老龄兔骨髓间充质干细胞体外培养影响因素的研究

目的 研究体外培养老龄兔骨髓间充质干细胞（MSCs）的影响因素。方法 以密度梯度离心技术及贴壁筛选法相结合，在体外分离检测MSCs表面CD29、CD34、CD44、CD45的表达；诱导分化反向证明部分细胞可分化为成骨细胞及脂肪细胞，具有分化潜能，鉴定该细胞群为干细胞。细胞记数法计算MSCs倍增时间；观察供体自然老龄情况下。不同换液时间、不同血清浓度、不同种植密度等因素对MSCs生长的影响。结果 MSCs CD29和CD44表达阳性，不表达造血干细胞标志CD34和CD45。高密度接种（3×10^6-4×10^6个／cm^2），低浓度（8％-10％）血清的低糖DMEM培养，在体外可保持MSCs未分化增殖状态，并获得纯度较高同源性较好的干细胞群，高浓度血清（20％）并不加速细胞生长，而促进分化。结论 MSCs具有体外多分化潜能。老龄供体骨髓中MSCs的生长、增殖特性受不同换液时间、不同血清浓度及不同种植密度等因素的影响。

老龄兔骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的最佳时间

目的:探讨老龄兔骨髓间充质干细胞(MSCs)移植治疗心肌梗死的最佳时间,为细胞移植治疗心肌细胞坏死性相关疾病提供前期的实验依据。方法:选择月龄大于或等于36个月的新西兰大耳白兔30只(36月龄兔相当人60岁左右,为老龄兔),建立心肌梗死模型,将造模成功兔随机分为6组(空白对照组、1 d组、1周组、2周组、3周组、4周组),每组5只;取标记后的MSCs细胞(密度为2×107.mL-1)200μL,分别多点注射于心肌梗死后1 d、1周、2周、3周、4周的心脏梗死区,空白对照组注射等量生理盐水。8周后进行心功能参数、心脏房室瓣血流率及血液动力学指标检测。结果:与对照组比较,1 d移植组心功能参数、心脏房室瓣血流率及血液动力学指标高于对照组(P<0.05);1周、2周及3周移植组心功能参数、心脏房室瓣血流率及血液动力学指标明显高于对照组(P<0.01);4周移植组与对照组比较心功能虽有提高,但差异无显著性(P>0.05);1周、2周及3周移植组心功能参数、心脏房室瓣血流率及血液动力学指标高于1 d移植组(P<0.05);1周、2周、3周三组之间比较差异无显著性(P>0.05)。结论:心肌梗死后不同时间进行相同剂量细胞移植时,1 d^3周行MSCs细胞移植治疗均能改善心功能,以第1~3周移植效果最佳。

老龄兔骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死最佳剂量的研究

目的探讨老龄兔骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死的最佳剂量,为细胞移植治疗心肌细胞坏死性相关疾病提供前期的实验依据。方法选择≥36个月龄的新西兰大耳白兔30只,建立心肌梗死模型,将造模成功兔随机分为4组(空白对照组、4×104低剂量组、4×105中剂量组、4×106高剂量组),每组5只;在心肌梗死1天后,用微量注射器抽取200μl密度为2×105/m、l2×106/m、l2×107/m l标记后的细胞悬液(剂量分别为4×104、4×105、4×106个),分别多点注射在心肌梗死区,空白对照组注射等量生理盐水,8 w后进行心功能参数、心脏房室瓣血流率及血液动力学指标检测。观察心肌梗死后相同时间,不同细胞剂量的移植对心功能的影响。结果与对照组比较,4×104低剂量组细胞移植治疗后心功能虽有提高,但差异无显著性(P>0.05);4×105中剂量组心功能参数、心脏房室瓣血流率及血液动力学指标高于对照组(P<0.05);4×106高剂量组心功能参数、心脏房室瓣血流率及血液动力学指标明显高于对照组(P<0.01);4×106高剂量组心功能参数、心脏房室瓣血流率及血液动力学指标高于4×105中剂量组(P<0.05)。结论相同心肌梗死时间、不同移植细胞剂量时,以移植4×106个高剂量组心功能改善更明显。