青翘和老翘中连翘苷的含量测定

目的 :测定青翘与老翘中连翘苷含量。方法 :。双波长薄层扫描法。结果 :青翘中连翘苷含量为 0 .0 76% ;老翘中仅为 0 .0 1 2 %。与报道的青翘中连翘酯苷含量高于老翘的实验结果相同 ,结论 :本文结果与文献报道的就抗菌效价而言青翘优于老翘的结论吻合。目前市售药材青老翘混杂 ,有必要进行深入研究 。

伏牛山区青翘与老翘中连翘苷含量的测定

目的测定伏牛山青翘与老翘中连翘苷的含量。方法以HPLC法测定伏牛山青翘与老翘中连翘苷的含量。结果连翘苷进样量在0.43-3.44μg范围内线性良好,其回归方程为Y=1E＋07X＋20 488,r=0.999 4,青翘中连翘苷含量较老翘中高近1倍多。结论该研究为伏牛山区连翘最佳采收期的确定和其质量标准的建立提供了实验依据。

商洛不同产地青翘和老翘中连翘苷及连翘酯苷A含量研究

目的比较商洛不同产地连翘果实(青翘和老翘)中有效成分连翘苷及连翘酯苷A的含量。方法高效液相色谱法(HPLC)。结果青翘中连翘苷及连翘酯苷A含量普遍高于老翘,其中,山阳石头梁、山阳赵川所采样品连翘苷含量分别高达0.862%、0.782%,洛南灵口老翘中连翘苷含量最低为0.106%。丹凤峦庄、洛南灵口所采样品连翘酯苷A含量分别高达13.24%、12.18%,山阳石头梁老翘中连翘酯苷A含量最低为0.371%。结论商洛不同产地的青翘和老翘中连翘苷、连翘酯苷A含量差异十分明显,在开展连翘资源开发和规范化种植时应加强种质的选择,合理选择采摘时间。

老翘提取物的抑菌活性研究

目的研究老翘提取物体外抑菌活性,为进一步从连翘中提取高效抑菌物质奠定基础。方法以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌为代表菌种,采用K-B纸片扩散法对老翘提取物的体外抑菌活性进行研究。结果老翘的不同提取物对供试菌均有一定的抑菌活性,其中乙酸乙酯部位具有较强的抑菌活性,其次为正丁醇部位。结论老翘不同提取物对3种菌均有抑制作用。

伏牛山区青翘与老翘药材质量的检测

目的检测伏牛山区青翘与老翘药材质量。方法《中国药典》方法测定青翘与老翘药材的水分、灰分、水浸出物、醇浸出物,分光光度法测定总黄酮含量,高效液相色谱(HPLC)法测定连翘苷含量。结果伏牛山区青翘与老翘药材的水分、灰分、水浸出物、醇浸出物含量均达到《中国药典》标准,老翘中连翘苷含量低于《中国药典》标准。结论伏牛山区青翘与老翘药材的质量不同。

青翘和老翘中多种成分含量的比较

目的:测定并比较青翘与老翘中连翘酯苷,连翘苷和连翘脂素的含量。方法:以HPLC法测定青翘与老翘中连翘酯苷,连翘苷和连翘脂素的含量。连翘酯苷,连翘苷和连翘脂素分别在3.65μg.mL-1～116.67μg.mL-1,0.31μg.mL-1～10.0μg.mL-1和0.31μg.mL-1～9.89μg.mL-1范围内线性良好。R均大于0.999,回收率均≥90%。结果:青翘中的连翘酯苷为老翘的10.67倍,连翘苷相近,连翘脂素为老翘的1/2倍。结论:在治疗疾病的过程中,应该根据疾病的不同和青翘、老翘所含成分含量的差别选择用药。

不同溶剂提取对青翘、老翘主要成分含量测定的影响

目的:探讨不同溶剂提取对青翘、老翘中主要成分连翘酯苷、连翘苷、芦丁含量的影响,为临床制药提供依据。方法:采用水、乙醇为溶剂连续回流提取青翘、老翘中主要成分,HPLC法分析连翘酯苷、连翘苷、芦丁的含量。结果:以乙醇为溶剂提取出的连翘酯苷、连翘苷、芦丁的含量高于水提取的含量;同种溶剂提取,青翘中主要成分含量高于老翘。结论:不同溶剂提取对连翘中主要成分有影响。

青翘与老翘挥发油化学成分的比较研究

目的：研究与比较青翘和老翘中的挥发性成分。方法：采用水蒸气蒸馏法提取挥发油。采用气相-质谱联用技术测定药材中挥发油成分的含量。色谱条件：色谱柱为HP-5MS,进样口温度为200℃,载气为氮气,分流比为20∶1,程序升温,流速为1 ml/min,进样量为1μl;质谱条件：离子源为电轰击离子源,电子能量为70 e V,接口温度为280℃,离子源温度为230℃,四极杆温度为150℃,电子倍增电压为2 300 V,质量扫描范围为29~350 amu。结果：挥发油提取得率高低顺序为青翘心〉青翘〉青翘壳〉老翘;青翘、老翘挥发油有18个共有峰,均以β-蒎烯含量最高,其次为α-蒎烯、β-水芹烯、松油烯-4-醇、松油烯等;此外,4-亚甲基-1-环己酮、3-环己烯-1-甲醇、对异丙基苯甲醛、香树烯、棕榈酸、肉豆蔻醛6种成分仅老翘挥发油中可检出;而α-水芹烯、罗勒烯、α-松油醇、α-松香芹酮、Z-薄荷醇、乙酸龙脑酯、α-库比烯、大根香叶烯D 8种成分仅在青翘挥发油中检出。结论：青翘与老翘挥发油的主要化学成分基本一致,但也存在一定差异,该发现或许能够为连翘药效差异物质基础的研究提供一定依据。

青翘与老翘功效差异在经典方剂中的验证研究

目的采用经典方剂连翘散和银翘散验证青翘和老翘的功效差异,为指导连翘"一体两用"提供实验依据。方法采用金黄色葡萄球菌制作豚鼠疮疡模型,将40只豚鼠随机分为空白组、模型组、连翘散青翘组和连翘散老翘组,空白组和模型组灌服生理盐水,连翘散青翘组和连翘散老翘组灌服1.2 g原药材/kg药液,连续7 d,观察各组模型豚鼠疮疡症状积分、血常规及病理变化。采用10%脂多糖雾化吸入法诱导大鼠急性肺损伤模型,将40只SD大鼠随机分为空白组、模型组、银翘散青翘组和银翘散老翘组,空白组和模型组灌服生理盐水,银翘散青翘组和银翘散老翘组灌服4 g原药材/kg药液,连续10 d,观察各组大鼠肺洗液白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、IL-1β水平。结果连翘散青翘组抑制豚鼠疮疡伤口红肿作用较老翘组起效快,但在抑制豚鼠疮疡伤口分泌物和病理改善方面与连翘散老翘组差异无统计学意义。银翘散青翘组大鼠较老翘组IL-6、TNF-α、IL-1β含量降低,但差异无统计学意义。结论不同复方中青翘与老翘功效有一定差异。

老翘的化学成分研究

对老翘进行化学成分和细胞毒活性的研究。利用硅胶柱色谱、SepHadex LH-20柱色谱、ODS柱色谱和半制备HPLC等多种方法进行分离纯化,通过1H NMR、13 C NMR、ESI-MS等方法解析化合物的结构。共分离鉴定得到了17个化合物,分别鉴定为五福花苷酸(1)、连翘苷(2)、芦丁(3)、(+)-松脂素-4-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(4)、(+)-表松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷(5)、(+)-羟基表松脂素-4′′-β-D-葡萄糖(6)、连翘脂苷A(7)、连翘新苷(8)、木通苯乙醇苷B(9)、(7 R,8 S,7′R,8′S)-8-hydroxypinoresinol-4-O-β-D-glucopyranoside(10)、木通苯乙醇苷A(11)、车前草苷A(12)、连翘酯苷E(13)、落叶松脂醇-4′-O-β-D-葡萄糖苷(14)、连翘酯苷G(15)、连翘酯苷H(16)、(+)松脂素单甲基醚-β-D-葡萄糖甙(17)。其中,化合物4、6、9、10、14、17均是首次从该属植物中分离得到。通过MTT法对17个单体化合物进行体外抗肿瘤活性筛选,活性测定结果表明化合物1~17均没有抑制肿瘤细胞增殖作用。

青翘和老翘的HPLC指纹图谱比较及聚类分析、主成分分析

目的:建立青翘和老翘药材的指纹图谱并比较,同时进行聚类分析和主成分分析。方法:采用高效液相色谱法。色谱柱为Hypersil C_(18),流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液(梯度洗脱),检测波长为235 nm,柱温为25℃,流速为1.0 mL/min,进样量为10μL。以连翘苷为参照,绘制8批青翘(Q1~Q8)和6批老翘(L1~L6)药材的HPLC指纹图谱;采用《中药色谱指纹图谱相似度评价系统(2012版)》进行相似度评价,确定共有峰;采用SPSS 23.0软件进行聚类分析和主成分分析。结果:青翘和老翘药材共有19个共有峰,指认了其中6个,分别为连翘酯苷A、芦丁、松脂素-β-D-葡萄糖苷、连翘苷、槲皮素、连翘脂素;青翘与老翘药材的相似度为0.351~0.767。聚类分析结果显示,青翘和老翘药材样品可聚为4类,其中L1~L6聚为一类、Q1聚为一类、Q2~Q6聚为一类、Q7~Q8聚为一类。主成分分析结果显示,前3个主成分的累积方差贡献率为83.14%,L1~L6分布较近,Q2~Q6分布较近,Q7~Q8分布较近,Q1分布较为独立,与聚类分析结果一致。结论:青翘和老翘的指纹图谱共有峰经相似度评价、聚类分析及主成分分析均有明显差异,所建HPLC指纹图谱可用于综合评价和比较青翘和老翘药材的质量。

《中国药典》方法比较青翘、老翘中连翘苷和连翘酯苷A的含量

目的:本试验用药典方法测定了青翘、老翘中连翘苷和连翘酯苷A的含量,为进一步对其质量标准进行研究奠定基础。方法:采用高效液相色谱法,分别在277 nm,330 nm波长下检测连翘苷(C27H34O11)和连翘酯苷A(C29H36O15)的含量。结果:连翘苷和连翘酯苷A分别在0.22~4.40μg和0.108~2.16μg范围内线性关系良好,平均回收率分别为100.04%和98.84%,RSD%分别为2.12%和1.97%。结论:青翘、老翘中连翘苷和连翘酯苷A的含量有较大差别。

不同采收期老翘中化学成分含量测定

[目的]通过对不同采收期老翘内连翘苷、连翘酯苷A、浸出物的含量测定,为老翘适宜采收期的确定提供科学依据。[方法]采用HPLC法测定不同采收期老翘果实中连翘苷、连翘酯苷A的含量；采用《中国药典》2010版一部（附录ⅩΑ）项下醇溶性浸出物冷浸法测定；以Luna5uC18（2）100A（250 mm×4.6 mm,5μm）为色谱柱,连翘苷测定流动相为乙腈-水（25∶75,V∶V）,检测波长为277 nm,柱温为室温,流速为1.0 mL/min；连翘酯苷A测定流动相为乙腈-0.4%冰醋酸溶液（15∶85,V∶V）,检测波长为330 nm,柱温为室温,流速为1.0mL/min。[结果]连翘苷在3.33～13.32μg范围内线性关系良好（R2=0.999 7）,平均回收率为98.9%,RSD=1.8%；连翘酯苷A在4.17～6.69μg具有良好的线性关系（R2=0.999 7）,平均回收率为101.7%,RSD=0.9%。[结论]连翘苷、连翘酯苷A、浸出物在老翘整个采收期试验过程中都呈现不断下降的趋势,其中连翘苷的含量测定结果在老翘整个采收期试验过程中都达不到2010版药典的规定标准,连翘酯苷A、浸出物的含量结果分别在2013年1月20日、2月25日采集的样品测定结果中达不到2010版药典的规定标准。

老翘中三种苯乙醇苷类化合物生物活性比较

比较老翘中三种苯乙醇苷类化合物:连翘酯苷A(FA)、R,S-梾木苷(SS)和梾木苷甲基醚(SSM)的体外生物活性,为研究老翘中的活性成分提供依据。通过检测1,1-二苯基-2-苦肼基(DPPH·)清除率,考察三种成分的抗氧化活性;利用二倍稀释法测定三种成分对金黄色葡萄球菌以及大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC),比较抑菌活性;通过对脂多糖(LPS)诱导小鼠巨噬细胞(RAW264.7)产生的NO释放的抑制作用,比较其抗炎活性。DPPH自由基清除率结果表明三者都具有一定的抗氧化活性,梾木苷甲基醚与连翘酯苷A活性相当,略优于R,S-梾木苷;最低抑菌浓度结果表明三者均具有抑菌活性,其中,连翘酯苷A抑菌活性优于梾木苷甲基醚和R,S-梾木苷;NO释放量结果表明,三者均可剂量依赖性显著降低NO含量,且抗炎活性相当。老翘中三种苯乙醇苷类化合物均具有较好的体外生物活性,且三者活性相当,均可作为老翘的活性成分。

基于谱-效关联分析筛选青翘和老翘抗炎活性差异的质量标志物

目的探究青翘和老翘抗炎活性差异的质量标志物(quality marker)。方法采用高效液相色谱(HPLC)结合化学计量学对青翘和老翘进行指纹图谱分析;采用脂多糖(LPS)诱导小鼠单核巨噬细胞RAW264.7炎症模型,以炎症因子一氧化氮(NO)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的水平,评价青翘和老翘抗炎活性差异;采用SPSS软件关联指纹图谱色谱峰与抗炎活性的关系,考察青翘和老翘的质量差异性成分和抗炎活性之间的相关性;采用分子对接技术验证质量标质物与炎症核心靶点的结合能力。结果青翘和老翘指纹图谱中分别被标定14个共有峰和16个共有峰,10个色谱峰(VIP>1)被筛选为青翘和老翘质量差异性成分;青翘、老翘均有明显的抗炎活性,抑制NO的效果,老翘>青翘(P<0.001),抑制TNF-α和IL-6方面,青翘>老翘(P<0.001)。谱效关联分析显示,造成青翘和老翘抗炎活性差异的标志物有10个。依据质量标志物“五原则”优选连翘苷、连翘酯苷A、芦丁和连翘酯素4个成分,作为青翘和老翘抗炎差异的质量标志物。分子对接的结合能(≤-5)表明优选成分与抗炎核心靶点间具有良好的结合能力。结论本研究建立的HPLC指纹图谱方法良好可行,筛选出4个成分为青翘和老翘抗炎活性差异的质量标志物,为青翘和老翘科学应用提供更充分的理论依据。

HPLC测定山西安泽青翘、老翘主要成分含量

目的:比较山西安泽青翘与老翘中连翘酯苷、连翘苷,芦丁的含量,为临床上连翘的合理应用、保证临床疗效提供理论依据。方法:青翘、老翘药材粉末中加甲醇超声波提取45 min;采用HPLC测定3种主要成分的含量,色谱柱为HITACHI C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相甲醇-0.1%醋酸水,梯度洗脱,流速1 mL.min-1,柱温25℃,测定波长280 nm,进样量10μL。结果:青翘中连翘酯苷,连翘苷、芦丁的含量分别为2.38%,0.37%,0.26%;老翘中3种成分的含量分别为0.74%,0.20%,0.09%。结论:山西安泽青翘中连翘酯苷、连翘苷、芦丁的含量均明显高于老翘。

山西安泽青翘与老翘的氨基酸组分和微量元素分析

目的:测定山西安泽青翘与老翘的氨基酸组分和微量元素的含量,对其营养价值进行比较、评价,为综合开发、合理利用青翘与老翘资源提供依据。方法:采用氨基酸自动分析仪测定氨基酸组分,采用原子吸收法测定Ca,Fe,Zn,Cu,Pb。结果:测得青翘与老翘均含有17种氨基酸,总含量分别为6.54%,5.27%,人体必需氨基酸总量分别为2.57%,2.10%。青翘与老翘均含有Ca,Fe,Zn和Cu微量元素,其中Ca的含量分别为2 380,3 408μg·g-1;Fe的含量分别为188,298μg·g-1;Pb的含量均<5.0μg·g-1。结论:山西安泽青翘与老翘含有种类一致的较丰富的氨基酸和微量元素,均为营养价值丰富的保健及药用原料,且青翘氨基酸含量优于老翘,老翘微量元素含量高于青翘。

近红外光谱法快速测定老翘醇浸出物的含量

利用近红外光谱技术建立了一种快速测定老翘中醇浸出物含量的方法。运用近红外光谱技术结合偏最小二乘法(PLS),建立了药材中醇浸出物含量的定量分析模型。其内部交叉验证决定系数(R2)为0.995 9,校正均方根偏差(RMSEC)为0.590,预测均方根偏差(RMSEP)为0.592,交互验证均方根偏差(RMSECV)为1.029,主因子数为10。该模型可快速测定老翘醇浸出物的含量。

不同溶剂提取青翘、老翘的活性成分及抑菌活性的比较研究

目的探讨不同溶剂提取青翘和老翘的活性成分与抑菌活性比较研究。方法采用连续回流提取青翘、老翘中主要成分并测定含量。并采用K-B纸片扩散法,研究不同溶剂提取物对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、白色念球菌的抑制作用。结果青翘的抑菌活性优于老翘,对于大肠杆菌和白色念珠菌,不同提取物的抑菌活性与3个活性成分含量基本一致,而对金黄色葡萄球菌不是很一致。结论不同溶剂提取青翘和老翘提取物对三种菌有不同程度的抑制活性。