快速凝胶荧光染色法在尿液蛋白电泳分析中的应用

尿蛋白变化通常是肾脏或其他脏器系统实质性损伤或功能性改变的反映。目前,在临床实验室中一般仅检测尿总蛋白水平[1],但这不能反映出尿蛋白的选择性情况。实际上,在肾小球滤过增加、肾小管重吸收减少以及肾小球、肾小管损伤释放或主动分泌等条件下,尿蛋白都会升高,并且在尿蛋白成分上出现一定的特征性。因此,除尿蛋白水平外,其成分分析对病因判断具有重要意义。

立显蛋白染色液在SDS-PAGE中检测微量蛋白的应用

目的探讨立显蛋白染色液在SDS-PAGE中检测微量蛋白的应用效果。方法制备SDS-PAGE胶,采用立显蛋白染色液及普通考马斯亮蓝(Coomassie brilliant blue,CBB)染色液,检测定量的牛血清白蛋白(bovine serum albumin,BSA)的敏感度及猪细小病毒VP2蛋白、猪蓝耳病病毒N蛋白、猪丹毒杆菌Fe蛋白和猪伪狂犬病病毒gB蛋白基因工程纯化样品的纯度。结果采用立显蛋白染色液染色可识别蛋白质含量为2.5ng的蛋白条带,敏感性高于普通CBB染色40倍。4种蛋白纯化样品经CBB染色后检测纯度均较高,但经立显蛋白染色液染色后,4种纯化蛋白样品均检测出杂蛋白,测定的纯度均有所下降,其中VP2及gB蛋白的纯度有较大幅度下降(分别由83.33%、100%降至51.8%、85.6%)。结论立显蛋白染色液染色SDS-PAGE胶中的蛋白条带敏感性高,快速简便,适用于微量蛋白质的检测。

HPMCP微胶囊蛋白质包裹量的测定方法

研究HPMCP微胶囊蛋白质包裹量的测定方法,为该药剂的价格评定、使用量的确定等提供理论依据和方法参考。分别用羧甲基纤维素钠、明胶、壳聚糖作分散质,复相乳液法制备HPMCP的BSA微胶囊;采用单因子设计试验,研究了壁材、乳化剂、分散质浓度对微胶囊包裹量的影响。结果得到所选用的分散质都可以制备出微胶囊,其呈圆形或椭圆形,没有粘结在一起的现象;壁材HPMCP和乳化剂蓖麻油对Bradford法和紫外吸收法检测微胶囊包裹量有影响,对福林-酚法没有影响;分散质CMC-Na对Bradford法有干扰,对福林-酚法和紫外吸收法没有影响,明胶和壳聚糖对Bradford法和福林-酚法没有影响,对紫外吸收法有干扰。综合得到所选用的3种方法中,福林-酚法适合测定HPMCP微胶囊蛋白质包裹量。