性(SNP)在人类基因组中广泛存在,其对药物代谢酶基因的表达和(或)酶活性的高低有着重要影响,从而最终影响着药物在体内的代谢过程。本文综述了CES1和CES2相关SNP所致酶活性的改变,以及由于其多态性导致代谢药物体内过程改变的相关药物基因组学研究,以期为临床治疗和研究提供参考。

蔓长春花对草地贪夜蛾杀虫活性成分及机制研究

为寻找对草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda具有良好杀虫活性的化学成分,对蔓长春花石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯和水萃取物通过小叶碟添加法、浸叶法和浸虫法,测定其拒食、胃毒和触杀活性。结果表明:蔓长春花石油醚萃取物对草地贪夜蛾3龄幼虫的触杀活性最好,第1、3、5和7天的LC50分别为6.11、5.43、5.27和4.62 mg/mL。采用硅胶柱层析对蔓长春花石油醚萃取物进行分离,得到22个馏分,馏分5和馏分7的触杀活性最好。对馏分5进行GC-MS分析,主要化学成分为对二甲苯(17.56%)、壬烷(20.92%)和十三烷(28.33%)。馏分7经小孔树脂(MCI)分离后得到8个馏分,馏分Ⅵ的触杀活性最好,经GC-MS分析,主要化学成分为壬烷(19.09%)、十三烷(53.19%)和2,2,4,6,6-五甲基庚烷(5.21%)。对二甲苯的触杀活性最好,第1、3、5和7天时LC50分别为10.45、8.87、6.54和5.05 mg/mL。随着对二甲苯浓度的升高,乙酰胆碱酯酶(AChE)和Ca^(2+)-Mg^(2+)-ATPase的活性呈现先激活后抑制的趋势,羧酸酯酶(CarE)的活性呈现先抑制后激活的趋势。

羧酸酯酶1和2基因多态性在药物代谢中的研究进展

人类羧酸酯酶属于α/β水解酶家族,负责许多内源性和外源性化合物的水解,广泛位于药物代谢的主要组织,例如肝脏和小肠等。人羧酸酯酶主要有羧酸酯酶1(CES1)和2(CES2)。单核苷酸多态性(SNPs)对药物代谢酶的表达和(或)活性有重要的影响,这可能解释部分药物反应的个体差异。本篇综述主要介绍了由CES1和CES2单核苷酸多态性导致的CES酶多态性。对于含有酯键的药物,一些有意义的SNP可能影响CES酶的功能从而影响其药动学,进而对其药理和毒理作用发挥重要影响。

人羧酸酯酶2抑制剂药效团模型的构建及应用

该文通过收集文献中已报道的人羧酸酯酶2(human carboxylesterase 2,hCE2)小分子抑制剂,选择其中活性较强的化合物作为训练集,利用HipHop方法建立hCE2抑制剂的三维药效团模型。结果表明最优药效团具有2个疏水中心、1个氢键受体和1个芳环中心。利用测试集对其进行验证,准确率达95%以上。在此基础上,将该预测模型用于hCE2天然抑制剂的虚拟筛选,从赤芍化学成分中发现了5个hCE2的天然抑制剂,并对其hCE2抑制能力进行了实验验证。结果显示5个赤芍化学成分(CS-1,CS-2,CS-3,CS-6和CS-8)对hCE2的IC50分别5.04,5.21,5.95,6.64,7.94μmol·L-1,提示该研究构建的药效团模型具有较好的预测能力,有助于发现新型的hCE2抑制剂。

CES2、CA19-9表达与结直肠癌患者临床病理特征及化疗预后关系的分析

目的观察羧酸酯酶2(CES2)及糖链抗原19-9(CA19-9)在结直肠癌组织中的表达,并分析两者与患者临床病理特征及化疗预后的关系。方法采用免疫组织化学方法检测134例结直肠癌组织、30例腺瘤组织、30例正常结直肠组织中CES2、CA19-9表达情况,分析两者表达与结直肠癌患者临床病理特征和预后的关系。选择接受FOLFIRI化疗方案的69例结直肠癌患者,重点探讨CES2与患者FOLFIRI化疗近期疗效的关系。结果结直肠癌组中CES2高表达者占52.99%,CA19-9高表达者占79.85%,但与腺瘤及正常结直肠组织比较,差异均无统计学意义(均P> 0.05)。CES2高表达与患者性别、年龄、肿瘤大体类型、T分期、N分期、M分期、Dukes分期、肿瘤大小及分化程度均无关(均P> 0.05)。CA19-9高表达与性别、年龄、肿瘤大体类型、T分期、M分期、Dukes分期、肿瘤大小及分化程度均无关(均P> 0.05)。N1～2期患者中CA19-9高表达者比例高于N0期患者,差异有统计学意义(P <0.05)。CES2高表达患者累积生存时间长于低表达患者(P <0.05)。CA19-9高表达者累积生存时间与低表达者比较,差异无统计学意义(P> 0.05)。接受FOLFIRI化疗方案者中,CES2高表达者近期疗效优于低表达者,差异有统计学意义(P <0.05)。结论 CA19-9与结直肠癌患者淋巴结转移情况有关;CES2与结直肠癌患者临床病理特征无关,但可为化疗预后评估提供一定参考。

食物中Ni^2＋胁迫对斜纹夜蛾幼虫中肠细胞解毒酶的影响

食物中的Ni2+可在斜纹夜蛾Spodoptera litura Fabricius幼虫中肠细胞中积累,并能诱导中肠细胞中解毒蛋白金属硫蛋白(metallothionein,MT)的表达.本文研究了食物中不同剂量Ni2+对S.litura5龄和6龄幼虫中肠细胞解毒酶羧酸酯酶(carboxylesterase,CarE)和谷胱甘肽转移酶(glutathione S-transferase,GST)活性的影响.结果表明,S.litura幼虫连续3代取食含不同剂量Ni2+的食物后,5龄幼虫中肠细胞内的CarE活性均在低剂量Ni2+(≤5mg/kg)胁迫下低于对照,在高剂量Ni2+(≥10mg/kg)胁迫下高于对照.第1代6龄幼虫中肠细胞内的CarE活性也表现为低剂量Ni2+胁迫抑制而高剂量Ni2+胁迫增加的趋势,但第2和第3代6龄幼虫中肠细胞内的CarE活性均低于对照.连续3代受不同剂量Ni2+胁迫的5龄和6龄幼虫中肠细胞的GST活性均高于对照,并随饲料中Ni2+剂量(1～20mg/kg)的增加而增加。

荧光检测人羧酸酯酶的研究进展

羧酸酯酶是丝氨酸酯酶大家族的一员,它们主要是对脂类物质起水解作用,其活性直接与许多的疾病相关,人体中主要存在人羧酸酯酶1和人羧酸酯酶2。因此,在检测酶活性方面受到了广大研究者的青睐。传统的检测方法过程繁琐,费时费力,设备昂贵,检测不出酶的活性。近年来荧光探针技术成为测量生物样本中人羧酸酯酶1、人羧酸酯酶2真实活性的实用、敏感、高选择性、高精确度的检测方法。本文主要针对近年来用于检测酶活性的荧光探针进行总结。