IgG三羰基锝[^(99m)Tc(CO)_3(H_2O)_3^+]标记方法及其在动物体内的生物学分布

目的探索利用fac-[99mTc(CO)3(H2O)3]+中间体标记IgG的方法,了解99mTc(CO)3(H2O)3-IgG在体内外的稳定性,并研究其在小鼠体内的生物分布情况。方法自行合成fac-[99mTc(CO)3(H2O)3]+中间体,并采用聚酰胺薄膜层析法测定其放化产率,利用放化中间体fac-[99mTc(CO)3(H2O)3]+直接进行IgG的放射性标记,用纸层析法测定标记率及放化纯度。并分别观察99mTc标记IgG在人血清白蛋白(HSA)及生理盐水(NS)中的稳定性。取9只小白鼠,分别经尾静脉注入99mTc标记IgG(3.7×104Bq/100μl),于注药后2、4和12h分别先进行SPECT显像,然后处死小鼠分离各脏器,称重后测定放射性计数,计算各脏器每克组织百分注射剂量(%ID/g)。结果 fac-[99mTc(CO)3(H2O)3]+中间体的放化产率为82.48%,室温放置4h保持稳定。99mTc(CO)3(H2O)3-IgG的标记率为57.04%,放化纯度均大于90%,在HSA中温育24h放化纯度保持稳定,而在NS中温育24h放化纯度则降为20%。体内生物分布显示99mTc(CO)3(H2O)3-IgG在体内主要分布于肝、脾、肾,可较长时间存留于血池中。结论利用放化中间体fac-[99mTc(CO)3(H2O)3]+直接进行IgG放射性标记,具有良好的体内、外稳定性,在小鼠组织中分布特点符合IgG体内的放射性分布规律,可满足进一步的单抗及多肽标记的实验要求。

三羰基锝([^(99m)Tc(CO)_3(OH_2)_3]^+)标记Morpholino寡核苷酸

采用三羰基锝药盒制备三羰基锝([99mTc(CO)3(OH2)3]+),并以DTPA作为双功能螯合剂,标记人工合成的Morpholino寡核苷酸。高效液相色谱(HPLC)证实,此方法三羰基锝产率大于90%,且产率稳定;Morpholino寡核苷酸的标记率为(63±7)%,纯化后比活度为(9.62±1.26)GBq/μg;标记的Morpholino寡核苷酸在生理盐水及新鲜人血清中经过48h仍保持其稳定性(>90%),并保持与其互补链的杂交特性。总之,药盒法制备三羰基锝是一种简单而可靠的方法。Morpholino可以被三羰基锝成功标记并保持其生物活性。

色氨酸、组氨酸羰基锝配合物的制备及其在荷S180瘤小鼠体内的分布

采用两步法合成了色氨酸及组氨酸的羰基锝配合物。纸上电泳结果表明 ,在pH为 4 .7、7.4和 9.2三种缓冲体系中配合物不带电荷。从实验结果推测了其可能的结构。在荷肉瘤S180的小鼠体内分布实验表明 ,组氨酸羰基锝配合物在体内稳定 ,清除速率也较快 ,在肿瘤中有较高的摄取 ,肿瘤 /肌肉达到 3— 4。而色氨酸的羰基锝配合物在体内不稳定 ,各组织和器官内滞留时间较长、摄取较高 ,肿瘤中也有一定的摄取 ,肿瘤 /肌肉为 2— 3,但其效果远不如组氨酸羰基锝配合物。

羰基锝-EC的制备及其生物分布研究

制备了羰基锝-EC并研究了其在小鼠体内的生物分布特征。小鼠体内的活性实验结果表明,羰基锝EC具有高的肾初始摄取和较快的血清除速度,并且有很高的肾清除率(半清除时间小于5min),为羰基锝核在肾功能显像剂方面的应用提供了借鉴。

羰基锝标记富勒醇C_(60)(OH)_(20)的制备及其生物体外性质研究

以99TcmO4-淋洗液为起始物,在0.1 MPa CO条件下成功制备了羰基锝中间体[99Tcm(CO)3(H2O)3]+,并研究了反应体系pH值、配体C60(OH)20浓度以及反应温度和时间对99Tcm(CO)3-C60(OH)20配合物标记率的影响,测定了该配合物的脂水分配系数并观测了其在体外的稳定性和抗稀释稳定性。结果表明,该配合物的最佳标记条件为:0.1 mL[99Tcm(CO)3(H2O)3]+中间体,0.1 mL10 mg/mL的C60(OH)20溶液,pH为8,在98℃沸水浴中反应30min,标记率大于95%。99Tcm(CO)3-C60(OH)20为一种亲水性配合物,其体外稳定性和抗稀释稳定性均较好。

[^(99)Tc^m(CO)_3(H_2O)_3]^+标记的新双功能联接剂的研究

设计合成了3种新的小分子三齿配体NNS 1,NNS 2,NSN,并设计合成了文献报道的NNO三齿配体。它们作为双功能联接剂可以连接受体、多肽、蛋白等靶向性分子,用于设计合成新的以[99Tcm(CO)3]为核心的放射性药物。标记条件实验证明,3种新配体在配体量极低(10μg)、在较短的反应时间内(10min),配体标记率可以达到95%以上,放射化学纯度大于90%,均为高效的双功能联接剂;电泳实验和脂溶性实验表明:NNS 1,NNS 2,NSN与羰基锝标记后,锝配合物显示不同价态;稳定性实验证明,3种标记均具有很高的体外稳定性,标记后6h内基本不分解;GSH,L 半胱氨酸体外竞争稳定性实验证明其不易受到裸露-SH的进攻,因而在体内也会有较高的稳定性;小鼠动物分布试验表明,3个配合物均能较快地从血液和多数组织器官中清除,主要在肝脏浓集,是较理想的标记[99Tcm(CO)3(H2O)3]+的双功能联接剂。

一种新的潜在心肌显像剂[^(99m)Tc(CO)_3(TBI)_3]^+的制备及其生物分布研究

以 [99m Tc O4]- 为起始物 ,在 0 .1 MPa下制备了中间体 [99m Tc( CO) 3 ( H2 O) 3 ]+,通过配体交换反应 ,叔丁基异腈 ( TBI)配体取代该配合物中的 3个水分子 ,制得一种标记率大于 90 %的 [99m Tc( CO) 3 ( TBI) 3 ]+配合物 .该配合物在室温下放置 6 h以上 ,标记率无明显变化 .在正常昆明小鼠体内的生物分布实验结果表明 ,[99m Tc( CO) 3 ( TBI) 3 ]+具有较高的心肌摄取 ,且滞留也相当好 ,在静脉注射 5 min和 6 0 min后时的心肌摄取值分别为 ( 1 9.0 7± 0 .81 ) % ( ID/g)和 ( 1 8.2 4± 2 .4 1 ) % ( ID/g) .该配合物的非靶本底摄取较低 ,注射 6 0 min后的心 /肝、心 /肺和心 /血摄取比值分别为 1 .0 2 ,5 .83和 2 3.6 9,有望发展为一种新的心肌显像剂 .

^(99)Tc^m标记右旋糖苷衍生物的制备及其生物分布

采用Isolink药盒制备了羰基锝[99 Tcm(CO)3(H2O)3]+,用制备的羰基锝标记右旋糖苷衍生物;将标记物由小鼠的后足脚垫皮下注射,分别于给药后1、4h处死(处死前10min注入专利蓝溶液),取前哨淋巴结(Sentinel Lymph Node,SLN)、次级淋巴结(2LN)、注射点、肝、脾、血,分别测量其放射性计数,计算组织或器官的放射性摄取率,研究甘露糖基和右旋糖苷衍生物相对分子质量对小鼠淋巴结摄取及体内分布的影响。结果显示:当分子中不含甘露糖基时,SLN的摄取率很低,在注射点的摄取也相对较少,并且体内清除较快;而当分子中含有甘露糖基时,SLN的摄取率大幅提高,但在注射点的滞留也显著提高。以上结果表明,分子中的甘露糖基对淋巴结巨噬细胞表面受体具有亲和作用。另外,右旋糖苷衍生物相对分子质量的不同,也会造成不同的生物分布,相对分子质量较大的标记化合物,SLN提取更高,差异显著(P<0.005);此外,标记物的注射剂量和注射体积也会对SLN的摄取产生较大影响。99 Tcm标记的甘露糖基化右旋糖苷衍生物具有优良的淋巴结摄取及体内分布性质,作为潜在的SLN显像剂,值得进一步研究。

^(99)Tc^m标记右旋糖苷衍生物DCM-1的淋巴结摄取和显像

采用99 Tcm标记连接有S-半胱氨酸基团的甘露糖基化右旋糖苷衍生物(Dextran-S-Cysteine-Mannose,DCM),得到99 Tcm-(CO)3-DCM-1,在此基础上,进行了不同注射剂量的99 Tcm-(CO)3-DCM-1在正常小鼠体内分布和在Wistar大鼠淋巴结显像实验。实验结果表明,99 Tcm-(CO)3-DCM-1在正常小鼠的淋巴结摄取对注射剂量很敏感,当注射剂量(包括注射化学量和注射体积)减少时,前哨淋巴结(Sentinel Lymph Node,SLN)的摄取率提高,SLN提取率也相应提高。显像结果表明,减少标记物的注射剂量可以提高SLN显像效果。以上结果提示:99 Tcm-(CO)3-DCM-1的SLN摄取与提取率较高,SLN显像清晰,具有应用于SLN显像的潜在价值,值得进一步研究。

^99Tc^m(CO)3^＋核心标记的邻二氮杂菲类化合物的理化性质和生物分布

确定化合物可以通过血脑屏障进入脑中并迅速从脑中清除,是判断药物能否作为阿尔茨海默病显像剂的首要条件。为发展99Tcm标记的阿尔茨海默病早期显像诊断药物,在前期研究与DNA分子结合的荧光探针钌金属配合物的基础上,设计合成了2个邻二氮杂菲类配体2-(9-蒽基)-1氢-咪唑[4,5-f][1,10]邻菲咯啉(2-(9-anthryl)-1H-imidazo[4,5-f][1,10]phenanthroline,aip)和2-(9-蒽基)-1乙基-咪唑[4,5-f][1,10]邻菲咯啉(2-(9-anthryl)-1ethyl-imidazo[4,5-f][1,10]phenanthroline,aeip),并与99Tcm(CO)3+进行标记。采用R-HPLC、纸电泳等方法研究标记产物的理化性质。正常小鼠体内生物分布研究表明,2种化合物99Tcm(CO)3+-aip和99Tcm(CO)3+-aeip均有一定的脑初始摄取,注射后2min,前者为(1.028±0.096)%ID/g;后者为(1.191±0.197)%ID/g,因此标记物具有进一步研究的价值。

一种新的^(99m)Tc标记的[Tc(CO)_3(MIBI)_3]^+络合物作为心肌显像剂

最近，Ａｌｂｅｒｔｏ等人报道了一种在低压（约１０５Ｐａ）条件下制备水溶性的有机金属络合物［９９ｍＴｃ－ （ＣＯ）３（ＯＨ２）３］＋的方法．该络合物在水和空气中均比较稳定，且水配体很容易被其他的络合能力较强的 配体所取代，这使得羰基络合物可作为放射性药物应用于核医学．考虑到［９９ｍＴｃ（ＣＯ）３（ＯＨ２）３］＋是一种＋１ 价的络合物，于是用六甲氧基异丁基异腈（ＭＩＢＩ）取代上述络合物中的３个水配体，制得了一种新的有机 锝络合物［９９ｍＴｃ（ＣＯ）３（ＭＩＢＩ）３］＋，其放射化学产率可达８５％，且具有较好的体外稳定性．由于该络合物与 已被广泛应用的心肌显像剂［９９ｍＴｃ（ＭＩＢＩ）６］＋具有相似的结构，因此，期望［９９ｍＴｃ（ＣＯ）３（ＭＩＢＩ）３］＋也能在心 肌中浓集，并可改善［９９ｍＴｃ（ＭＩＢＩ）６］＋心／肝比值偏低的缺点．随后进行的小鼠体内生物分布实验表明，该 络合物的确能在心肌中浓集，且具有较高的心／肝比和与［９９ｍＴｃ（ＭＩＢＩ）６］＋相当的心／血比，这使得其具有 成为心肌灌注显像剂的潜力．

^(99m)Tc放射性药物化学

99mTc放射性药物在科学研究和临床上已经得到了广泛的应用,但如何发展药效更好的药物以适应临床诊断的需求,依然是亟待解决的问题。新药物配体和金属核的引入以及新的标记方法的发展是目前99mTc放射性药物研究的热点。本文介绍99mTc放射性药物化学的几种新标记方法,包括羰基锝标记的新型配体和新方法9、9mTc高价配合物的制备和应用等,旨在对有关研究者提供参考。

凋亡显像剂99mTc（CO）3-Annexin V的制备及其在小鼠体内的生物学分布

目的：使用放射性核素^（99m）Tc标记特异性靶向凋亡蛋白Annexin V,并研究标记化合物在小鼠体内的药代动力学特点。方法：采用Tricarbonyl kit制备标记前体三羰基锝化合物盐溶液以标记Annexin V;测定标记化合物的标记率、放化纯及稳定性。通过生物分布实验研究^（99m）Tc（CO）_3-Annexin V在健康昆明小鼠体内的药代动力学特点。结果：成功制备了^（99m）Tc（CO）_3-Annexin V,标记率为（57.21±2.83）%,比活度为（5.65±0.43）mCi/100μg,放化纯〉90%,其在体外稳定性良好,至标记后6h放化纯仍大于〉90%。^（99m）Tc（CO）_3-Annexin V在小鼠体内循环半衰期较短,注入体内2h后即可排出约40%,4h后排出约60%。肾脏和肝脏是^（99m）Tc（CO）_3-Annexin V的主要排泄器官。结论：本研究表明利用Tricarbonyl kit可以成功将放射性核素^（99m）Tc标记Annexin V,标记率高且方法简便可行,是一种具有广泛应用前景的凋亡显像剂。