乙型肝炎肝硬化患者辅助性T淋巴细胞17和调节性T淋巴细胞及维甲酸相关核孤儿受体γt和叉状头/翅膀状螺旋转录因子3 mRNA表达水平的变化及其临床意义研究

目的通过对乙型肝炎肝硬化患者外周血辅助性T淋巴细胞17(Th17)、调节性T淋巴细胞(Treg)及其特异性转录因子维甲酸相关核孤儿受体γt(RORγt)和叉状头/翅膀状螺旋转录因子3(Foxp3)mRNA表达水平的检测探讨其临床意义。方法选取2015年7—12月昆明医科大学第一附属医院诊治的慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者64例,其中慢性乙型肝炎(CHB)患者21例(CHB组)、代偿期肝硬化(CLC)患者21例(CLC组)、失代偿期肝硬化(DCLC)患者22例(DCLC组)。同期选取本院体检健康者20例为对照组。收集研究对象一般资料〔性别、年龄及丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、总胆红素(TBIL)〕;应用流式细胞术检测研究对象外周血Th17、Treg表达率,计算Th17/Treg比值;应用实时荧光定量反转录聚合酶链式反应(RT-q PCR)法测定外周血RORγt、Foxp3 mRNA表达水平。结果 4组年龄、ALT、AST、TBIL比较,差异有统计学意义(P<0.05)。CHB组、CLC组、DCLC组Th17、Treg表达率及Th17/Treg比值均高于对照组(P<0.05);DCLC组Th17、Treg表达率及Th17/Treg比值均高于CHB组,Th17表达率及Th17/Treg比值均高于CLC组(P<0.05)。CHB组、CLC组、DCLC组RORγt mRNA及Foxp3 mRNA表达水平均高于对照组(P<0.05);DCLC组RORγt mRNA及Foxp3 mRNA表达水平均高于CHB组、CLC组(P<0.05)。CHB组、CLC组、DCLC组外周血Th17表达率与RORγt mRNA表达水平均呈正相关(P<0.05);CHB组、CLC组、DCLC组外周血Treg表达率与Foxp3 mRNA表达水平均呈正相关(P<0.05);CHB组、CLC组、DCLC组外周血Th17表达率、RORγt mRNA表达水平与ALT呈正相关(P<0.05);CHB组外周血Foxp3mRNA表达水平与ALT呈正相关(P<0.05);CHB组RORγt mRNA表达水平、Foxp3 mRNA表达水平与AST、TBIL呈正相关(P<0.05)。结论 Th17、Treg及其特异性转录因子RORγt、Foxp3可能与乙型肝炎肝硬化患者的疾病进展与肝功能有关。

慢性光化性皮炎患者外周血T细胞亚群及皮损白细胞介素-17、叉头状螺旋转录因子3的表达

目的:检测慢性光化性皮炎(Chronic Actinic Dermatitis,CAD)患者外周血辅助性T细胞(T Helper Cells,Th)17、调节性T细胞(Regulatory T Cells,Treg)、Th1、Th2细胞百分比以及皮损中白细胞介素(Interleukin,IL)-17、叉头状螺旋转录因子3(Forkhead Helix Transcription Protein 3,FOXP3)的表达,探究其变化趋势及相关临床意义。方法:外周血T细胞亚群的检测:以大理大学第一附属医院皮肤科符合CAD诊断标准的患者20例为试验1组,以健康体检科符合研究标准的20例健康体检者作为对照1组。通过流式细胞分析仪检测外周血中Th1、Th2、Th17、Treg细胞的百分比,计算Th1/Th2和Th17/Treg值。采用相应统计学方法进行统计分析。皮损IL-17、FOXP3的检测:选取大理大学第一附属医院皮肤科符合CAD诊断标准的患者20例作为试验2组,以手术门诊切痣患者切下的痣组织周围正常皮肤组织20例作为对照2组。通过石蜡切片免疫荧光实验检测CAD皮损和正常皮肤组织中IL-17、FOXP3的表达。采用相应的统计学方法进行统计分析。结果:①试验1组外周血Th1、Th2、Th17、Treg百分比分别为(25.81±6.52)%、(42.79±9.66)%、(12.34±5.15)%、(8.32±3.06)%;对照1组外周血Th1、Th2、Th17、Treg百分比分别为(12.59±2.69)%、(50.88±9.06)%、(12.74±5.09)%、(10.42±2.07)%;②试验1组Th1/Th2和Th17/Treg值分别为0.58(0.48,0.74)和1.65(1.00,2.21);对照组Th1/Th2和Th17/Treg值分别为0.26(0.21,0.31)和1.23(0.82,1.45);③试验2组皮损中IL-17和FOXP3的阳性率分别为(85.91±11.73)%和3.60(1.97,4.83)%;对照1组皮损中IL-17和FOXP3的阳性率分别为(89.85±8.18)%和1.32(0.85,2.79)%。结论:CAD患者非急性发作期外周血中Treg低表达、Th1高表达,皮损中FOXP3高表达,其发病可能与外周血Th17/Treg、Th1/Th2表达失衡及皮损IL-17/FOXP3的表达失衡有关,而Th17/Treg、Th17百分比及皮损中IL-17表达的差异无统计学意义。

甲状腺乳头状癌组织中肿瘤转移相关基因1、叉头翼螺旋转录因子3水平变化与临床病理特征及淋巴转移的关系

目的:探讨肿瘤转移相关基因1(MTA1)、叉头翼螺旋转录因子3(FOXP3)在甲状腺乳头状癌(PTC)淋巴转移患者中的作用及临床意义。方法:选取手术治疗的111例PTC患者为研究对象,收集患者的癌组织及癌旁组织标本,采用免疫组织化学染色法观察组织中MTA1、FOXP3表达情况;采用多因素Logistic回归风险模型分析影响PTC淋巴转移的因素。结果:111例PTC组织标本中,MTA1的阳性表达率(MTA1阳性例数/癌组织总例数)为78.38%(87/111)高于癌旁组织17.12%(19/111),FOXP3在PTC组织中的阳性表达率(FOXP3阳性例数/癌组织总例数)为70.27%(78/111)高于癌旁组织13.51%(15/111),两组比较差异有统计学意义(均P<0.05);Spearman等级相关分析结果显示MTA1与FOXP3表达呈正相关(r=0.532,P=0.000);PTC患者癌组织中MTA1与FOXP3表达与包膜侵犯、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05);单因素分析结果显示淋巴转移患者与未转移患者在性别、病灶数、包膜侵犯、TNM分期、脉管侵犯、MTA1及FOXP3等病理特征方面比较有统计学差异(均P<0.05);多因素Logistic回归分析结果显示性别、病灶、TNM分期、包膜侵犯及MTA1、FOXP3表达均是影响PTC淋巴转移的危险因素(均P<0.05)。结论:MTA1、FOXP3在PTC患者癌组织中表达均升高,其表达水平与包膜侵犯、淋巴结转移、TNM分期有关,可作为评估PTC淋巴转移的有效指标。

抑制转录共激活因子TAZ和叉状头／翅膀状螺旋转录因子3的表达与结直肠癌生物学行为的关系

目的检测抑制转录共激活因子TAZ和叉状头/翅膀状螺旋转录因子3（FoxP3）在结直肠癌组织中的表达水平，探讨两者表达水平与结直肠癌患者临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学法检测101例结直肠癌组织和结直肠癌癌旁组织中TAZ和FoxP3表达水平，结合临床资料进行相关分析。结果TAZ在结直肠癌组织的阳性表达率为75.25%（76/101），明显高于癌旁组织阳性表达率[31.68%（32/101）]，两者差异有统计学意义（t＝38.520，P＝0.000），TAZ表达水平与结直肠癌组织学分化程度、TNM分期、浸润深度、淋巴结转移明显相关（分别为t＝5.840，P＝0.020；t＝4.120，P＝0.040；t＝4.860，P＝0.030；t＝4.590，P＝0.030）；FoxP3在结直肠癌组织的阳性表达率为80.20%（81/101），明显高于结直肠癌癌旁组织阳性表达率[34.6%（35/101）]，两者差异有统计学意义（t＝42.850，P＝0.000），FoxP3表达水平与结直肠癌TNM分期、浸润深度、淋巴结转移明显相关（分别为t＝4.240，P＝0.040；t＝5.870，P＝0.020；t＝4.650，P＝0.030）。结论同时检测结直肠癌组织中TAZ和FoxP3表达水平，有助于判断结直肠癌浸润转移潜能及评估结直肠癌患者预后。

肝外胆管癌组织叉状头/翅膀状螺旋转录因子3阳性调节性T细胞浸润及其临床意义

目的 观察叉状头/翅膀状螺旋转录因子3（Foxp3）阳性调节性T细胞（Treg）在肝外胆管癌（EHCC）组织中的浸润,探讨环氧合酶-2（COX-2）蛋白表达与Foxp3^＋ Treg细胞浸润的关系.方法 采用免疫组织化学法检测Foxp3^＋ Treg在94例胆管癌组织和COX-2蛋白在77例胆管癌组织中的表达,分析浸润细胞以及COX-2蛋白表达与临床和预后的关系,观察肝外胆管癌组织中COX-2蛋白表达对Foxp3^＋ Treg浸润的影响.结果 94例肝外胆管癌组织中均存在浸润的Foxp3^＋ Treg细胞,中位值为2.35个/高倍视野.Foxp3^＋ Treg细胞的浸润与肝外胆管癌患者的组织学分级、临床分期和淋巴结转移无明显相关（P＞0.05）.但Foxp3^＋ Treg细胞低计数组患者的生存时间明显高于高计数组（P＜0.05）.多因素分析表明Foxp3^＋Treg细胞浸润是肝外胆管癌预后的独立影响因素.77例胆管癌组织中COX-2表达阳性率为81.8％.COX-2蛋白的表达与组织学分级、临床分期和淋巴结转移无明显相关（P＞0.05）.COX-2蛋白表达与Foxp3^＋ Treg细胞浸润之间呈正相关（r=4.89,P ＜0.05）.结论 肝外胆管癌组织中Foxp3^＋ Treg细胞浸润与肝外胆管癌患者的预后负相关,是影响肝外胆管癌预后的独立影响因素.COX-2蛋白表达可能促进Foxp3^＋ Treg细胞的浸润.

信号转导和转录激活因子3和长链非编码RNA肿瘤易感候选基因11在子痫前期胎盘中的表达及与胎盘螺旋动脉重铸的关系

目的 探究子痫前期(PE)病人胎盘组织中信号转导及转录活化因子3(STAT3)、长链非编码RNA肿瘤易感候选基因11(lncRNA CASC11)表达水平与胎盘螺旋动脉重铸的关系。方法 选取2019年1月至2022年4月于沧州市人民医院行剖宫产分娩的68例PE病人为PE组,并选取同期该院行剖宫产分娩的68例健康孕妇为健康组。比较PE组、健康组一般资料及胎盘组织中STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平;分析PE病人胎盘组织中STAT3 mRNA表达水平与lncRNA CASC11的相关性;比较健康组与PE组胎盘螺旋动脉管壁厚度、管腔面积;分析PE病人胎盘组织中STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平与胎盘螺旋动脉管壁厚度、管腔面积的相关性。结果 PE组病人舒张压、收缩压高于健康组(P<0.05),胎盘组织中STAT3mRNA、lncRNA CASC11表达水平分别为0.40±0.14、0.46±0.15,低于健康组的1.04±0.35、1.01±0.34(P<0.05),胎盘螺旋动脉管壁厚度高于健康组(P<0.05),管腔面积小于健康组(P<0.05);PE病人胎盘组织中STAT3 mRNA表达水平与lncRNA CASC11,及STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平与胎盘螺旋动脉管腔面积均呈正相关(P<0.05),STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平与胎盘螺旋动脉管壁厚度呈负相关(P<0.05)。结论 PE病人胎盘组织中STAT3 mRNA、lncRNA CASC11表达水平均较低,二者均与胎盘螺旋动脉重铸关系密切,可能为临床诊治PE提供新方向。

叉状头/翅膀状螺旋转录因子3对结直肠癌细胞凋亡的影响

目的 观察叉状头/翅膀状螺旋转录因子3（Foxp3）在结直肠癌中的表达及其短发夹RNA（shRNA）对结直肠癌细胞凋亡的影响.方法 Western blot检测结直肠癌组织和对应的癌旁组织中Foxp3的表达水平.同时Western blot检测人结直肠癌细胞HCT116、SW480、RKO及人肠黏膜细胞CCC-HIE-2中Foxp3的表达水平.转染靶向Foxp3基因的shRNA的表达载体Foxp3 shRNA1、Foxp3 shRNA2和对照序列载体shRNA control至人结直肠癌细胞中,分别命名为Foxp3 shRNA1、Foxp3 shRNA2、shRNA control组.同时设置未转染组,未转染组中只加入转染试剂.Western blot和反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测Foxp3水平,筛选出干扰效率较高的shRNA.流式细胞术检测48h细胞凋亡.结果 Foxp3在癌旁组织及结肠癌组织中表达水平依次为：0.24±0.05、0.78±0.08,差异有统计学意义（t=63.254,P=0.000）.Foxp3在人结直肠癌细胞HCT116、SW480、RKO中的表达水平均高于人肠黏膜细胞CCC-HIE-2,且Foxp3的表达水平由低到高依次为：RKO、HCT116、SW480,后期选用SW480继续研究.未转染组、shRNA control、Foxp3 shRNA1、Foxp3 shRNA2 组细胞中Foxp3蛋白表达水平依次为：0.92±0.05、0.93±0.07、0.21±0.04、0.34±0.06,mRNA 表达水平依次为：1.00±0.07、1.01±0.08、0.53±0.06、0.79±0.08,后续选用Foxp3 shRNA2干扰Foxp3表达.未转染组、shRNA control、Foxp3 shRNA2组细胞凋亡率依次为（13.21±3.12）%、（12.98±3.54）%、（32.01±6.72）%.Foxp3 shRNA2组细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2（bcl-2）表达水平依次为：0.86±0.05、0.85±0.06、0.26±0.05,活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶3（Cleaved Caspase-3）表达水平依次为：0.38±0.09、0.39±0.08、0.88±0.06,磷酸化信号转导和转录激活因子3（p-STAT3）表达水平依次为：0.40±0.06、0.39±0.04、0.22±0.05.结论 Foxp3在结直肠癌组织及细胞中均表达上调,干扰Foxp3表达能促进人结直肠癌细胞凋亡,作用机制可能与STAT3信号通路有关.

肝癌HepG2细胞来源外泌体通过环磷酸腺苷反应元件结合蛋白／叉状头／翅膀状螺旋转录因子3调控调节性T细胞的机制

目的探讨肝癌HepG2细胞来源外泌体是否通过环磷酸腺苷（cAMP）反应元件结合蛋白／叉状头／翅膀状螺旋转录因子3（CREB／Foxp3）途径调控调节性T细胞（Treg细胞）。方法超速离心法分离外泌体（Exsomes）；透射电镜及Westernblot对外泌体进行鉴定；将HepG2和L02细胞来源外泌体分别与人外周血单个核细胞共培养，流式细胞检测Treg细胞比例的变化，Westernblot检测CREB／Foxp3信号蛋白的表达。结果见外泌体直径约30-100nm，呈圆形或椭圆形的囊泡状结构，且富含CD81和CD63蛋白。与L02-exo组[（1．87±0．18）％]和空白对照组[（1．43±0．12）％]比较，HepG2-exo组[（6．87±0．87）％]Treg细胞的比例显著上调，P值分别为0．005和0．004。HepG2-exo组CREB磷酸化分别是对照组和L02-exo组的1．74倍和1．63倍，P值均为0．001；HepG2．exo组Foxp3磷酸化分别是对照组和L02-exo组的1．93倍和1．78倍，P值均为0．001。结论肝癌细胞HepG2来源的外泌体可能通过CREB／Foxp3信号上调Treg细胞比例参与肿瘤免疫逃逸。

丙酮酸激酶M2通过活化信号转导和转录激活因子3影响皮肤鳞状细胞癌上皮间质转化过程

目的:检测丙酮酸激酶(PK)M2和磷酸化信号转导和转录激活因子(p-STAT)3在皮肤鳞状细胞癌(CSCC)中的表达情况,初步探讨其在CSCC A431细胞系上皮间质转化过程中的作用机制。方法:选取经组织病理检查确诊的30例CSCC患者肿瘤组织和10例行皮肤美容手术患者术中修整切除的正常皮肤组织,通过免疫组化SP法比较PKM2和p-STAT3在两种组织中的表达情况。分析CSCC中PKM2和p-STAT3表达水平与临床病理资料的相关性。采用慢病毒感染法构建靶向敲低PKM2基因的CSCC A431细胞模型,采用免疫印迹(Western blot)法验证敲低模型的构建效果。通过Transwell实验和细胞划痕实验探讨PKM2对A431细胞迁移能力的影响。采用Western blot法检测STAT3、p-STAT3(Tyr705)、N-cadherin、Vimentin和Slug蛋白的表达。结果:PKM2和p-STAT3在CSCC中均高表达,且两者表达水平之间呈正相关。PKM2和p-STAT3在CSCC中的表达与肿瘤分化程度相关。在A431细胞中敲低PKM2基因后,p-STAT3(Tyr705)、N-cadherin和Slug表达下降,差异有统计学意义(P<0.05),而STAT3和Vimentin表达变化差异无统计学意义。结论:PKM2和p-STAT3的高表达可能参与了CSCC的发生及发展,且PKM2可能通过活化STAT3促进CSCC上皮间质转化过程。

叉状头/翅膀状螺旋转录因子在BXSB狼疮小鼠肾脏中的表达

目的观察叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)在BXSB狼疮小鼠肾脏中的表达,探讨Foxp3在狼疮性肾炎中可能的免疫耐受诱导作用及机制。方法选取8周龄及16周龄雄性BXSB小鼠各6只,以8周龄C57BL/6雄性小鼠6只为正常对照,用免疫组织化学及实时荧光定量PCR方法,检测Foxp3在小鼠肾脏中的表达。结果正常对照组C57BL/6小鼠肾组织Foxp3阳性表达,细胞呈深棕色着色,广泛分布于肾小管;8周龄及16周龄BXSB小鼠肾脏组织Foxp3弱阳性表达,细胞呈浅棕色着色,分布于肾小管。8、16周龄BXSB组小鼠肾组织内Foxp3mRNA表达水平[(0.55±0.06),(0.51±0.07)]均较正常对照组(1.02±0.08)降低,差异有统计学意义(均P<0.01);16周龄BXSB组小鼠的Foxp3mRNA表达水平较8周龄BXSB组降低,但差异没有统计学意义(P>0.05)。结论 BXSB小鼠狼疮肾炎的发病机制可能与调节性T细胞的Foxp3表达下调相关。

白细胞介素-17和叉头状螺旋转录因子3在子痫前期发病机制中的作用及剖宫产术后自控镇痛对其表达的影响

目的探究白细胞介素-17(IL-17)和叉头状螺旋转录因子3(Foxp3)在子痫前期发病机制中的作用,对比重度子痫前期产妇剖宫产术后,超声引导下双侧腹横肌平面(TAP)阻滞复合静脉泵自控镇痛(PCIA)与硬膜外镇痛对疼痛控制及外周血中IL-17和Foxp3表达水平的影响。方法筛选2016年2月至2020年2月苏州市立医院重度子痫前期产妇40例,按随机数字表法分为两组(n=20),于腰-硬联合阻滞麻醉(CSEA)下行剖宫产手术,术毕T组:超声引导下低位TAP阻滞,双侧各注入0.375%罗哌卡因20 mL,复合舒芬太尼50μg+氟比洛芬200 mg生理盐水稀释至100 mL静脉自控镇痛;E组:0.15%罗哌卡因100 mL+0.04 mg/L舒芬太尼,硬膜外泵镇痛。另选20例正常产妇入C组为对照组。术后6 h(T_(1))、12 h(T_(2))、24 h(T_(3))、48 h(T_(4))对T组和E组产妇进行视觉模拟评分法(VAS)。酶联免疫吸附测定(ELISA)检测外周血中IL-17和Foxp3表达水平,T组和E组产妇于麻醉开始即刻T_(0)、T_(1)、T_(2)、T_(3)、T_(4);C组于入院分娩时(T)。结果T组和E组产妇静止、咳嗽VAS评分差异无统计学意义(P>0.05);T组和E组T_(0)时较C组IL-17水平明显升高、Foxp3水平明显降低;T组和E组,T_(1)较T_(0) IL-17水平明显升高、Foxp3水平明显降低,T_(3)、T_(4)较T_(1) IL-17水平逐渐减低、Foxp3水平逐渐升高,T_(3)较T_(2),T_(4)较T_(0)、T_(2)、T_(3) IL-17水平明显降低、Foxp3水平明显升高(P<0.05);T_(1)和T_(2),T组和E组间IL-17、Foxp3水平变化差异无统计学意义(P>0.05);T_(3)和T_(4),较T组,E组IL-17水平[(68.98±14.82)ng/L比(83.51±15.77)ng/L,(36.38±12.34)ng/L比(51.65±18.43)ng/L]明显降低,Foxp3水平[(89.36±25.83)ng/L比(74.97±23.31)ng/L,(116.17±32.46)ng/L比(98.74±27.59)ng/L]明显升高(P<0.05)。结论Foxp3低表达和IL-17高表达参与了子痫前期的发病过程,可能与发病机制相关。超声引导下双侧TAP阻滞复合PCIA对剖宫产术后镇痛效果确切,有效调控IL-17和Foxp3表达,促进术后重度子痫前期产妇预后;但其抑炎作用较硬膜外镇痛弱。

布地奈德对支气管哮喘患儿外周血干扰素-γ、白细胞介素-4和叉状头状螺旋转录因子3的影响

目的探讨布地奈德对支气管哮喘患儿外周血干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)及叉状头状螺旋转录因子3(transcription factor FoxP3,FoxP3)表达的影响。方法筛选2010年6月至2013年10月在台州市中心医院就诊的哮喘患儿,将其分成轻、中、重度组,门诊正常体检儿童为正常对照组;采用酶联免疫分析法检测治疗前后IFN-γ、IL-4水平,采用流式细胞术检测表达FoxP3的CD4调节性T细胞及亚型比例。结果共纳入哮喘患儿68例。其中轻度哮喘组25例,平均年龄(6.3±4.1)岁;中度哮喘组28例,平均年龄(5.3±3.8)岁;重度哮喘组15例,平均年龄(5.8±4.5)岁。正常对照组25例,平均年龄(5.2±2.8)岁。治疗前3个哮喘组外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞比例[轻度(10.8±1.5)%,中度(11.4±1.4)%,重度(9.9±1.0)%]和CD4^+CD25^+FoxP3^+表达水平[轻度(4.7±0.4),中度(3.9±0.8),重度(3.5±0.7)]均低于对照组[CD4^+CD25^+调节性T细胞比例(13.7±2.0)%,CD4^+CD25^+FoxP3^+(5.4±0.6)],差异有统计学意义(P<0.05),且随病情加重表达下降;IL-4表达[轻度(22.7±2.7)ng/L,中度(29.0±5.6)ng/L,重度(31.5±3.3)ng/L]显著高于对照组[(17.8±1.6)ng/L],差异有统计学意义(P<0.05),并随着疾病的加重表达增加。治疗前各哮喘组IFN-γ水平[轻度(21.9±2.8)ng/L,中度(20.5±3.4)ng/L,重度(16.1±3.2)ng/L]显著低于对照组[(25.8±3.4)ng/L],差异有统计学意义(P<0.05)。治疗前各哮喘组外周血CD4^+CD25^+调节性T细胞比例和CD4^+CD25^+FoxP3^+表达水平显著低于治疗后[CD4^+CD25^+调节性T细胞比例:轻度(13.9±2.2)%,中度(13.4±1.7)%,重度(13.5±2.0)%;CD4^+CD25^+FoxP3^+:轻度(5.6±0.8),中度(4.9±0.8),重度(5.2±0.9)],而IL-4表达高于治疗后[轻度(1 8.1±2.9)ng/L,中度(19.3±2.8)ng/L,重度(19.6±1.9)ng/L],差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗前轻度哮喘组IFN-γ表达显著低于治疗后[(26.5±3.4)ng/L],差异有统计学意义(P<0.05);中、高度与治疗后相比[中度(23.5±3.7)ng/L,重度(19.9±3.1)ng/L],差异无统计学意义(P>0.05);所有检测项目经治疗后与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论哮喘患儿体内存在辅助T细胞(T helper cell,Th)1/Th2失衡,可能是哮喘发病的重要原因,布地奈德能有效改善Th1/Th2失衡,并通过调节FoxP3的表达发挥治疗作用。

CC类趋化因子22和叉头状翅膀样转录因子3在胆管癌组织中的表达及意义

目的探讨CC类趋化因22(C-C class chemokines 22,CCL22)和叉头状翅膀样转录因子3(forkhead/winged helix transcription factor 3,FOXP3)在胆管癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测70例胆管癌组织和15例非肿瘤胆道上皮组织中CCL22、FOXP3的表达情况,分析其与胆管癌临床和预后的关系。结果 70例胆管癌、15例非肿瘤胆道上皮组织中CCL22和FOXP3阳性表达率分别为62.4%(44/70)、20.0%(3/15)及71.4%(50/70)、13.3%(2/15)。CCL22和FOXP3蛋白在胆管癌组织中的表达水平均明显高于非肿瘤胆道上皮组织(P<0.01)。有淋巴结转移者和TNM分期Ⅲ+Ⅳ期者较无淋巴结转移者和TNM分期Ⅰ+Ⅱ期者CCL22和FOXP3的表达阳性率高,差异有统计学意义(P<0.05)。CCL22与FOXP3蛋白表达呈明显正相关(P<0.01)。CCL22和FOXP3蛋白阴性表达者生存时间明显长于阳性表达者(P<0.01)。结论 CCL22和FOXP3可能对胆管癌发展及预后产生重要影响。

BXSB小鼠肝叉状头/翅膀状螺旋转录因子的表达

目的观察叉状头/翅膀状螺旋转录因子(Foxp3)在BXSB狼疮小鼠肝脏的表达,探索调节性T细胞在狼疮肝损害中的可能作用机制。方法以8周龄正常C57BL/6雄性小鼠作对照,用免疫组织化学及实时PCR方法,检测Foxp3在8周、16周龄雄性BXSB小鼠肝脏的表达。结果正常组C57BL/6小鼠肝组织Foxp3阳性细胞呈深棕黄色,位于肝小叶的肝血窦和(或)窦周隙内,且分布较均匀;8周龄及16周龄BXSB小鼠肝组织内Foxp3染色呈浅棕黄色,明显弱于正常鼠,且分布在界板周边较明显。8周、16周BXSB组小鼠肝组织内Foxp3 mRNA表达水平(0.30±0.04、0.18±0.03)较正常对照组(1.08±0.08)明显降低,16周BXSB组的Foxp3 mRNA表达水平较8周BXSB组明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论BXSB小鼠肝损害的发病机制可能与调节性T细胞的Foxp3分布和表达量下调有关。

叉头状螺旋转录因子3在结直肠癌组织中的表达及与临床病理的关系

目的探讨结直肠癌组织中叉头状螺旋转录因子Foxp3的表达水平以及与结直肠癌患者临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学染色检测45例结直肠癌组织和癌旁组织中Foxp3的表达。结果结直肠癌组织中Foxp3的阳性表达率71.1%(32/45)明显高于癌旁组织阳性表达率22.2%(10/45),两者差异有统计学意义(P<0.01),且Foxp3表达水平与肿瘤的分期和淋巴结转移有相关性(P<0.05);肿瘤分期为Ⅲ期/Ⅳ期,以及淋巴结转移的结直肠癌组织中的Foxp3阳性表达率高于肿瘤分期Ⅰ期/Ⅱ期、以及淋巴结未转移的结直肠癌组织,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 Foxp3在结直肠癌组织中高表达,有助于判断结直肠癌转移潜能,有望成为结直肠癌评估诊断的新靶点。

翼状螺旋转录因子3及白细胞介素-10联合临床特征预测男性肛管内尖锐湿疣复发的价值

目的分析翼状螺旋转录因子3(Foxp3)、白细胞介素-10(IL-10)联合临床特征预测男性肛管内尖锐湿疣复发的价值。方法回顾性分析160例肛管内尖锐湿疣男性患者临床资料,按照复发情况分为复发组(n=98)和未复发组(n=62),比较2组临床特征及Foxp3、IL-10水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析Foxp3、IL-10最佳截断值,采用Logistic回归分析模型分析尖锐湿疣复发的危险因素。结果复发组单纯手术切除、熬夜、嗜酒、人类乳头瘤病毒-脱氧核糖核酸(HPV-DNA)分型为高危及混合、合并其他性病、疣体直径≥0.5 cm、药物中断患者比率及Foxp3、IL-10水平高于未复发组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,Foxp3、IL-10的曲线下面积分别为0.881、0.910。Logistic回归分析显示,Foxp3≥0.195%、IL-10≥394.210 ng/L、单纯手术切除、熬夜、嗜酒、HPV-DNA分型为高危及混合、合并其他性病、疣体直径≥0.5 cm、药物中断是尖锐湿疣患者复发的危险因素。结论Foxp3≥0.195%、IL-10≥394.210 ng/L、单纯手术切除、熬夜、嗜酒、HPV-DNA分型为高危及混合、合并其他性病、疣体直径≥0.5 cm、药物中断是尖锐湿疣患者复发的危险因素。

转录因子叉状头螺旋转录因子3在斑秃患者外周血单个核细胞中的表达

目的:探讨斑秃患者外周血单个核细胞(PBMCs)中转录因子叉状头螺旋转录因子(FOXP)3蛋白的表达水平。方法 :将52例斑秃患者分为活动期组18例,稳定期组34例;局限型斑秃组41例,重型斑秃组11例。选取50例健康人作为正常对照组。采用蛋白质印迹法(WB)检测2组PBMCs中FOXP3蛋白表达水平,并进行相关性分析。结果:正常对照组PBMCs中FOXP3蛋白表达均值为1.33±0.66,斑秃患者活动期组为0.45±0.34,稳定期组为0.80±0.42,3组间比较差异有统计学意义(F=20.89,P<0.05);活动期组和稳定期组蛋白表达水平均低于正常对照组(P<0.05),斑秃活动期组低于稳定期组(P<0.05)。重型斑秃组FOXP3蛋白表达均值为0.41±0.26,局限型斑秃组为0.75±0.43,与正常对照组比较,3组蛋白表达差异有统计学意义(F=19.77,P<0.05);且重型斑秃组和局限型斑秃组均低于正常对照组(P<0.05),重型斑秃组低于局限型斑秃组(P<0.05)。斑秃患者PBMCs中FOXP3蛋白表达水平与斑秃病情的严重程度(SALT)呈负相关(r=-0.33,P<0.05)。结论:斑秃患者PBMCs中转录因子FOXP3蛋白的表达水平降低可能与斑秃的细胞免疫失调有关。

信号转导和转录活化因子3和碱性螺旋-环-螺旋转录因子1在卵巢恶性上皮肿瘤中的表达

目的探讨信号转导和转录活化因子3(STAT3)和碱性螺旋-环-螺旋转录因子1(Twist1)在卵巢恶性上皮肿瘤中的表达,并分析其表达失调与卵巢癌发生和发展的关系。方法收集2015年3月~2016年12月于武汉大学人民医院行手术的49例卵巢恶性上皮肿瘤患者和14例卵巢良性肿瘤患者的组织,应用免疫组化SP法检测STAT3和Twist1蛋白的表达情况,比较其在早期卵巢癌和晚期卵巢癌中的表达差异,并作Pearson相关性分析。结果STAT3和Twist1在卵巢癌中的阳性表达率明显高于卵巢良性肿瘤,差异有统计学意义(P<0.05);二者在晚期卵巢癌患者中的阳性表达率明显高于早期卵巢癌,差异有统计学意义(P<0.05);Twist1与STAT3在早期和晚期卵巢癌中的阳性表达均呈正相关(r=0.653、0.798,均P<0.05)。结论 STAT3和Twist1在卵巢癌的发生、发展和恶化中发挥着重要作用,其阳性表达率与卵巢癌FIGO分期相关,其机制可能是通过上皮-间质转化实现的。

联合抑制低氧诱导因子1α与信号转导和转录活化因子3对人喉鳞状细胞癌裸鼠移植瘤放疗的影响

目的探讨联合抑制低氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor 1α,HIF-1α)与信号转导和转录活化因子3(signal transducer and activatorof transcription3,STAT3)对裸鼠人喉鳞状细胞癌(简称鳞癌)移植瘤放疗增敏作用其机制。方法将制备的喉鳞癌移植瘤裸鼠随机分为空白对照组(A)、放疗组(B)、放疗联合AG490组(C)、放疗联合PX-478组(D)和放疗联合AG490加PX-478组(E)。测量并计算移植瘤体积的变化,应用免疫组织化学法检测Ki67和HIF-1α表达。应用Westernblot法检测PARP-1裂解片段表达。结果荷瘤小鼠肿瘤体积在E组与C组、D组相比均明显减小,差异具有极显著性(t=12.367、11.598,P均<0.01)。HIF-1α表达在E组与C组、D组相比明显减低((t=5.422、3.000,P均<0.05)。Ki67指数在E组与C组、D组比较统计学均有极显著性差异(t=4.479、4.352,P均<0.01)。PARP-1表达E组与C组、D组相比均明显增高(t=5.507、7.102,P均<0.05)。结论喉癌裸鼠移植瘤体内实验证明联合抑制STAT3和HIF-1α信号途径对放疗有明显增敏作用。

口腔鳞状细胞癌Runt相关转录因子3启动子区CpG岛甲基化状态的研究

目的研究口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)中Runt相关转录因子3(runt-relatedtranscription factor 3,RUNX3)基因启动子区的甲基化状态与其表达及病理参数之间的相关性。方法应用逆转录聚合酶链反应和免疫组织化学技术分析10例口腔正常黏膜组织和30例OSCC组织中RUNX3 mRNA和蛋白的表达;应用甲基化特异性聚合酶链反应分析10例口腔正常黏膜组织和30例OSCC组织及其相应癌旁组织中RUNX3基因启动子区CpG岛甲基化状态;分析RUNX3启动子区甲基化及表达与临床病理参数之间的关系。结果 30例OSCC组织中,73.3%(22/30)呈现mRNA以及蛋白表达下调或缺失。30例OSCC组织及对应癌旁组织中CpG岛甲基化检出率分别为70.0%(21/30)和55.3%(16/30),两者之间差异无统计学意义(P=0.184)。统计学分析表明RUNX3的表达与其启动子区CpG岛高甲基化呈显著负相关(P=0.001),但发现其甲基化状态与临床病例参数间的关系无统计学意义。结论 OSCC中RUNX3的表达下调或缺失是一种常发事件,启动子区CpG岛高甲基化是其主要的失活机制,且后者可以发生在癌变的早期阶段。