用改良的考马斯亮蓝染料结合法测定脑脊液蛋白质

用改良的考马斯亮蓝染料结合法测定脑脊液蛋白质广州市第二人民医院检验科（５１０１５０）彭慧敏，袁德辉我市医院实验室目前沿用的磺基水杨酸比浊法［１］存在灵敏度低，标本用量大，误差较大等问题。近年来，Ｂｒａｄｆｏｒｄ［２］等报道了用考马斯亮蓝Ｇ（２５０）染...

一种新的考马斯亮兰R—250固相染料结合法测蛋白质含量的方法

本文介绍了一种用考马斯亮兰Ｒ—２５０因相染料结合法测蛋白质含量的方法。将蛋白样品点在滤纸上，甲醇固定，考马斯亮兰Ｒ—２５０染色，脱色，用洗脱液洗脱下与染料结合的蛋白质，在波长６１０ｎｍ处测其光密度（ｏｐｔｉｃａｌｄｅｎｓｉｔｙ．Ｏ．Ｄ）值。方法简便，所用样品少，灵敏度高，检测线性范围在０．１ｇ／Ｌ～５ｇ／Ｌ间，重复性较好，批内变异３．５６％～６．６７％，批间变异１．４８％～７．０２％。样品稳定，染色后的滤纸可保存一个月，洗脱液体放置４８ｈ颜色不变。受干扰物质少是本法的一个特点，仅受ＳＤＳ、强碱等少数几种物质的干扰，不受叠氮钠、硫酸铵、ＴｒｔｏｎＸ－１００等物质的干扰。

辣椒秸秆生物炭对考马斯亮蓝染料的吸附性能研究

研究了不同热解温度下以辣椒秸秆为原材料制备的生物炭对水中考马斯亮蓝(CBB)染料的吸附特性,并对生物炭进行表征。结果表明,热解温度为700℃,烧制2 h下制备的辣椒秸秆生物炭对考马斯亮蓝的去除效果最好。在生物炭投加量为3 g/L,考马斯亮蓝染料初始质量浓度为50 mg/L,溶液pH为5,反应温度为25℃的条件下,吸附在120 min左右达到平衡,去除率可达92.66%,最大吸附量为20.51 mg/g。该吸附过程为单层吸附,符合伪二级动力学。辣椒秸秆生物炭可以有效去除水中的考马斯亮蓝染料。

考马斯亮蓝法检测胆石、胆汁蛋白含量

本文报告一种新的胆石、胆汁蛋白定量方法。测定的线性范围可达1000mg/L。棕色胆石蛋白批内X±SD;14.22±0.35mg％,CV％ 2.46％;批间X±SD:14.20±0.37mg％,CV2.6％;平均回收率100.88％(97.22～106.98％)。胆固醇石蛋白批内X±SD:2.99±0.10％,CV％3.34％;批间X±SD 2.95±0.15mg,CV％ 5.08％。黑色胆石蛋白批内X±SD 14.70±0.50mg％,CV％ 3.40％;批间X±SD: 14.86±0.76mg％,CV％ 5.11％。胆汁蛋白批内1854.8±35.4mg/L,CV％:2.86％;批间1860.9±90.1mg/L,CV％:4.88％。显色反应在几分钟内完成,且1.5小时内显色稳定。干扰因素少。本法具有简便快速、稳定可靠、灵敏、干扰少等优点,适用于科研及临床的胆石、胆汁蛋白质定量。

考马斯亮蓝法测定奶粉中蛋白质含量的研究

目的:本研究旨在建立利用酶标仪测定奶粉中蛋白质含量的方法。方法:采用考马斯亮蓝法测定蛋白质含量,蛋白质与考马斯亮蓝G-250结合,在595 nm处有最大吸收值。结果:该方法测得的奶粉的蛋白质含量为16.3 g/100g,与标示量(国标法)16.6 g/100 g相近。结论:此方法准确、便捷、快速重现性好、所需试剂量低,可代替紫外-可见分光光度法进行含量的测定,具有较好的前景。

低电荷柱撑蒙脱土对考马斯亮蓝的吸附性能研究

采用微波法制得低电荷锂化蒙脱土(the reduced-charge lithiated bentonite,RCBT),再制备羟基铝柱撑剂,插层于RCBT中制备低电荷铝柱撑蒙脱土(the aluminum-pillared bentonite,Al/RCBT)。对Al/RCBT进行结构和形貌表征并考察它对考马斯亮蓝的吸附性能。研究表明:羟基铝柱撑剂成功插入RCBT层间,使蒙脱土的层间距增大了0.78 nm;最佳吸附pH值为2,吸附30 mg/L考马斯亮蓝溶液40 min即达到平衡,吸附容量达17 mg/g;Al/RCBT对考马斯亮蓝的吸附符合准二级动力学模型和Freundlich等温模型。

一种简易的与考马斯亮蓝相结合的低背景银染法

1972年Kerenyi建立的凝胶电泳的银染色法由于灵敏度高而被广泛采用。此法创建初期常产生较深的背景染色,以致影响弱带的显示,后来几经改进,特别是Blum等人利用硫代硫酸钠的化学特性,发展了一种高灵敏度的低背景银染方法。

考马斯亮蓝法测定果汁中蛋白质的含量

采用考马斯亮蓝法,对不同果汁中的蛋白质含量进行了测定。结果表明:蛋白质浓度在10-80μg/mL内与吸光度有良好的线性关系(R2=0.9964);样品平均回收率(n=3)分别为99.2%、98.8%、101.8%,RSD分别为0.64%、0.81%和0.58%(n=3)。该方法具有快速、灵敏度高、重现性好等特点。

考马斯亮蓝G-250染色法测定草乌中可溶性蛋白质含量

采用考马斯亮蓝G-250染色法对草乌药材中可溶性蛋白质含量进行了测定,建立了快速、灵敏的测定蛋白质的方法.结果表明,考马斯亮蓝G-250染色法简单、迅速,且相对较为准确,是测定低浓度蛋白质含量的有效方法.

考马斯亮蓝法测定野木瓜多糖中蛋白质的含量

采用考马斯亮蓝染色法对野木瓜多糖中蛋白质含量进行测定,在波长595 nm处测定吸光度,实验表明标准蛋白质在1.67μg/mL￣16.67μg/mL之间呈现良好的线性关系,该法简便迅速,灵敏度高、重现性好,是测定野木瓜多糖中蛋白质含量的有效方法,并通过此法测得野木瓜多糖中蛋白质平均含量为12.17%。

考马斯亮蓝染色法检测人精子顶体反应的评价

为建立一种检测人精子顶体反应的简便实用的新技术，用３．５％高氯酸水溶液配制０．０５％考马斯亮蓝（Ｒ２５０）染色液浸染人精子３０ｍｉｎ，顶体完整者顶体区染成紫蓝色，顶体反应者则不染。对获能前后和钙离子载体Ａ２３１８７诱导顶体反应的精子进行染色并与经典的顶体反应检测技术ＰＳＡ法对照，两种方法检测顶体反应率无显著差异。方法学检验证明新技术结果可靠。本法操作简便、经济，普通显微镜即可检测，易于推广，克服了原有技术复杂昂贵的缺点，具有研究和临床诊断的良好价值。

考马斯亮蓝法测定核桃水溶性蛋白含量的研究

采用考马斯亮蓝G-250染色法对核桃粗蛋白中可溶性蛋白质含量进行了测定,结果表明,蛋白质浓度为10mg/mL^80mg/mL时与吸光度值有良好的线性关系,考马斯亮蓝G-250染色法简单、快速、灵敏,且相对较为准确,是测定低浓度蛋白质含量的有效方法。通过此方法,测得的核桃水溶性蛋白平均含量为8.37%。

应用考马斯亮蓝法测定总蛋白含量

目的 应用考马斯亮蓝法检测总蛋白含量。方法 应用考马斯亮蓝法与凯氏法和Ｌｏｗｒｙ法同时 进行不同生物制品的总蛋含量检测。结果 考马斯亮蓝法操作简便，灵敏度高，重复性好，测定蛋白的线性范围为 ５～２５ｕｇ，ｒ＝ ０．９９９５，ｎ＝５，平均回收率为１０１．３％。结论 考马斯亮蓝法是检测生物制品总蛋白含量的理想方法。

考马斯亮蓝显色剂变色反应机理的研究

应用光谱法研究了考马斯亮蓝G 2 5 0 (CBBG)显色剂变色反应的机理 ,考察了不同实验条件对CBBG显色剂吸收光谱的影响 .研究结果表明 ,CBBG显色剂在反应体系中呈现出从蓝色→绿色→棕红色等多种颜色变化 ,主要是由CBBG分子间疏水相互作用形成的聚集体聚集程度的不同所引起的 .

一种简便的考马斯亮蓝G250蛋白质染色方法

介绍一种快速、简便、几乎无背景的考马斯亮蓝G2 5 0 (CBBG2 5 0 )染色方法 .该方法所用试剂仅为稀盐酸和CBBG2 5 0 ,CBBG2 5 0的工作浓度为 0 0 0 15 % ,灵敏度达 0 0 2 μg/带 ,染色 2h达 70 % ,4h以上或染色过夜即可充分染色 .与以往的考马斯亮蓝染色方法相比 ,该方法有经济方便、灵敏度高、几乎无背景等优点 。

荧光光谱法和分子模拟技术研究考马斯亮蓝G-250与牛血清白蛋白的相互作用

采用多种光谱技术结合圆二色谱技术研究了考马斯亮蓝G-250(CBBG-250)相互作用于牛血清白蛋白(BSA),探究了两者之间的作用机理。荧光光谱结果表明BSA与CBBG-250结合形式是静态猝灭,随CBBG-250浓度增加,其形成常数随温度逐渐减小,结合比为1∶1,根据Stern-Volmer曲线计算焓变值(ΔH)和熵变值(ΔS)分别为-4.38kJ·mol^(-1)和-6.16J·mol^(-1)·K^(-1),均小于零,证明该过程是一个自发过程。傅里叶红外光谱测定结果表明CBBG-250的加入引起BSA结构的变化,随着CBBG-250溶液浓度的增加,BSA中色氨酸微环境极性被改变,在1 600~1 700cm^(-1)(酰胺带Ⅰ)和1 600~1 500cm^(-1)(酰胺带Ⅱ)处的特征吸收带蓝移。其中1 650cm^(-1)移动至1 710cm^(-1),1 544cm^(-1)移动到1 573cm^(-1),显示BSAα-螺旋(1 650~1 658cm^(-1))和β-折叠(1 620~1 640cm^(-1),1 675cm^(-1))结构发生变化,且α-螺旋含量比结合前有所降低。圆二色谱分析结果表明,两者间通过氢键和范德华力为主的作用力使得BSA二级结构发生变化,α-螺旋含量由42.15%下降至1.27%,该结果进一步被分子建模对接技术证明。

考马斯亮蓝显色液组分对蛋白质测定的影响

考马斯亮蓝（ＣＢＢ）显色法测定蛋白质含量的主要缺点之一是线性关系差．通过研究显色液组分对线性关系的影响，发现显色液Ｈ＋浓度是影响线性关系的主要因素，并提出了一个新的显色液配方来改善考马斯亮蓝蛋白质测定法的线性关系．

考马斯亮蓝染色法测定大豆茎叶中蛋白质含量

应用考马斯亮蓝染色法测定大豆茎叶中蛋白质含量。结果表明,该法测定大豆茎叶中蛋白质含量是可行的,其RSD为0.25%～1.27%,回收率为94.9%～106.4%,大豆茎叶蛋白质平均含量为7.673%和11.315%。该方法简便快速,灵敏度高、重现性好、准确率相对较高,可用于微量可溶性蛋白质含量的测定。

考马斯亮蓝G动力学光度法测定痕量铁的研究

研究了在稀盐酸介质中 ,α,α-联吡啶存在下 ,铁催化溴酸钾氧化考马斯亮蓝G,使其褪色这一新的指示反应及其动力学条件 ,建立了测定痕量铁的新方法。方法的检出限为 2 .2 6× 1 0 - 10 g/ m L,线性范围 0～ 0 .2 4μg/ 2 5 m L,用于食品及水中痕量铁的测定 。