翘嘴红鲌生物特性及池塘养殖高产实验

翘嘴红鲌出身名门,淡水珍品,为广大人民群众所喜爱。在我国北方地区,翘嘴红鲌、松江鲈、黄河鲤、松花江鳜并称中国四大名鱼,在江浙沪,翘嘴红鲌、银鱼、白虾称为“太湖三白”。可见,翘嘴红鲌红鲌在祖国大江南北都享有盛誉,得到广泛喜爱。大湖股份自2000年上市以来,一直进行着翘嘴红鲌的养殖研究工作,首先是翘嘴红鲌的人工繁殖及苗种培育.

翘嘴红鲌池塘集约化养殖技术

翘嘴红鲌又名白鱼、白水鱼,属鲤科,鲌亚科,俗称翘白、白鱼等,是鱼中上品。翘嘴红鲌适宜的生长温度为20~32℃,在0~38℃温度范围内都可生长,主要分布在长江流域各主要水系及附属湖泊。其体型大、生长速度快、肉质细嫩、味道鲜美、营养丰富,是品质较高的鱼类,深受广大消费者喜欢。长沙市望城区翘嘴红鲌池塘集约化养殖,并取得了较好的经济效益,现将翘嘴红鲌苗种繁育.

基于Illumina HiSeq平台的翘嘴红鲌转录组测序分析

目的:翘嘴红鲌(Erythroculter ilishaeformis)作为中国重要的经济性鱼类,现受到生态环境和人为因素的影响,种质资源极速下降,因此从分子层面评估种群遗传结构及多样性。方法:以翘嘴红鲌为研究对象,使用高通量测序技术对肌肉和肝脏进行转录组测序,经过质控和过滤后,获得967109550 clean read。结果:对clean read进行组装拼接,获得80945107条unigene序列和137435647条transcript序列。注释到NR、Swiss-Port、Pfam、GO、KEGG Pathway、COG数据库的unigene分别为38324、23493、22944、28884、21890和27730条。在6个数据库平均得到注释的unigene为27210条。GO功能注释中,28884条unigenes分配到53个功能群,GO功能条目中注释较多的是结合功能、细胞组分、细胞过程、膜组分和细胞器官等。KEGG pathway的富集分析发现,在新陈代谢、基因信息处理、环境信息处理、人体疾病、有机体系统、细胞过程等6个信号代谢途径中有21890条unigenes获得注释。利用MISA程序对unigene进行检索,共测出33405个位点,分布于21396条unigene中,其发生频率达50.99%,出现频率达79.62%。SSR重复类型以单核苷酸重叠型最多(60.00%),其次为二核苷酸重叠型(26.42%)、三核苷酸重叠型(9.07%)和四核苷酸重叠型(2.99%)。五核苷酸重叠型(0.47%)和六核苷酸重叠型(0.04%)为最少。结论:翘嘴红鲌的转录组测序为种质资源和遗传结构的研究提供了相关的数据支撑,也为后续发掘翘嘴红鲌功能基因及相关分子生物学的研究提供相关依据。

翘嘴红鲌(♀)×团头鲂(♂)杂种F1的形态特征及遗传分析

2006-2007年,在浙江湖州,通过翘嘴红鲌(♀)和团头鲂(♂)间的属间杂交,成功获得了杂种F1,并通过对杂种F1及其父母本的形态、核型和基因组分析比较,探讨了杂种F1的性状变异和遗传组成情况。结果表明:(1)翘嘴红鲌(♀)和团头鲂(♂)间具有良好的亲和力,其杂交受精率、孵化率均达到90%以上;(2)翘嘴红鲌(♀)×团头鲂(♂)杂种F1的多数可数可量性状表现为中间型。在10个可数性状中,鳃耙数、侧线鳞等3个性状介于父母本之间,其平均杂种指数为54.56,显示杂种F1的可数性状接近于中间值,略偏向于父本团头鲂;在17个常规可量性状中,有9个性状与父母本差异显著,其中有4个性状偏向于父本,有3个偏向于母本,有2个超父母本偏离,其平均杂种指数为49.59,也显示杂种F1的可量性状处于中间值;进一步对框架参数的聚类和判别分析显示,杂种F1的框架体型与父母本差异较大,接近于中间型,但受母本影响较多;(3)杂种F1的染色体数(2n)为48,核型公式为18m+26sm+4st(NF=92),说明杂种F1为二倍体,并可预测杂种F1可育;(4)杂种F1大部分RAPD扩增条带能在亲本中找到,有的仅来自于父本,有的仅来自于母本,说明杂种F1为二倍体杂种;杂种F1与母本的相对遗传距离为0.4327,而与父本的遗传距离0.2312,前者大于后者,表明杂种F1与两亲本的遗传差异不是对等的,而是偏向父本一方,UPGMA系统树也同样证明了这一点。

翘嘴红鲌对饲料蛋白的营养需求及豆粕对鱼粉的适宜替代量

选择健康的翘嘴红鲌（Erythroculter ilishaeformis Bleeker）为实验鱼，体质量（12．84±0．60）g。实验分为两部分进行。实验Ⅰ以褐鱼粉为蛋白源，配制5个蛋白水平（31．04％、35．51％、40．89％、46．62％、50．33％）的等能、等必需氨基酸（EAA）平衡关联度的半精制饲料，探讨翘嘴红的对饲料蛋白的需求；经过8周饲养，实验Ⅰ的结果表明，饲料蛋白含量对翘嘴红鲌的增承率、饲料效率和蛋白效率具有显著影响。方差分析表明，40.89％饲料蛋白组的鱼体增重率显著高于31．04％、35．51％饲料蛋白组（P〈0．05），但是与46．62％和50．33％饲料蛋白组没有显著性差异（P〉0．05）；31．04％、35．51％和40．89％饲料蛋白组的蛋白效率显著高于46．62％和50．33％饲料蛋白组（P〈0．05）；40．89％、46．62％和50．33％饲料蛋白组的饲料效率显著高于31．04％和35．51％饲料蛋白组（P〈0．05）。依据折线模型分析翘嘴红鲌的增重率、二次多项式回归分析蛋白质效率，适宜饲料蛋白水平为37．43％～41．15％。实验Ⅱ以豆粕替代鱼粉，大豆蛋白分别替代0．0％、13．5％、27％、40．5％和54％的鱼粉蛋白，配制5个EAA关联度的等蛋白（40％）、等能（20MJ·kg^-1）的半精制饲料，探讨翘嘴红鲌饲料中大豆蛋白对鱼粉蛋白的适宜替代量。结果表明，当大豆蛋白分别替代13．5％、27．0％和40．5％的鱼粉蛋白时，翘嘴红鲌的增重率和蛋白效率与对照组差异不显著（P〉0．05），而且都显著高于54．0％替代组（P〈0．05），因此，本实验条件下，大豆蛋白对鱼粉蛋白的最大替代量为40．5％，饲料动、植物蛋白适宜比为3：2。

饲料中不同碳水化合物水平对翘嘴红鲌生长及血液指标和糖代谢酶的影响

选用540尾翘嘴红鲌,随机分成高、中、无碳水化合物3组,每组设3个重复。日粮保持总能一致,以等量可消化糖替代等量蛋白,即分高碳水化合物组(含可消化糖23.98%(以下均为质量分数),粗蛋白40.53%)、中碳水化合物组(含可消化糖14.45%,粗蛋白50.14%)、无碳水化合物组(含可消化糖为0,粗蛋白63.38%),饲养8周,测定鱼体血液指标、糖代谢酶活性及生长等指标。试验结果表明:与无碳水化合物组比较,中碳水化合物组显著增加了血液胆固醇含量,降低了己糖激酶活性(P<0.05);高碳水化合物组显著降低了增重率、特定生长率、肌肉粗蛋白及粗灰分含量(P<0.05),显著增加了血糖含量、葡萄糖激酶含量、丙酮酸激酶活性、肝胰脏粗蛋白及粗脂肪含量(P<0.05)。与中碳水化合物组相比,高碳水化合物组也显著增加了肝体比、血液甘油三酯含量、葡萄糖激酶活性、肝胰脏粗蛋白及粗脂肪含量(P<0.05),无碳水化合物组显著降低了胆固醇含量(P<0.05)。两者之间其他指标差异不显著。因此高糖日粮可诱导翘嘴红鲌肝脏葡萄糖激酶、丙酮酸激酶等糖代谢酶活性,促进了营养物质在肝脏等内脏中沉积,但是可能不利于生长。

饲料蛋白水平及豆粕替代鱼粉比例对翘嘴红鲌消化酶活性的影响

本文旨在研究饲料蛋白水平、豆粕替代鱼粉对翘嘴红鲌(Erythroculter ilishaefor mis bleeker)消化酶活性的影响。以红鱼粉为饲料蛋白源,配制5个不同蛋白水平(31.04%、35.51%、40.89%、46.62%和50.33%)的等能、等必需氨基酸(EAA)平衡关联度的的半精制饲料,研究蛋白水平对翘嘴红鲌消化酶活性的影响;又以豆粕替代鱼粉,大豆蛋白分别替代0.0%、13.5%、27.0%、40.5%、54.0%的鱼粉蛋白,配制5个等蛋白、等能和不同EAA关联度的半精制饲料,研究饲料中豆粕替代鱼粉对翘嘴红鲌消化酶活性的影响。试验结果表明,饲料蛋白水平对翘嘴红鲌肠道和肝胰脏的蛋白酶活性具有显著影响,肠道和肝胰脏蛋白酶活性随着饲料蛋白水平提高呈显著增强(P<0.05)。饲料蛋白水平为50.33%时,肠道蛋白酶活性最高,达171.26U/mgPr,显著高于31.04%饲料蛋白组(P<0.05);40.89%和46.62%饲料蛋白组的肝胰脏蛋白酶活性分别为35.04U/mgPr和35.68U/mgPr,显著高于31.04%和35.51%组(P<0.05)。饲料蛋白水平对肠道和肝胰脏的淀粉酶与脂肪酶活性没有显著影响(P>0.05)。饲料中豆粕替代鱼粉对翘嘴红鲌肠道和肝胰脏的蛋白酶活性具有显著影响,肝胰脏和肠道的蛋白酶活性都随着豆粕替代量提高而显著降低(P<0.05)。豆粕替代量为40.5%时,肠道蛋白酶活性为133.0U/mgPr,显著低于对照组(P<0.05),27.0%大豆蛋白替代组的肝胰脏的蛋白酶活性为31.34U/mgPr,显著低于对照组(P<0.05)。肠道淀粉酶活性没有受到豆粕替代鱼粉的影响(P>0.05),但肝胰脏淀粉酶活性随着豆粕替代量的提高而增强(P<0.05)。肝胰脏和肠道的脂肪酶活性不受饲料中豆粕替代鱼粉的影响(P>0.05)。

太湖翘嘴红鲌胚胎发育及胚后发育观察

对从太湖收集的野生翘嘴红鲌（Erythroculter ilishaeformis Bleeker）经人工繁殖获得子一代，并在池塘养殖条件下对其进行人工培育获得成熟亲鱼。于2005年6月，经人工催产、人工授精获得受精卵，对其胚胎及胚后发育全过程进行了系统观察。结果表明，池塘养殖条件下人工培育能获得成熟亲鱼，经人工催产所获得的翘嘴红鲌受精卵为圆球型，呈墨绿色、青灰色、黄色等3种颜色；平均卵径为0．9mm（0．72～1．18mm），吸水后平均卵径为1．2mm。翘嘴红鲌胚胎发育过程可分为19期，在水温23-25℃范围内，受精30min后开始第1次卵裂，受精后9h 20min开始形成器官，受精后约26h仔鱼开始出膜，刚出膜的仔鱼全长为4．10～4．67mm，胚胎发育总积温为619．82℃·h。翘嘴红鲌胚后发育过程可分为仔鱼和稚鱼2个阶段共15个发育期，在26～31℃水温下历时670h，其中仔鱼阶段从鱼苗孵出到腹鳍形成期，稚鱼阶段从鳞片出现到鳞片形成期。对各发育时期外部形态特征进行了详细的描述。[中国水产科学，2008，15（2）：204-214]

六个群体翘嘴红鲌肌肉生化组成的比较

比较分析了中国六群体翘嘴红鲌(Culter alburnus)的肌肉生化组成。试验材料分别取自太湖、兴凯湖、梁子湖、浮桥河水库和南湾水库五个野生群体,以及由太湖野生群体经人工驯养、繁殖数代获得的养殖群体。分析结果表明,各群体之间翘嘴红鲌肌肉的水分、灰分和粗蛋白含量差异不显著(P>0.05)。而养殖群体的粗脂肪含量显著高于其它五个野生群体(P<0.05)。南湾水库群体的多不饱和脂肪酸和必需脂肪酸含量均最高,必需脂肪酸含量由高到低依次为南湾水库群体>浮桥河水库群体>兴凯湖群体>梁子湖群体>养殖群体>太湖群体。氨基酸总含量由高到低依次为:太湖群体>兴凯湖群体>南湾水库群体>梁子湖群体>浮桥河水库群体>养殖群体,而必需氨基酸含量的高低顺序为:太湖群体>兴凯湖群体>梁子湖群体>南湾水库群体>浮桥河水库群体>养殖群体。相比之下,太湖群体的必需氨基酸指数(EAA I)最高,其次依次为:南湾水库群体>梁子湖群体>兴凯湖群体>浮桥河水库群体>养殖群体。各群体的大多数必需氨基酸氨基酸分(AAS)和化学分(CS)均大于1,仅兴凯湖群体的赖氨酸、苯丙氨酸+酪氨酸的AAS低于1,养殖群体的赖氨酸和缬氨酸的AAS和赖氨酸、蛋氨酸+半胱氨酸、苯丙氨酸+酪氨酸和缬氨酸的CS小于1,而成为各自的限制性氨基酸。综合所得的结果,野生群体的肌肉营养品质明显优于养殖群体,而野生群体中太湖、兴凯湖和南湾水库群体的肌肉品质相对较优。

高碳水化合物日粮对翘嘴红鲌生长、GK及GK mRNA表达的影响

探讨不同碳水化合物(CHO)水平对翘嘴红鲌生长、葡萄糖激酶(GK)及GK基因表达的影响。选用540尾(40.73±0.44)g翘嘴红鲌,随机分成为高CHO组、中CHO组、无CHO组,每组设三个重复,饲养8周,测定鱼体生长、血液指标、GK活性及GK mRNA水平等指标。结果显示,随着CHO添加量的增加,鱼体特定生长率与死亡率呈下降趋势,饵料系数刚好相反。摄食后,血糖先上升后趋于平缓,其中高CHO组相对高,无糖组低;血浆甘油三酯先上升后下降再上升又下降,其中高CHO组相对高,中CHO组最低;无CHO组血浆胆固醇、中CHO组HK活性、高CHO组GDH相对较低,其他各组在投喂后都呈先上升后下降。GK活性总体呈上升趋势,各组在禁食时,检测不到GK活性,饲料CHO含量越高,GK活性也越高,但是GK mRNA的水平与CHO含量并不呈线性关系。血糖、GK活性与GK mRNA的水平之间有一定的相关性,摄食高CHO饲料可诱导GK酶活性及基因的表达,造成持续高血糖,这可能不利于生长。

饲料脂肪对翘嘴红鲌生长、葡萄糖激酶和葡萄糖-6-磷酸酶活性与基因表达的影响

选用360尾翘嘴红鲌(Erythrocutler ilishaeformis Bleeker),体质量约40g。随机分成为2组,分别为高脂组(脂肪质量分数19.93%,碳水化合物质量分数14.45%)、低脂组(脂肪质量分数9.92%,碳水化合物质量分数12.38%),每组设3个重复,饲养8周。分别于摄食后0h、3h、6h、12h、24h测定血液指标、糖代谢酶葡萄糖激酶(Glucokinase,GK,E.C.2.7.1.1)以及葡萄糖-6-磷酸酶(glucose-6-phosphatase,G6Pase,E.C.3.1.3.9)活性及基因表达,并分析高脂肪与低脂肪水平日粮对翘嘴红鲌生长的影响。与低脂水平日粮相比,高脂水平日粮组血液甘油三酯水平和游离脂肪酸水平分别在摄食后3h、12h有增加现象,肝胰脏粗蛋白与脂肪含量有显著增加(P<0.05)。与低脂水平日粮相比,在摄食后3～12h高脂肪水平日粮组糖代谢酶GK的mRNA水平显著增加(P<0.05),但是日粮脂肪水平并不能显著影响GK活性(P>0.05)。在摄食后3～24h高脂肪水平日粮组糖代谢酶G6Pase的mRNA水平得到显著促进,并在摄食后24hG6Pase活性显著增加(P<0.05)。因此,摄食高脂肪水平日粮能增加肝胰脏粗蛋白与脂肪含量,造成翘嘴红鲌高血糖效应,诱导G6Pase酶活性及基因的表达,这可能是影响翘嘴红鲌碳水化合物利用的原因之一。

7个不同翘嘴红鲌群体的形态差异分析

应用聚类分析、主成分分析和判别分析三种多元分析方法,比较研究了翘嘴红鲌(Erythroculter ilishaefor-mis)7个不同群体间的形态差异。聚类分析结果表明,7个群体分为三支,南湾、兴凯湖、太湖和养殖群体之间的形态最为接近,首先聚为一支,梁子湖和三溪口群体聚为另一支,而浮桥河群体则相对独立为一支。三个分支中浮桥河群体与其他群体的亲缘关系相对较远。主成分分析显示,可量数据和框架数据等31项形态特征中头部和尾部的长度对各群体间的差异贡献率最大,其中,太湖、梁子湖和三溪口群体间的差异最为显著。以判别分析建立的判别函数,对7个不同群体的综合判别率为90%。分析结果显示翘嘴红鲌7个不同群体在形态上已产生一定程度的差异,应用三种多元分析方法可以将各群体有效地区分开来。

兴凯湖翘嘴红肌肉营养成分分析

采用国标生化分析方法对兴凯湖野生翘嘴红(Erythroculterilishaeformis)和养殖翘嘴红肌肉的营养成分(粗蛋白、粗脂肪、水分、灰分、氨基酸、脂肪酸及微量元素)进行分析。野生样品体重246.5～342.6g,采于2001年6月;养殖样品体重297.5～389.7g,采于2000年9月。结果表明,野生翘嘴红与养殖翘嘴红肌肉中的营养成分在组成上是一致的,在含量上存在着差异,野生翘嘴红肌肉中必需氨基酸含量以及微量元素K、Na、Mg、Se均高于养殖品种,但脂肪含量低于后者。

翘嘴红鲌幼鱼最适蛋白需求量的研究

以鱼粉为蛋白源,配制5个不同蛋白水平的等能、等氨基酸平衡模式的半纯合饲料,饲养翘嘴红鱼白幼鱼2个月,探讨蛋白质的最适需要量。结果表明:饲料蛋白质水平对鱼的增重率、蛋白效率均具有显著的影响(P<0 05),质量分数为42 76%的饲料组鱼体增重显著高于32 58%、37 64%饲料组(P<0 05),但与47 53%和52 49%饲料组没有显著差异(P>0 05)。蛋白效率在各组之间的差异与增重率在各组之间的变化相类似。翘嘴红鱼白幼鱼最大增重的适宜蛋白水平为43 19%～48 68%,蛋白效率最大的饲料蛋白质质量分数为42 50%,饲料蛋白质量分数为37 64%、42 76%、47 53%3个饲料组的蛋白效率差异不显著(P>0 05)。在本试验条件下,翘嘴红鱼白幼鱼的蛋白质最适需要量为42 50%～43 19%。

丹江口水库翘嘴红鲌(Erythroculter ilishaeformis)遗传多样性的RAPD和ISSR分析

利用RAPD和ISSR两种分子标记技术,分析了丹江口水库野生翘嘴红鲌30个个体的遗传多样性。用10个RAPD引物对其基因组DNA进行扩增,共获得66个重复性好且谱带清晰的扩增位点,片段大小在200—2000bp之间,其中多态性位点24个,多态位点比例为36.36%;个体间遗传距离在0.0338—0.1426之间,平均为0.0941;Shannon信息指数为0.1083。用10个ISSR引物共检测到73个位点,其中多态性位点28个,多态位点比例38.36%;个体间遗传距离在0.0376—0.1652之间,平均为0.1058;Shannon信息指数为0.1196。结果显示,丹江口水库野生翘嘴红鲌的多态位点比例、平均遗传距离和Shannon信息指数均较大,说明其有较丰富的遗传多样性。

翘嘴红鲌幼鱼对蛋白质的需要量

用酪蛋白和白鱼粉为蛋白源配制7种蛋白含量为32.07%～45.64%的半精制试验饲料,喂养7组3个重复的翘嘴红幼鱼8周。饲养试验在室内玻璃钢水箱中进行,试验鱼每尾平均初始体重2.88±0.22g,水温为25～29℃。结果显示:蛋白质水平为41.05%的试验组的鱼体增重、特定生长率、饲料效率和蛋白质效率等指标均显著高于其它试验组(P<0.05);对特定生长率(Y)和饲料效率(F)二项指标的二次曲线回归分析求得翘嘴红幼鱼饲料蛋白最适值分别为40.94%和41.35%;饲料蛋白水平对鱼体(全鱼)的水分、粗蛋白和粗灰分的含量无显著影响(P>0.05),而较高水平饲料蛋白会使鱼体脂肪含量明显降低(P<0.05)。

碳水化合物、脂肪对翘嘴红鲌PEPCK基因表达的影响

使用实时定量RT-PCR测定了摄食无糖(脂肪9.13%,蛋白63.38%)、高糖(糖23.93%,脂肪9.94%,蛋白40.53%)、低脂(中糖)(脂肪9.92%,糖14.45%,蛋白50.14%)、高脂(脂肪19.93%,糖14.98%,蛋白40.88%)饲料的翘嘴红鲌在摄食后0、3、6、12、24hPEPCK的表达水平。结果显示,饲料中糖含量一致的情况下,高脂组和低脂组翘嘴红鲌PEPCK的表达差异不显著;脂肪水平一致时,高糖(23.93%)和中糖(14.45%)饲料组翘嘴红鲌PEPCK的表达,除了在0、3h时高糖组显著高外,6、12、24h没显著差异,但12、24h高糖组PEPCK相对较低,分别是中糖组的75%和65%;无糖组PEPCK的表达量除了在12h和其他各组一致(均较低)外,在其他时间均明显高,特别是摄食后24h其表达量为其他组同期的2.5～4.7倍。由此可见,当饲料中至少含14.45%糖但又低于23.93%时,饲料中的营养成分对PEPCK的表达没显著影响,而无糖饲料PEPCK的表达明显较高,和无糖饲料会引起较强的糖异生作用一致。

翘嘴红鲌胃、肠道及肝胰脏主要消化酶活力的研究

对翘嘴红鲌胃肠道及肝胰脏的淀粉酶、脂肪酶、蛋白酶3种主要消化酶活力进行初步研究。结果表明:胃、肠道、肝胰脏的淀粉酶的最适pH均为6.0;脂肪酶的最适pH分别为8.0、8.0、7.5;胃蛋白酶最适pH为2.0,肠道、肝胰脏蛋白酶的最适pH分别为7.0、7.5。同时研究了在最适pH条件下,不同反应温度对3种主要消化酶的活性影响。结果表明:翘嘴红鲌淀粉酶在肝胰脏、肠道、胃的最适温度分别为30℃,30℃,25℃;脂肪酶的最适温度分别为40℃,30℃,35℃;蛋白酶的最适温度分别为50℃,50℃,40℃。在一定的温度范围内,3种消化酶的活力均呈先上升后下降趋势。最适反应温度下翘嘴红鲌脂肪酶与淀粉酶的活力分布均呈现肝胰脏>肠道>胃,蛋白酶活力肠道与胃接近,大于肝胰脏蛋白酶活力。

翘嘴红鲌鱼种对八种蛋白质饲料原料的消化率

本试验按照“70 %基础饲料 +30 %被测原料”的饲料配制方法 ,用三氧化二铬指标物 ,测定了翘嘴红鱼种 (体重 12 5± 1 5 g )对鱼粉、血粉、蚕蛹粉、酵母、豆粕、花生粕、菜籽粕、棉籽粕等 8种常用的饲料原料的干物质、蛋白质、粗脂肪的表观消化率。结果表明 :翘嘴红对 8种原料的干物质表观消化率和蛋白质表观消化率分别为 4 3 4 3%～ 86 90 %和 6 6 34%～ 95 18% ,对 5种原料的脂肪表观消化率为 6 6 6 9%～ 94 16 %。

松花江水系翘嘴红鱼白生长模型的研究

用vonBertalanff生长模型对松花江水系翘嘴红鱼白(E ilishaeformis)的生长进行拟合,该模型可较好地反映翘嘴红鱼白生长过程及其变化规律。同时对松花江水系翘嘴红鱼白的生长和资源利用问题进行了探讨。