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桑树翻译调控肿瘤蛋白(TCTP)基因的克隆及其在温度胁迫下的表达变化 被引量:6
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作者 雷朋 何庆玲 +2 位作者 贺芳 吴琼英 潘刚 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期405-409,共5页
翻译调控肿瘤蛋白(TCTP)是一类广泛存在于真核生物中且具有多种重要生物学功能的蛋白质家族。利用RT-PCR和RACE技术从广东桑(Morus atropurpurea)品种中桑5801号植株的根部克隆了一种TCTP蛋白的编码基因,命名为Ma-TCTP(Gen Bank登录号:K... 翻译调控肿瘤蛋白(TCTP)是一类广泛存在于真核生物中且具有多种重要生物学功能的蛋白质家族。利用RT-PCR和RACE技术从广东桑(Morus atropurpurea)品种中桑5801号植株的根部克隆了一种TCTP蛋白的编码基因,命名为Ma-TCTP(Gen Bank登录号:KP228013)。Ma-TCTP基因c DNA全长841 bp,包括507 bp的ORF以及101 bp的5'-UTR和233 bp的3'-UTR,ORF编码168个氨基酸,蛋白质分子质量为18.736 2 k D,等电点为4.53。实时荧光定量PCR检测Ma-TCTP基因在桑树的根部、茎部和叶片中均有表达,其中在根部组织中的表达量最高,茎中次之,叶片中最低。在低温(4℃)和高温(35℃)胁迫下,Ma-TCTP基因在桑树根部、茎部和叶片组织的表达量均大幅上升,其中在叶片中的表达量升高最为明显,推测Ma-TCTP基因可能参与桑树对温度逆境胁迫的生理应激响应过程。 展开更多
关键词 桑树 翻译调控肿瘤蛋白 基因克隆 序列特征 实时荧光定量PCR 温度胁迫
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翻译调控肿瘤蛋白的结构、功能以及在肿瘤发展中的作用 被引量:1
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作者 肖斌 阳正盟 +2 位作者 肖鸣 陈昊 马强 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2017年第2期148-154,共7页
翻译调控肿瘤蛋白(translational controlled tumor protein,TCTP),又称p23、组胺释放因子(histamine releasing factor,HRF)等,是一类在动植物中具有高度保守性和同源性的蛋白,主要介导细胞凋亡、细胞增殖与分化、细胞骨架重排、炎症... 翻译调控肿瘤蛋白(translational controlled tumor protein,TCTP),又称p23、组胺释放因子(histamine releasing factor,HRF)等,是一类在动植物中具有高度保守性和同源性的蛋白,主要介导细胞凋亡、细胞增殖与分化、细胞骨架重排、炎症反应等重要事件,与肿瘤的发生发展进程密切相关.针对TCTP的相关研究不仅有助于进一步了解各种肿瘤的生理病理周期,同时也提示其在寻找治愈肿瘤的方法中有望成为新的靶点.本文将对TCTP的结构、生物学功能以及在各种肿瘤中的作用进行综述. 展开更多
关键词 翻译调控肿瘤蛋白 结构 细胞凋亡 细胞周期 肿瘤
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翻译调控肿瘤蛋白的原核表达及纯化
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作者 陈智嘉 谷励 +2 位作者 王景龙 许小敏 陈思嘉 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第9期1139-1142,共4页
目的原核表达并纯化翻译调控肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)。方法以人乳腺癌细胞系MCF-7总RNA为模板,PCR扩增TCTP基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。His Trap FF层... 目的原核表达并纯化翻译调控肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)。方法以人乳腺癌细胞系MCF-7总RNA为模板,PCR扩增TCTP基因,克隆至原核表达载体pET-28a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达。His Trap FF层析柱纯化重组蛋白后,进行Western blot鉴定。结果克隆的目的基因序列正确,未发生碱基突变;重组表达质粒经双酶切鉴定构建正确;表达的重组蛋白相对分子质量约为20 000,主要以包涵体形式表达;纯化后纯度为80%,可与兔抗人TCTP多克隆抗体特异性结合。结论已成功在大肠杆菌BL21(DE3)中表达并纯化了TCTP,为进一步研究其在肿瘤等疾病发生、发展及治疗中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 翻译调控肿瘤蛋白 原核细胞 基因表达 纯化
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TGFBI和TCTP在食管癌组织中的表达及肿瘤耐药相关性 被引量:3
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作者 徐越 吴宛君 +4 位作者 白美玲 韩丹 刘东艳 刘扬 王志勇 《河北北方学院学报(自然科学版)》 2017年第4期1-3,7,共4页
目的探讨转化生长因子β诱导基因(transforming growth factor beta induced gene,TGFBI)和翻译调控肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)在食管鳞癌组织中的表达与临床病理因素的联系及其与肿瘤耐药性之间的相关... 目的探讨转化生长因子β诱导基因(transforming growth factor beta induced gene,TGFBI)和翻译调控肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)在食管鳞癌组织中的表达与临床病理因素的联系及其与肿瘤耐药性之间的相关性。方法免疫组化SP法检测90例食管鳞癌标本及33例正常食管黏膜组织中TGFBI和TCTP的表达情况,分析二者与食管癌耐药的关系及二者之间的相关性。结果食管鳞癌组织中TGFBI和TCTP的阳性表达率均高于正常组织(P<0.05);分化程度越低,TGFBI和TCTP的阳性表达越明显,呈负相关性(P<0.05);且TGFBI和TCTP的表达与肿瘤TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05),而与患者年龄、性别等无关;食管鳞癌组织中TGFBI和TCTP表达呈正相关(P<0.05)。结论联合检测TGFBI和TCTP可为进一步研究食管鳞状细胞癌逆转耐药机制和判断患者预后提供理论依据。 展开更多
关键词 转化生长因子β诱导基因 翻译调控肿瘤蛋白 耐药逆转 食管鳞癌
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C2株蓝氏贾第鞭毛虫TCTP基因的克隆、表达和序列分析(英文)
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作者 王沂 余源 +3 位作者 田喜凤 李冀 楮晗 王洋 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期717-723,共7页
目的克隆C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的翻译调控肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)编码区,对其进行生物信息学分析和原核表达。方法根据WB株贾第虫TCTP编码区序列设计引物,以C2株贾第虫基因... 目的克隆C2株蓝氏贾第鞭毛虫(Giardia lamblia,简称贾第虫)的翻译调控肿瘤蛋白(Translationally controlled tumor protein,TCTP)编码区,对其进行生物信息学分析和原核表达。方法根据WB株贾第虫TCTP编码区序列设计引物,以C2株贾第虫基因组DNA为模板扩增获得TCTP编码区片段,双酶切连入原核表达载体pET-28a(+),将酶切和测序验证正确的重组质粒转化E.coli Rosetta(DE3),经IPTG诱导表达融合蛋白,SDS-PAGE及Western blot鉴定蛋白产物,采用Ni-NTA经亲和层析纯化重组蛋白。同时根据测序结果分析C2株贾第虫TCTP蛋白结构特征和进化关系。结果克隆了包含酶切位点全长470bp的C2株贾第虫TCTP编码区,构建了原核表达载体pET-28a(+)-TCTP,在Rosetta(DE3)中表达、纯化得到了相对分子量约18.5kDa的融合蛋白,与预期相符;测序结果显示C2株贾第虫TCTP序列与WB株相同,生物信息学分析显示贾第虫TCTP蛋白虽然序列长度较其它物种更短但与裂殖酵母TCTP空间结构相似,均由4个β折叠和3个主要的α螺旋组成,位于序列中部的不规则环状结构更小,仅9个氨基酸残基组成,在进化上与其它真核生物亲缘关系较远。结论成功克隆表达了贾第虫TCTP,为TCTP功能及贾第虫致病机制的研究提供了实验依据。 展开更多
关键词 蓝氏贾第鞭毛虫 翻译调控肿瘤蛋白 原核表达 序列分析
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采用酵母双杂交系统筛选橡胶树HbTCTP1互作蛋白 被引量:4
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作者 韦永选 邓治 +4 位作者 刘长仁 谢仕猛 向贤 夏志辉 李德军 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期3538-3544,共7页
翻译控制肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)是一种在生物体中普遍存在和结构上高度保守的多功能蛋白。本研究以橡胶树Hb TCTP1基因的开放阅读框(open reading frame,ORF)作为诱饵,采用酵母双杂交系统构建筛选Hb ... 翻译控制肿瘤蛋白(translationally controlled tumor protein,TCTP)是一种在生物体中普遍存在和结构上高度保守的多功能蛋白。本研究以橡胶树Hb TCTP1基因的开放阅读框(open reading frame,ORF)作为诱饵,采用酵母双杂交系统构建筛选Hb TCTP1互作蛋白的诱饵表达载体p BD-GAL4-Hb TCTP1,并在p ADGAL4-2.1质粒构建的橡胶树胶乳cDNA文库中筛选Hb TCTP1互作蛋白。将获得的两个与Hb TCTP1互作的阳性克隆进行测序,比对NCBI非丰富蛋白数据库发现:它们分别是橡胶延长因子(rubber elongation factor,REF)和60S核糖体L44蛋白(60S ribosomal protein L44,RPL44)。本研究结果对进一步揭示Hb TCTP1在橡胶树中的作用具有重要意义。 展开更多
关键词 橡胶树 翻译调控肿瘤蛋白(TCTP) 酵母双杂交系统 死皮
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