临床常用药物对体外培养的复发性翼状胬肉成纤维细胞的抑制效果比较

背景翼状胬肉是眼科常见的眼表疾病，临床上常用的防治翼状胬肉复发的药物包括地塞米松（DXM）、干扰素α-2b（IFN—α2b）、丝裂霉素c（MMC）、5-氟尿嘧啶（5-Fu）、环孢素A（CsA）和他克莫司（FK506），但鲜见关于这6种药物对复发性翼状胬肉成纤维细胞生物学行为抑制作用的比较研究。目的观察DXM、IFN—α2b、MMC、5-FU、CSA和FK506对体外培养的人复发性翼状胬肉成纤维细胞的抑制作用，筛选治疗复发性翼状胬肉的最佳药物。方法收集2015年5月至2016年7月在天津医科大学眼科医院行复发性翼状胬肉切除术的患者术中切除的组织标本7例7眼，采用组织块培养法分离和培养成纤维细胞，采用免疫组织化学法对培养细胞进行鉴定。分别在培养液中添加DXM、IFN—α2b、MMC、5-FU、CsA和FK506作用48h，未添加药物的培养细胞作为对照组。采用CCK-8法检测各种药物对培养细胞的生长抑制率，分别计算药物的半数抑制浓度（IC50）。在药物IC50剂量下作用48h，采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡比例和细胞周期的变化；采用免疫组织化学法检测细胞中增生细胞核抗原（PCNA）的表达变化。结果培养的细胞为长梭形，呈旋涡状排列，细胞中波形蛋白表达阳性，角蛋白无表达。DXM、IFN-α2b、MMC、5-FU、CsA和FK506对成纤维细胞的IC50分别为（3．5×10^3±2．83×10^-2）、（6．1×10^2±3．6×10^-3）、（3．2×10^-1-I-1×10^-4）、（2．2×10^1±1．2×10^-3）、（6．3×10^1±2．5×10^-3）和（6．0×10^1±0．0×10^0）mg／L。在IC50剂量下分别作用后48h，IFN—α2b组、CsA组、MMC组、FK506组、DXM组和5-FU组凋亡细胞比例分别为（35．00±3．21）％、（30．37±1．67）％、（26．11±0．75）％、（22．01±0．07）％、（20．95±1．68）％和（19．85±0．52）％，与对照组的（11．38±2．18）％比较细胞凋亡比例均明显升高，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。对照组G0／G1期、S期和G2／M期细胞比例分别为（85．64±2．62）％、（5．29±1．56）％和（2．73±2．66）％，各药物组G0／G1期细胞比例明显下降，S期和G2／M期细胞明显升高，差异均有统计学意义（均P〈0．05），对细胞周期阻滞效果由强到弱依次为MMC、CsA、5-FU、DXM、IFN—α2b和FK506。对照组细胞中可见有大量PCNA阳性表达，各药物组细胞中PCNA表达强度均弱于对照组。对照组、FK506组、DXM组、5-FU组、IFN—α2b组、CsA组和MMC组细胞中PCNA的阳性表达率分别为（95．00±2．00）％、（82．67±5．04）％、（80．00±2．78）％、（64．00±6．55）％、（38．00±3．00）％、（32．00±4．36）％和（29．67±3．02）％，总体比较差异有统计学意义（F=25．995，P=0．000），各药物组细胞中PCNA阳性表达率均明显低于对照组，差异均有统计学意义（均P〈0．05）。结论DXM、IFN—α2b、MMC、5-FU、CsA和FK506均可抑制复发性翼状胬肉成纤维细胞的增生并促进细胞凋亡，其中MMC和CsA的作用更为显著。

翼状胬肉结膜移植术中不同缝线方法的疗效比较

目的评估埋线式缝合法应用于翼状胬肉切除联合自体结膜移植术中的效果,并比较其与连续缝合法和间断缝合法的差异。方法采用随机对照临床研究方法,纳入2020年5—7月在上海爱尔眼科医院就诊并行翼状胬肉切除联合自体结膜移植术的原发性翼状胬肉患者120例120眼。采用随机数表法将患者分为埋线法、连续缝合法和间断缝合法3个组,每组40眼。记录手术时长,并于术后第0.5、1、3、7、10、14天和第1、3、6个月进行随访。采用五点法记录术眼疼痛评分;采用荧光素钠染色法评估角膜上皮愈合情况;采用裂隙灯显微镜观察植片脱落、移位或翼状胬肉复发等并发症发生情况。结果连续缝合法、间断缝合法和埋线法的手术时间分别为(14.45±2.78)、(16.28±2.24)和(16.58±2.22)min,总体比较差异有统计学意义(F=8.98,P<0.05),其中连续缝合法手术时间明显短于间断缝合法和埋线法,差异均有统计学意义(均P<0.017),埋线法与间断缝合法相比差异无统计学意义(P>0.017)。3个组患者术后不同时间点疼痛评分总体比较差异有统计学意义(P<0.05),术后第0.5、1、3、7、10天,埋线法疼痛评分均低于连续缝合法及间断缝合法,差异均有统计学意义(均P<0.05)。术后第7天,3个组角膜上皮未愈合率总体比较差异无统计学意义(P=1.000);术后第10天,3个组角膜上皮均愈合。术后6个月,3个组均未出现植片移位、脱落、坏死及感染、眼球运动障碍等并发症。3个组翼状胬肉复发率总体比较差异无统计学意义(P=1.000)。结论埋线缝合法可有效减轻翼状胬肉结膜移植术后刺激症状,同时对植片固定具有良好的稳定性,与传统间断缝合法相比,其不增加复发率、不良反应发生率、手术时间以及患者的经济负担。

羊膜移植联合干扰素滴眼液治疗原发性翼状胬肉效果评估

目的评估羊膜移植联合应用重组人干扰素α2b滴眼液(简称干扰素滴眼液)治疗原发性翼状胬肉的临床效果。方法采用随机对照临床试验方法,纳入于2018年6—12月在北京同仁眼科中心就诊并按时完成随访的原发性翼状胬肉患者49例55眼,采用随机数字表法将受试者分为试验组23例25眼和对照组26例30眼。试验组采用翼状胬肉切除联合羊膜移植术+干扰素滴眼液进行治疗,对照组采用翼状胬肉切除术联合自体结膜移植术。试验组于术后第3天采用干扰素滴眼液点眼,连续用药3个月,分别于术后3 d、7 d、1个月、3个月以及半年对患者进行随访,观察患者的最佳矫正视力(BCVA)、角膜上皮缺损修复情况以及翼状胬肉复发率。结果术后6个月,2个组BCVA下降、稳定和提高的眼数分布比较,差异无统计学意义(P=0.259)。术后2个组术眼均有1眼在14 d内角膜上皮完全修复,其余术眼角膜上皮均在7 d内完全修复,2个组间不同角膜上皮愈合时间眼数分布比较,差异无统计学意义(P=1.000)。术后6个月,2个组患眼均未出现翼状胬肉真性复发,2个组结膜增生1、2、3级眼数比较,差异无统计学意义(Z=0.461,P=0.497)。试验组与对照组中出现纤维血管组织增生者分别占12.0%(3/25)和6.7%(2/30),但纤维血管组织增生均仅处于结膜与植片交界处,未到达植片中央及角膜缘。结论与传统翼状胬肉切除联合自体结膜移植术比较,羊膜移植联合干扰素滴眼液点眼治疗原发性翼状胬肉复发率无升高,对健康结膜组织损伤小。

Clinical trial of three treatment methods for pterygium

Objective:To study the effect of simple excision, amniotic membrane transplantation(AMT)and limbal-conjunctival autograft transplantation(LCAT)for treating pterygium. Methods: Forty-eight cases (48 eyes) with pterygium were randomly assigned to 3 groups:16 cases (16 eyes) with pterygium underwent simple excision (group A), 16 eyes underwent amniotic membrane transplantation (AMT) (group B), and 16 eyes with pterygia underwent limbal- conjunctival transplantation (group C).Results: With follow-up of 3 months to 25 months, 5 cases (31%) of pterygia in group A and 1 case (6.2%) of pterygia in group B showed recurrence. No patients in group C developed recurrence. Conclusion: The recurrent rate of pterygium after amniotic membrane transplantation and limbal-conjunctival autograft transplantation were much lower, but the latter was more simple, safe and no rejection .So limbal - conjunctival autograft transplantation is the best surgery method for pterygium.